snp檢測(cè)方法-資料下載頁(yè)
2025-09-25 16:45本頁(yè)面
【正文】 合酶、 ATP 硫酸化酶 (ATP sulfurylase) 、熒光素酶 (luciferase) 和三磷酸腺苷雙磷酸酶( apyrase) 。 ? 原理： DNA 聚合酶在一種 dNTP的存在下進(jìn)行引物延伸反應(yīng) ,而 引物的成功延伸 將伴隨焦磷酸的釋放 ,焦磷酸在 熒光素酶 的存在下能引一種發(fā) 化學(xué)發(fā)光反應(yīng) ,通過發(fā)光計(jì)的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)來達(dá)到檢測(cè)的目的。 27 基本步驟 DNA模板雜交 （ PCR擴(kuò)增的 、 單鏈的 ） ， 與酶和底物孵育 。 dNTP（ dATPS， dTTP， dCTP， dGTP） 之一 被加入反應(yīng)體系，如與模板配對(duì)，與引物的末端形成共價(jià)鍵， dNTP的焦磷酸基團(tuán)（ PPi） 釋放出來。 ，發(fā)出 可見光信號(hào) 。每個(gè)光信號(hào)的峰高與反應(yīng)中摻入的核苷酸數(shù)目成正比。 4. ATP和未摻入的 dNTP由 三磷酸腺苷雙磷酸酶 降解，淬滅光信號(hào)，并再生反應(yīng)體系。 dNTP。 28 29 2)連接酶 ? 聯(lián)合鏈?zhǔn)椒磻?yīng) (bined chain reaction , CCR) ? 連接 滾環(huán)擴(kuò)增反應(yīng) (ligationrolling circle amplication , LRCA)
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