基因工程基本操作程序-資料下載頁(yè)
2025-01-07 17:52本頁(yè)面
【正文】 體細(xì)胞含有目的基因 四環(huán)素抗性基因四環(huán)素抗性基因完全培養(yǎng)基存活如何把導(dǎo)入了目的基因的受體細(xì)胞篩選出來(lái)？4. 在培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（ kan）常作為標(biāo)記基因，只有含卡那霉素抗性基因的細(xì)胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。右圖為獲得抗蟲(chóng)棉的技術(shù)流程。請(qǐng)據(jù)圖回答： [來(lái)源 :學(xué) ,科 ,網(wǎng) ](1)基因工程的基本操作程序主要包括四個(gè)步驟 :目的基因的獲取、 _________________、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、 _________________。 (2)A過(guò)程需要的酶有 ______ _______________?；虮磉_(dá)載體的構(gòu)建目的基因的檢測(cè)與鑒定（同一種）限制酶和 DNA連接酶（ 3）要把重組質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌，首先必須用 ____處理土壤農(nóng)桿菌，使土壤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)變?yōu)?_________態(tài)；然后將 ______________________在緩沖液中混合培養(yǎng)完成轉(zhuǎn)化過(guò)程。（ 4）含有重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌侵染離體棉花葉片組織后，將離體棉花葉片組織培養(yǎng)成再生植株要經(jīng)過(guò)［ C］ ______和［ E］ _______。如要確保再生植株中含有抗蟲(chóng)基因，可在 C過(guò)程的培養(yǎng)基中加入 _________。Ca2+感受重組質(zhì)粒和感受態(tài)細(xì)胞脫分化 再分化卡那霉素（ 5）如果轉(zhuǎn)基因植物的花粉中含有毒蛋白，將引起的安全性問(wèn)題包括 __________。 （ 6）抗蟲(chóng)基因能與植物體內(nèi)基因拼接成功是因?yàn)? ________________ _。成功表達(dá) 說(shuō)明蘇云金桿菌和植物等生物共用 _ 。ABC抗蟲(chóng)基因與植物的 DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)相同一套遺傳密碼（ 7）科學(xué)家發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因植株的卡那霉素抗性基 因的傳遞符合孟德?tīng)栠z傳定律。① 將轉(zhuǎn)基因植株與 ____________雜交，其后代中抗卡那霉素型與卡那霉素敏感型的數(shù)量比為 1:1。② 若該轉(zhuǎn)基因植株自交，則其后代中抗卡那霉素型與卡那霉素敏感型的數(shù)量比為 _______③ 若將該轉(zhuǎn)基因植株的花藥在卡那霉素培養(yǎng)基上作離體培養(yǎng)，則獲得的再生植株中抗卡那霉素型植株占 _______﹪非轉(zhuǎn)基因植株3:11001. 金花茶是中國(guó)特有的觀賞品種，但易得枯萎病，降低觀賞價(jià)值?？茖W(xué)家在某種植物中找到了抗枯萎病的基因，用轉(zhuǎn)基因方法培育出了抗枯萎病的新品種。請(qǐng)據(jù)圖回答：（ 1）將 ② 連接到 ① 并形成 ③ 的最大區(qū)別： ② 的基因結(jié)構(gòu)的編碼區(qū)內(nèi)有 _________和 ________；而 ① 是 ______，它的基因結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)是________________________________，常用到的酶是 ___________和 ______________。；外顯子 內(nèi)含子 質(zhì)粒 基因的編碼區(qū)是連續(xù)的，不間斷的 DNA連接酶限制酶（ 2）經(jīng)檢測(cè)，被 ③ 侵染的金花茶葉片細(xì)胞具備了抗病性，這說(shuō)明 ② 已經(jīng)在金花茶細(xì)胞內(nèi)得到________。欲快速培育大量該抗病新品種，應(yīng)該采用的技術(shù)為 ______________________。 植物組織培養(yǎng)表達(dá) (2023 北京理綜， 31)T－ DNA可隨機(jī)插入植物基因組內(nèi)，導(dǎo)致被插入基因發(fā)生突變。用此方法誘導(dǎo)擬南芥產(chǎn)生突變體的過(guò)程如下：種植野生型擬南芥，待植株形成花蕾時(shí)，將地上部分浸入農(nóng)桿菌 (其中的 T－ DNA上帶有抗除草劑基因)懸浮液中以實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化。在適宜條件下培養(yǎng)，收獲種子 (稱(chēng)為 T1代 )。(1)為促進(jìn)植株側(cè)枝發(fā)育以形成更多的花蕾，需要去除 ________，因?yàn)楹笳弋a(chǎn)生的 ________會(huì)抑制側(cè)芽的生長(zhǎng)。(2)為篩選出已轉(zhuǎn)化的個(gè)體，需將 T1代播種在含____________________的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，成熟后自交，收獲種子 (稱(chēng)為 T2代 )。頂芽 生長(zhǎng)素(一定濃度的 )除草劑(3)為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將T2代播種在含 _________________的培養(yǎng)基上，獲得所需個(gè)體。(4)經(jīng)過(guò)多代種植獲得能穩(wěn)定遺傳的抗鹽突變體。為確定抗鹽性狀是否由單基因突變引起，需將該突變體與 ________植株進(jìn)行雜交，再自交 ________代后統(tǒng)計(jì)性狀分離比。(5)若上述 T－ DNA的插入造成了基因功能喪失，從該突變體的表現(xiàn)型可以推測(cè)野生型基因的存在導(dǎo)致植物的抗鹽性 _____(一定濃度的 )鹽野生型 1 降低科學(xué)家通過(guò)基因工程，成功培育出能抗棉鈴蟲(chóng)的棉花植株 —— 抗蟲(chóng)棉，其過(guò)程大致如下圖所示：（ 1）細(xì)菌的基因之所以能在棉花細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，產(chǎn)生抗性，其原因是 ____________________。它們共用一套遺傳密碼（ 2）上述過(guò)程中，將目的基因?qū)朊藁?xì)胞內(nèi)使用的方法是 ______________ ，這種導(dǎo)入方法較經(jīng)濟(jì)、有效。目的基因能否在棉株體內(nèi)穩(wěn)定維持和表達(dá)其遺傳特性的關(guān)鍵 是 目的基因是否插入到受體細(xì)胞染色體 DNA上 ，這需要通過(guò)檢測(cè)才能知道，檢測(cè)采用的最好方法是 _________________________ 。（ 3）上述基因工程中的核心步驟是 _______________，其目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以___給下一代，同時(shí)，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。（ 4）利用基因工程技術(shù)培育抗蟲(chóng)棉，相比誘變育種和雜交育種方法，具有 ________和 ________________________________________________________________等突出的優(yōu)點(diǎn)，但是目前基因工程仍不能取代雜交育種和誘變育種。與基因工程技術(shù)相比，雜交育種和誘變育種方法主要具有 _________________的優(yōu)點(diǎn)?；虮磉_(dá)載體的構(gòu)建 遺傳 目的性強(qiáng) 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 DNA分子雜交技術(shù)克服遠(yuǎn)緣雜交不親和障礙 （或能有效地打破物種的生殖隔離界限） 操作簡(jiǎn)便易行
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