基因重組和雜交育種培訓課程(存儲版)
【正文】 傳性狀傳遞給 受體菌 的現(xiàn)象，稱為 普遍轉(zhuǎn)導 。 （ 2）人工轉(zhuǎn)化 用 CaCl2處理細胞，電穿孔等是常用的人工轉(zhuǎn)化手段。 膜相關 DNA結(jié)合蛋白 （ membraneassociated DNA binding protein） 細胞壁 自溶素 （ autolysin） 幾個核酸酶 4. 轉(zhuǎn)化因子 （ transforming principle） 轉(zhuǎn)化因子 的本質(zhì)是離體的 DNA片段。 2. 轉(zhuǎn)化微生物的種類 真核微生物 Saccharomy cescerevisiae（ 釀酒酵母）、 Neurosporacrassa（ 粗糙脈孢菌）、 Aspergillusniger（ 黑曲霉）等。 基因重組是雜交育種的理論基礎。 一、原核生物的基因重組 原核生物的基因重組形式很多，機制較原始。 感受態(tài)細胞 （ petent cell） 具有攝取外源DNA能力的細胞。 良好的轉(zhuǎn)化因子有 dsDNA（ 最宜于細胞表面結(jié)合）、ssDNA和 質(zhì)粒 DNA， 通常不能與核染色體組發(fā)生重組。 質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化效率高； 指用提純的病毒核酸（ DNA或 RNA） 去感染其宿主細胞或其原生質(zhì)體，可增殖出一群正常病毒后代的現(xiàn)象。經(jīng)轉(zhuǎn)導嗜菌體的媒介而獲得了供體菌 DNA片段的受體菌，外源 DNA在其內(nèi)進行 交換、整合和復制 ，使其成為一個遺傳性狀穩(wěn)定的重組體，稱作 普遍轉(zhuǎn)導子 ，這種現(xiàn)象就稱普遍轉(zhuǎn)導。 DNA不能復制，因此群體中僅一個細胞含有 DNA， 而其它細胞只能得到其基因產(chǎn)物，形成微小菌落。 一個與轉(zhuǎn)導相似又不同的現(xiàn)象 溶源轉(zhuǎn)變與轉(zhuǎn)導的不同？ a） 這是一種不攜帶任何外源基因的正常時菌體； b） 是嗜菌體的基因內(nèi)而不是供體菌的基因提供了宿主的信性狀； c） 新性狀是宿主細胞溶源化時的表型，而不是經(jīng)遺傳重組形成的穩(wěn)定轉(zhuǎn)導子； d） 獲得的性狀可隨嗜菌體的消失而同時消失； （三）接合 （ conjugation， mating） 供體菌 （“雄性 ” ） 通過 性菌毛 與 受體菌 （“雌性”）直接接觸，把 F質(zhì)粒 或其攜帶的不同長度的 核基因組片段 傳遞給后者，使后者獲得若干新遺傳性狀的現(xiàn)象，稱為 接合 。由此法獲得的重組子，成為 融合子 （ fusant）。 ④ 驗穩(wěn)定性： 就是檢驗新菌株究竟是不穩(wěn)定的異核體，還是穩(wěn)定的雜合二倍體。 （二）準性雜交 （ parasexual hybridization） 準性生殖是一種類似于有性生殖，但比它更為原始 的一種兩性生殖方式，這是一種在同種而不同菌株的體細胞間發(fā)生融合，它可不借減數(shù)分裂而導致低頻率基因重組并產(chǎn)生重組子。 c） Hfr菌株 ， F因子插入到染色體 DNA上 ，細胞表面有性菌毛。 局限轉(zhuǎn)導 低頻轉(zhuǎn)導 高頻轉(zhuǎn)導 根據(jù)轉(zhuǎn)導子出現(xiàn)頻率的高低分類 溫和噬菌體感染 整合到細菌染色體的特定位點上 宿主細胞發(fā)生溶源化 溶源菌因誘導而發(fā)生裂解時，在前噬菌體二側(cè)的少數(shù)宿主基因因偶爾發(fā)生的不正常切割而連在噬菌體 DNA上
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