組織工程學(xué)期末復(fù)習(xí)重點(diǎn)-資料下載頁(yè)
2025-08-05 10:58本頁(yè)面
【正文】 細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化；②轉(zhuǎn)染細(xì)胞合成分泌的內(nèi)源性蛋白經(jīng)過適當(dāng)翻譯后的修飾過程，能更有效地同細(xì)胞表面受體結(jié)合。因此其表達(dá)產(chǎn)物活性更高，所需產(chǎn)物量更?。╪g或pg水平），避免了反復(fù)使用大劑量（mg或μg水平）外源性重組蛋白的副作用；③質(zhì)粒DNA 和病毒載體制備容易，穩(wěn)定性好，半衰期長(zhǎng)，打破了傳統(tǒng)給藥的途徑，可通過直接在體內(nèi)特定部位持續(xù)給藥來(lái)達(dá)到治療目的；④免疫排斥反應(yīng)亦可望借此技術(shù)得以解決。例如TGFβ的免疫抑制作用比環(huán)孢素A 還強(qiáng)，同時(shí)它又可以調(diào)節(jié)軟骨、骨等多種組織細(xì)胞的增殖分化， 將其轉(zhuǎn)入相關(guān)細(xì)胞中，不僅能獲得所需功能， 而且能抑制免疫排斥反應(yīng)。第九章 組織工程產(chǎn)品的立法與管理178。 組織工程醫(yī)療產(chǎn)品178。 ★定義：應(yīng)用活體細(xì)胞，并結(jié)合天然或合成的細(xì)胞外間質(zhì)組成，以發(fā)展可重建或替代功能的可植入的組織或器官。178。 ，2000年11月在多倫多召開的大會(huì)上通過。 178。 ； 178。 ； 178。 ，意圖是表述和匯總用于人類組織替代和修復(fù)的TEMPs開發(fā)和相關(guān)領(lǐng)域。178。 我國(guó)公布了哪些TEMPs標(biāo)準(zhǔn)？ 我國(guó)于2007年1月31日發(fā)布了5個(gè)TEMPs標(biāo)準(zhǔn)： ①YY/《組織工程醫(yī)療產(chǎn)品第3部分：通用分類》； ②YY/《組織工程醫(yī)療產(chǎn)品第4部分：皮膚替代品（物）的術(shù)語(yǔ)和分類》； ③YY/《組織工程醫(yī)療產(chǎn)品第5部分：基質(zhì)及支架的性能和測(cè)試》； ④YY/《組織工程醫(yī)療產(chǎn)品第9部分：透明質(zhì)酸鈉》； ⑤YY/《組織工程醫(yī)療產(chǎn)品第12部分：細(xì)胞、組織、器官的加工處理指南》。 以上標(biāo)準(zhǔn)是參照美國(guó)ASTM相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上編制而成，于2008年1月1日正式實(shí)施?！飳?shí)驗(yàn)題：一、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)1細(xì)胞培養(yǎng)的概念：體外培養(yǎng)（in vitro culture），就是將活體結(jié)構(gòu)成分或活的個(gè)體從體內(nèi)或其寄生體內(nèi)取出，放在類似于體內(nèi)生存環(huán)境的體外環(huán)境中，讓其生長(zhǎng)和發(fā)育的方法。 2體外培養(yǎng)的分類： 組織培養(yǎng)：是指從生物體內(nèi)取出活的組織（多指組織塊）在體外進(jìn)行培養(yǎng)的方法。 細(xì)胞培養(yǎng)：是指將活細(xì)胞（尤其是分散的細(xì)胞）在體外進(jìn)行培養(yǎng)的方法。 器官培養(yǎng)：是指從生物體內(nèi)取出的器官（一般是胚胎器官）、器官的一部分或器官原基在體外進(jìn)行培養(yǎng)的方法。3倒置顯微鏡與普通顯微鏡的區(qū)別：n 組成和普通顯微鏡一樣，只不過物鏡與照明系統(tǒng)顛倒，前者在載物臺(tái)之下，后者在載物臺(tái)之上，用于觀察培養(yǎng)的活細(xì)胞，具有相差物鏡。 n 倒置顯微鏡的構(gòu)造主要分為三部分：機(jī)械部分、照明部分和光學(xué)部分。 4無(wú)菌操作的原則 ，必須明確物品的無(wú)菌區(qū)和非無(wú)菌區(qū)。 ，先戴帽子、口罩、洗手，并將手擦干，注意空氣和環(huán)境清潔。，必須使用無(wú)菌持物鉗。，凡未經(jīng)消毒的手、臂、均不可直接接觸無(wú)菌物品或超過無(wú)菌區(qū)取物。 ，不可暴露在空氣中過久。無(wú)菌物與非無(wú)菌物應(yīng)分別放置。無(wú)菌包一經(jīng)打開即不能視為絕對(duì)無(wú)菌，應(yīng)盡早使用。凡已取出的無(wú)菌物品雖未使用也不可再放回?zé)o菌容器內(nèi)。 ，并保持清潔干燥，與非滅菌包分開放置，并經(jīng)常檢查無(wú)菌包或容器是否過期，其中用物是否適量。 無(wú)菌鹽水及酒精、新潔爾滅菌棉球罐每周消毒一次，容器內(nèi)敷料如干棉球、紗布?jí)K等，不可裝得過滿，以免取用時(shí)碰在容器外面被污染。 5骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞作為組織工程種子細(xì)胞的優(yōu)勢(shì)是什么？n ，n ,可以通過穿刺等創(chuàng)傷小的方法從骨髓腔獲得大量骨髓細(xì)胞,n ，避免免疫排斥反應(yīng),n n 。目前骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞純化培養(yǎng)的常用方法有：1. 全骨髓差速貼壁法，2. 密度梯度離心法，3. 流式細(xì)胞儀法，4. 免疫磁珠法。目前常用的分離MSC的方法主要有全骨髓差速貼壁法和密度梯度離心法，全骨髓法即根據(jù)干細(xì)胞在低血清培養(yǎng)基種有貼壁優(yōu)勢(shì)特性，定期換液除去不貼壁細(xì)胞，從而達(dá)到純化及擴(kuò)增MSC的目的。密度梯度離心法即根據(jù)骨髓中各細(xì)胞成分比重的不同，分離單核細(xì)胞進(jìn)行貼壁培養(yǎng)。二、大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的換液、傳代及活力測(cè)定？? 一般是在細(xì)胞長(zhǎng)滿瓶壁、營(yíng)養(yǎng)及PH稍降低時(shí)做傳代培養(yǎng)，依據(jù)細(xì)胞特性，將一瓶細(xì)胞1：3或1：4傳代。? :? （二甲基噻唑二苯基四唑溴鹽）轉(zhuǎn)變?yōu)椴豢扇苄缘淖仙w粒，并沉淀在細(xì)胞中。死細(xì)胞沒有這種功能。 ? （DMSO）能溶解沉積在細(xì)胞中的藍(lán)紫色結(jié)晶物，溶液顏色深淺與所含的formazan（甲月替）量成正比。 ? 。?? 三、骨膜移植? 骨膜損傷的修復(fù)的方法：? ①自體骨膜移植：缺點(diǎn)—取材困難，造成新?lián)p傷。? ②脫細(xì)胞的細(xì)胞外基質(zhì)：小腸粘膜下層，羊膜等。? 小腸粘膜下層（SIS）：? SIS由豬小腸經(jīng)脫細(xì)胞處理制備而成。正常豬小腸壁由四層構(gòu)成：粘膜層、粘膜下層、肌層和漿膜層。? 動(dòng)物手術(shù)的縫合和打結(jié)方法有哪些？? 1）縫合 縫合方法主要包括：結(jié)節(jié)縫合（單純間斷縫合）、螺旋縫合（單純連續(xù)縫合）和荷包縫合三種? 2）打結(jié) 結(jié)的種類主要包括：方結(jié)（平結(jié)）、外科結(jié)和三疊結(jié)幾種。?? 四、免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)血管平滑肌彈力蛋白? 免疫組化的概念 ? ～是應(yīng)用免疫學(xué)基本原理—即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑 (熒光素、酶、金屬離子、同位素) 顯色，來(lái)確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì))的定位、定性及定量的研究方法， ? 稱為免疫組織化學(xué)技術(shù)(immunohistochemistry)或免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)(immunocytochemistry)。?免疫組化顯色方法分為直接法和間接法，后者的靈敏度比前者提高了許多。SABC法是利用了生物素和親和素的高度親和力和特異性，將抗原和抗體結(jié)合的信號(hào)放大。 免疫組化催化顯色反應(yīng)的酶是，底物是 和。（辣根過氧化物酶（HRP），H2O2，DAB）實(shí)驗(yàn)五，SDSPAGE分析小鼠不同組織細(xì)胞的蛋白組成差異 電泳的概念：電場(chǎng)中的帶電質(zhì)點(diǎn)在電場(chǎng)力的作用下向著與其自身所帶電荷相反的電極移動(dòng)的現(xiàn)象叫做電泳。1. SDSPAGE中文是：——————（SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳）2. SDS的中文名：————（十二烷基硫酸鈉）3. 在SDSPAGE中，蛋白質(zhì)帶（ ）電荷，從（ ）極向（ ）極泳動(dòng)。4. SDSPAGE中有————————效應(yīng)、——————效應(yīng)和——————效應(yīng)。5. SDSPAGE中蛋白質(zhì)的遷移率只與——————相關(guān)。6. SDSPAGE屬于——————電泳，由————膠和——————膠組成。 聚丙烯酰胺凝膠是由丙烯酰胺 (簡(jiǎn)稱Acr) 和交聯(lián)劑N，N’—亞甲基雙丙烯酰胺（簡(jiǎn)稱Bis）在催化劑（過硫酸銨和四甲基乙二胺（TEMED））的作用下，聚合交聯(lián)而成的具有網(wǎng)狀立體結(jié)構(gòu)的凝膠，這種凝膠具有分子篩作用。在SDSPAGE中濃縮效應(yīng)是怎樣形成的？16
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