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acbiorsii第三代單分子實時測序-資料下載頁

2025-08-16 02:32本頁面
  

【正文】 is緩沖液中(如 10mM Tris, PH為 ~)或無核酸酶的水中,樣品的最大體積不得超過 130ul,溶解用的緩沖液中不含 EDTA。 ? 2. 純化的 DNA樣品非常穩(wěn)定,建議以冷凍(干冰)的方式運(yùn)輸樣品,一方面保證無細(xì)菌污染,另一方面也可以減少樣品的揮發(fā) 。 3. 確保樣品為雙鏈 DNA。單鏈 DNA不能進(jìn)行 SMARTBell模板制備,且會影響定量和聚合酶的結(jié)合 4. 盡量避免樣品多次凍融,確保樣品沒有在大于 65度的環(huán)境中放置,沒有暴露在高酸性或高堿性條件下 (PH 6或 9)和 UV環(huán)境下。 5. 確保樣品不含有不溶的物質(zhì), RNA,螯合劑(如 EDTA),二價金屬陽離子(如 Mg2+),變性劑(如胍鹽,苯酚)或去污劑( SDS, TritonX 100) 。 四 、操作 DNA時的注意事項 ? 1. 乙醇沉淀后避免 DNA過于干燥,讓 DNA在空氣中自然干燥。 ? 2. 應(yīng)使用 RNA asefree的水或其他適合的溶液溶解 DNA。 ? 3. 為幫助 DNA溶解,可小心翻轉(zhuǎn)小管數(shù)次,或用手指輕彈管的底部,或者也可以將樣品放置于 28度的環(huán)境下過夜溶解。 ? 5. 請勿渦旋震蕩 DNA樣品,因為該操作會導(dǎo)致 DNA片段化。 ? 6. 將 DNA樣品在 65度加熱 10分鐘,以使 DNASE失活。確保加熱時間不超過 10分鐘,否則可能導(dǎo)致 DNA的損傷。同時,請勿反復(fù)凍融 DNA樣品。
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