【正文】 一定的差距。 噬菌體法 ? 將分枝桿菌噬菌體感染結(jié)核分枝桿菌，未進(jìn)入菌體內(nèi)的噬菌體用特異的抗噬菌體物質(zhì)滅活，進(jìn)入菌體內(nèi)的噬菌體得到保護(hù)而復(fù)制增殖，溶菌后釋放子代噬菌體，將此噬菌體與相應(yīng)的結(jié)核分枝桿菌混合，接種在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，觀察蝕斑的產(chǎn)生。蝕斑的數(shù)量與噬菌體數(shù)量有關(guān)，也與臨床標(biāo)本中活的結(jié)核分枝桿菌有關(guān)。 ? 如果用噬菌體做藥敏試驗(yàn)，若有耐藥結(jié)核分枝桿菌存在，細(xì)菌能存活，會(huì)出現(xiàn)蝕斑，蝕斑的數(shù)量與在含抗結(jié)核藥物培養(yǎng)基上存活的結(jié)核分枝桿菌有關(guān)。 分枝桿菌菌種鑒定的意義 ? 非結(jié)核分枝桿菌的發(fā)病率在不同的國(guó)家、不同的地區(qū)報(bào)告差別很大。據(jù)資料報(bào)道，日本在1980年報(bào)告：在分枝桿菌感染中，非結(jié)核分枝桿菌的發(fā)病率為 12%，并有逐年上升趨勢(shì)，其中主要為鳥(niǎo)胞內(nèi)復(fù)合群，高達(dá) %，其次為堪薩斯占 % ? 我國(guó)年對(duì)非結(jié)核分枝桿菌的研究資料尚不充足，也缺乏較大規(guī)模的流調(diào)，據(jù)報(bào)告非結(jié)核分枝桿菌在我國(guó)的發(fā)病率占分枝桿菌的 %左右。 分枝桿菌菌種鑒定的意義 ? 一般來(lái)說(shuō)，非結(jié)核分枝桿菌對(duì)抗結(jié)核藥物的敏感性低于結(jié)核菌，但各型和各菌株之間對(duì)藥物的敏感性差別甚大。 分枝桿菌菌種鑒定 ? 形態(tài)學(xué) 菌落形態(tài)、顏色 ? 生長(zhǎng)條件 28 ℃ 生長(zhǎng)試驗(yàn)，結(jié)核分枝桿菌在 28 ℃ 的孵育環(huán)境中不能生長(zhǎng)；而TNM菌群的大部分分枝桿菌可以生長(zhǎng)。 ? 生化反應(yīng) 硝酸還原 、煙酸試驗(yàn) ? 酶 尿素酶 耐熱觸酶 ? 分子生物學(xué)方法 分枝桿菌菌種鑒定 ? 分枝桿菌菌群鑒定的目的既是鑒定菌株屬于結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群還是非結(jié)核分枝桿菌，也是進(jìn)一步菌種鑒定的基礎(chǔ)。 ? 分枝桿菌臨床分離株藥物敏感性試驗(yàn)應(yīng)與菌種初步鑒定同步進(jìn)行，以對(duì)硝基苯甲酸（ PNB） 、噻吩 2羧酸肼（ TCH） 鑒別培養(yǎng)基初步鑒別結(jié)核分枝桿菌、牛分枝桿菌和非結(jié)核分枝桿菌 ? 鑒別培養(yǎng)基的制備過(guò)程略。 分枝桿菌菌種初步鑒定 分枝桿菌 PNB TCH 28 ℃生長(zhǎng) 耐熱觸酶 硝酸還原 煙酸試驗(yàn) 牛分枝桿菌 — — — — — — 結(jié)核分枝桿菌 — + — — — — NTM + + + + + + 分枝桿菌菌種鑒定質(zhì)量控制要求 ? 經(jīng)過(guò)初步鑒定的分枝桿菌，需進(jìn)一步進(jìn)行菌種鑒定，可送上一級(jí)實(shí)驗(yàn)室。 ? 鑒別菌株應(yīng)生長(zhǎng)旺盛，生長(zhǎng)時(shí)間為 3~4周為宜。 ? 所有培養(yǎng)基、試劑應(yīng)在規(guī)定期限內(nèi)使用。 ? 所有試劑均應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)菌株對(duì)照試驗(yàn)合格后使用。 分枝桿菌細(xì)菌庫(kù)的建立 ? 分枝桿菌菌株庫(kù)是結(jié)核病控制、流行病學(xué)檢查及開(kāi)展進(jìn)一步檢測(cè)和研究的基礎(chǔ)。通過(guò)對(duì)菌株庫(kù)的基因分型和耐藥性檢測(cè)，可以發(fā)現(xiàn)本地區(qū)菌株流行情況，調(diào)查耐藥性趨勢(shì)，為結(jié)核病控制、流行病學(xué)提供細(xì)菌學(xué)方面的依據(jù)。 ? 菌種保存決不是簡(jiǎn)單的對(duì)臨床標(biāo)本的單純的存放。菌株貯存要求有嚴(yán)格的貯存條件，嚴(yán)密的貯存程序，入庫(kù)菌株須專(zhuān)人負(fù)責(zé)，嚴(yán)格按照各程序進(jìn)行管理，每份菌株入庫(kù)、凍存、貯藏、管理各環(huán)節(jié)操作必須二人同時(shí)進(jìn)行，以確保菌住質(zhì)量，數(shù)據(jù)準(zhǔn)確無(wú)誤。 分枝桿菌細(xì)菌庫(kù)的建立 ? 細(xì)菌庫(kù)程序分三部分： 一、菌株貯存試驗(yàn)程序 包括貯存試劑（如 7H9液體培基）的配制、菌株凍存管編號(hào)、凍存試驗(yàn)等。每批凍存菌株實(shí)驗(yàn)狀況、凍存障礙、實(shí)驗(yàn)人、凍存菌株庫(kù)號(hào)、凍存菌株質(zhì)控管號(hào)等情況須詳細(xì)記錄，每批試劑配制日期、配制人等須詳細(xì)，凍存菌株凍存條件等保管情況記錄在冊(cè)。 分枝桿菌細(xì)菌庫(kù)的建立 二、菌株貯存質(zhì)量控制程序 包括 凍存前質(zhì)控 如菌株凍存管、預(yù)備凍存管、架編號(hào)、庫(kù)存位置、計(jì)算機(jī)數(shù)據(jù)等一一對(duì)應(yīng)，相互制約等；每批試劑配制操作須兩人進(jìn)行。 凍存中質(zhì)控 選菌齡、菌量適宜的菌株，凍存時(shí)平行接種 LJ培養(yǎng)基，做活菌及污染試驗(yàn)。需增菌菌株傳代二支 LJ培養(yǎng)基，生長(zhǎng)良好凍存，同時(shí)觀察活菌及污染情況。對(duì)試驗(yàn)操作、凍存物品、試劑質(zhì)量進(jìn)行監(jiān)控。 分枝桿菌細(xì)菌庫(kù)的建立 凍存后質(zhì)控 凍存后應(yīng)嚴(yán)密監(jiān)視凍存溫度（ 45 ℃ ）記錄停電次數(shù)及冰柜回溫溫度；不定期提取凍存質(zhì)控菌株做細(xì)菌復(fù)活實(shí)驗(yàn)，觀察并記錄細(xì)菌生長(zhǎng)狀況及污染情況。 三、菌株資料計(jì)算機(jī)數(shù)據(jù)庫(kù)管理程序 Gen Probe方法檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌 ? GENPROBE 用雜交保護(hù)分析方法 （ HPA）檢測(cè) RNA擴(kuò)增產(chǎn)物中結(jié)核分枝桿菌的特定序列 。 雜交試劑中含有一個(gè)單獨(dú)標(biāo)準(zhǔn)的 DNA探針 ， 并有化學(xué)發(fā)光標(biāo)記 。 這個(gè)探針可與結(jié)核分枝桿菌復(fù)合體的特定序列互補(bǔ) 。 當(dāng)探針和特定序列形成了穩(wěn)定的 RNA： DNA雜合體后 ， 雜交后的探針被選擇 ， 并通過(guò) GENPROBE LEADER化學(xué)發(fā)光檢測(cè)儀檢測(cè) 。 Gen Probe方法檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌 ? Gen Probe分子菌種鑒定包括結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群、鳥(niǎo)分枝桿菌復(fù)合群、鳥(niǎo)分枝桿菌、胞內(nèi)分枝桿菌、戈登分枝桿菌、堪薩斯分枝桿菌。 ? Gen Probe結(jié)核分枝桿菌直接檢測(cè)（ MTD） 是一種體外診斷用檢測(cè)目標(biāo)核酸探針的試驗(yàn)，可檢測(cè)痰標(biāo)本（流出或咳出），支氣管標(biāo)本（如支氣管洗液或支氣管吸入物）或氣管吸入物標(biāo)本沉積物中結(jié)核分枝桿菌的 rRNA。 Gen Probe方法檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌 ? 傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法最早可以在 1個(gè)星期后檢測(cè)到結(jié)核桿菌 ， 但是有可能會(huì)需要 8個(gè)星期 。 相比較下 ， MTD試驗(yàn)可以在開(kāi)始試驗(yàn)后 復(fù)合體的 rRNA。 因此 ， 雖然 MTD試驗(yàn)不能探知藥敏的結(jié)果 ， 但仍然可以提供快速和可信的結(jié)核分枝桿菌的檢測(cè)結(jié)果 。 謝謝觀看 /歡迎下載 BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES. BY FAITH I BY FAITH