基因重組和雜交育種培訓(xùn)課程-資料下載頁
2025-01-07 18:00本頁面
【正文】 F因子為附加體質(zhì)粒 可脫離染色體在細胞內(nèi)獨立存在，可插入（整合）到染色體上 F因子的四種細胞形式 a） F菌株 ， 不含 F因子，沒有性菌毛，但可以通過接合作用接收 F因子而變成雄性菌株（ F+）； b） F+菌株 ， F因子獨立存在，細胞表面有性菌毛。 c） Hfr菌株 ， F因子插入到染色體 DNA上 ，細胞表面有性菌毛。 d） F′ 菌株 ， Hfr菌株內(nèi)的 F因子因不正常切割而脫離染色體時， 形成游離的但攜帶一小段染色體基因的 F因子，特稱為 F′因子。 細胞表面同樣有性菌毛。 （四 ） 原生質(zhì)體融合 （ protoplast fusion） 通過人為的方法，使遺傳性狀不同的兩細胞的原生質(zhì)體進行融合，借以獲得兼有雙親遺傳性狀的穩(wěn)定的重組子的過程，稱為 原生質(zhì)體融合 。由此法獲得的重組子，成為 融合子 （ fusant）。 選擇兩個有特殊價值的并帶有選擇性遺傳標記的細胞作為親本 脫壁酶 細菌或放線菌可用 溶菌酶 或 青霉素 處理， 真菌可用 蝸牛酶 或其他相應(yīng)的 脫壁酶 等 離心聚集 在高滲溶液中稀釋 加入促融合劑或電脈沖 各種選擇性培養(yǎng)基 原生質(zhì)體融合的主要步驟是： 原生質(zhì)體融合的重組頻率已大于 101（而誘變育種一般僅為 106）； 同種的不同 菌株間 或 種間 進行融合， 屬間、科間 甚至更遠緣的微生物或高等生物細胞間的融合，以期達到生產(chǎn)性狀更為優(yōu)良的新物種 。 二、真核微生物的基因重組 有性雜交 準性雜交 原生質(zhì)體融合 遺傳轉(zhuǎn)化 （一）有性雜交 （ sexual hybridization） 雜交 是在細胞水平上發(fā)生的一種遺傳重組方式。有性雜交 ，一般指不同遺傳型的兩性細胞間發(fā)生的接合和隨之進行的染色體重組，并產(chǎn)生新遺傳型后代的一種育種技術(shù)。 （二）準性雜交 （ parasexual hybridization） 準性生殖是一種類似于有性生殖，但比它更為原始 的一種兩性生殖方式，這是一種在同種而不同菌株的體細胞間發(fā)生融合，它可不借減數(shù)分裂而導(dǎo)致低頻率基因重組并產(chǎn)生重組子。 準性生殖過程： （ 1）菌絲聯(lián)結(jié)（ anastomosis） （ 2）形成異核體（ heterocaryon） （ 3）核融合（ nuclear fusion） 或核配（ caryogamy） （ 4）體細胞交換（ somatic crossingover） 和單倍體化 準性雜交育種 （ breeding by parasexuality） ： ① 選擇親本： 選擇來自不同菌株的合適的營養(yǎng)缺陷型作為準性雜交的親本。 ② 強制異合： 用人為的方法強制兩菌株形成異核體。 ③ 移單菌落： 將培養(yǎng)皿上長出的這種單菌落移種到基本培養(yǎng)基 [－ ]的斜面上。 ④ 驗穩(wěn)定性： 就是檢驗新菌株究竟是不穩(wěn)定的異核體，還是穩(wěn)定的雜合二倍體。 ⑤ 促進變異 在上述工作的基礎(chǔ)上，再經(jīng)過一系列生產(chǎn)性狀的測定，就有可能篩選到比較理想的準性雜交種。 演講完畢，謝謝觀看！
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