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實驗植物基因工程簡介-資料下載頁

2025-09-11 20:55本頁面

　　

【正文】 Enzyme1： 1 181。LEnzyme2： 1 181。LBuffer： 2 181。LTemplate： X 181。LddH2O: 補(bǔ)齊至 20 181。L37℃ 水浴 2 h活性單位 U：在 50 μl反應(yīng)液中，30℃ 溫度下反應(yīng) 1小時，將 1 μg的 λDNA完全分解的酶量定義為 1個活性單位 (U)單酶切雙酶切影響內(nèi)切限制酶活性因素1. DNA的純度，蛋白質(zhì)、酚、氯仿、酒精、 EDTA、 SDS、鹽離子等都會影響活性2. DNA的甲基化程度，核酸內(nèi)切限制酶不能夠切割甲基化的核苷酸序列3. 酶切反應(yīng)溫度，不同內(nèi)切酶具有不同的最適反應(yīng)溫度，4. DNA的分子結(jié)構(gòu)，超螺旋和線性5. 緩沖液的影響， Mg2+的濃度，甘油濃度注意事項： Buffer和限制性內(nèi)切酶3. 酶切時間不宜過長，避免星號活性4. 酶并非越多越好，否則甘油濃度過高K Buffer:BamH IH Buffer:Bgl II, EcoR VM Buffer:Hind III, Xba I

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2025-09-11 21:20

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2025-01-15 02:35

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