【正文】 況的方法。 ? 缺點：價格昂貴，需進口專利液體培養(yǎng)基，且有放射性污染，正逐漸被非放射性的培養(yǎng)方法所替代。 藥物敏感性測定的重要意義 ? 臨床治療的重要參考 ? 流行病學(xué)的重要指標(biāo) 分枝桿菌藥敏試驗 在條件具備和有一定經(jīng)驗的實驗室方可進行此項試驗。在此基礎(chǔ)上 ,由于絕對濃度法每種藥物設(shè)定高、低 2 個藥物濃度 ,所以絕對濃度法在一定程度上反映了耐藥的程度和水平。 ? ，分裝至無菌試管，每管 5~10ml,封口， 20 ℃ 保存， 3個月內(nèi)使用。 ? (a):22號接種環(huán) 100倍稀釋法 ：用 22號標(biāo)準(zhǔn)接種環(huán)沾取 2滿環(huán)１ mg/ml的菌液，移至 2 ml滅菌生理鹽水中，即稀釋成 mg/ml菌液；用同樣方法再進行 100倍稀釋，即成 104 mg/ml菌液（注： 22號標(biāo)準(zhǔn)接種環(huán)：金屬絲直徑 ,接種環(huán)內(nèi)徑 3mm， 滿環(huán)移液 ）。 附：麥?zhǔn)?1號比濁管的制備 ： 1%氯化鋇(BaCl2)加入 ml 1%硫酸 (H2SO4)， 封口，比濁前搖勻。據(jù)資料報道，日本在1980年報告：在分枝桿菌感染中，非結(jié)核分枝桿菌的發(fā)病率為 12%，并有逐年上升趨勢，其中主要為鳥胞內(nèi)復(fù)合群，高達 %，其次為堪薩斯占 % ? 我國年對非結(jié)核分枝桿菌的研究資料尚不充足，也缺乏較大規(guī)模的流調(diào)，據(jù)報告非結(jié)核分枝桿菌在我國的發(fā)病率占分枝桿菌的 %左右。 ? 所有試劑均應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)菌株對照試驗合格后使用。 凍存中質(zhì)控 選菌齡、菌量適宜的菌株，凍存時平行接種 LJ培養(yǎng)基，做活菌及污染試驗。 Gen Probe方法檢測結(jié)核分枝桿菌 ? Gen Probe分子菌種鑒定包括結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群、鳥分枝桿菌復(fù)合群、鳥分枝桿菌、胞內(nèi)分枝桿菌、戈登分枝桿菌、堪薩斯分枝桿菌。 Gen Probe方法檢測結(jié)核分枝桿菌 ? 傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法最早可以在 1個星期后檢測到結(jié)核桿菌 ， 但是有可能會需要 8個星期 。對試驗操作、凍存物品、試劑質(zhì)量進行監(jiān)控。通過對菌株庫的基因分型和耐藥性檢測，可以發(fā)現(xiàn)本地區(qū)菌株流行情況，調(diào)查耐藥性趨勢，為結(jié)核病控制、流行病學(xué)提供細(xì)菌學(xué)方面的依據(jù)。 分枝桿菌菌種鑒定 ? 形態(tài)學(xué) 菌落形態(tài)、顏色 ? 生長條件 28 ℃ 生長試驗，結(jié)核分枝桿菌在 28 ℃ 的孵育環(huán)境中不能生長；而TNM菌群的大部分分枝桿菌可以生長。 藥敏試驗注意事項 試驗操作： （ 1）應(yīng)在生物安全操作臺內(nèi)進行操作； （ 2）要使用標(biāo)準(zhǔn)化的磨菌管、吸管、接種環(huán)進行稀釋和接種； （ 3）要使用新鮮菌落，取菌落時要刮取整個斜面，不要只取單個菌落； （ 4）菌液制備、稀釋、接種要力求準(zhǔn)確，以保證接種量在要求范圍內(nèi)； （ 5）注意觀察溫箱溫度。 比例法藥敏試驗 ? :用 22號標(biāo)準(zhǔn)接種環(huán)分別沾取 1環(huán) (即) 102 mg/ml和 104 mg/ml的菌液，用劃線法均勻接種至對照及含藥培養(yǎng)基表面，應(yīng)注意使菌液盡可能均勻分散于培養(yǎng)基斜面。 含藥培養(yǎng)基制備 ? 每 100ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基加入 1ml配制、稀釋好的抗結(jié)核藥液，混勻，無菌分裝每管7ml， 85 ℃ 凝固 50min. ? 制成的培養(yǎng)基 37 ℃ 無菌試驗 24h， 檢查培養(yǎng)基污染情況后置 4 ℃ 避光保存， 1個月內(nèi)使用。 （ 3）比例法操作較為繁瑣，且需定量技術(shù)。 ? 比例法 是由法國的 G. Cati 和 1963 年首先提出 ,是 WHO 全球耐藥監(jiān)測項目中推薦的標(biāo)準(zhǔn)藥敏試驗方法。 ? 特點：簡便、快速，可進行藥敏試驗及初步菌種鑒定。為保證檢查方法的可靠性，目前快速培養(yǎng)檢查系統(tǒng)除提供相應(yīng)儀器，試劑以外，均根據(jù)不同系統(tǒng)制定了相應(yīng)的臨床標(biāo)本前處理、接種、檢測和報告結(jié)果的規(guī)程 ,故在進行相應(yīng)的檢查時，結(jié)果的可重復(fù)性和可比性均能得到認(rèn)可。 ? 發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上菌落生長需經(jīng)抗酸染色確認(rèn)后方可報告陽性。此后每周觀察 1次，記錄菌落生長及污染情況。標(biāo)本較多時，應(yīng)分批處理 ? 病理組織或干酪塊 標(biāo)本切碎后置于無菌組織研磨器，加入適量（ ~1ml） 生理鹽水后充分研磨成混懸液；混懸液經(jīng) 3000r/min離心 30min后，沉淀物進行堿處理 [與 2~4倍量 2%氫氧化鈉（ NaOH)混合，處理 15min]后接種。 ? 耐異煙肼菌株的致病力顯著減弱，耐鏈霉素菌株的致病力一般不降低，耐利福平菌株有不同程度降低，對利福平及異煙肼同時耐藥，其致病力降低較單一耐異煙肼者更顯著。 ? 結(jié)核菌生長的適宜溫度和人體相近為37℃ 。 我國 2023年全國流調(diào)結(jié)核菌耐藥狀況 ? 初始耐藥： % ? 獲得性耐藥： % ? 總耐藥： % 我國 2023年全國流調(diào)結(jié)核菌耐藥狀況 ? 初始耐多藥率： % ? 獲得性耐多藥率： % ? 總耐多藥率： % 6種抗結(jié)核藥物的耐藥率順序 ? 異煙肼（ %） ? 鏈霉素（ %） ? 利福平（ %） ? 對氨基水楊酸（ %） ? 乙胺丁醇（ %） ? 氨硫尿（ %) 8?。ù危┠退幈O(jiān)測耐藥狀況 省份 耐藥率（ %） 新病人 復(fù)治病人 總 河南（ 1996） 河南（ 2023） 內(nèi)蒙 遼寧 山東 湖北 浙江 廣東 8?。ù危┠退幈O(jiān)測耐藥狀況 省份 耐多藥率（ %）