南農(nóng)傳染病實(shí)習(xí)報(bào)告-資料下載頁(yè)
2025-08-05 03:50本頁(yè)面
【正文】 組生化結(jié)果：產(chǎn)酸產(chǎn)氣、變黃、并有氣泡并不完全符合，可能樣品菌還是摻雜了其他菌。蔗糖果糖半乳糖D核糖麥芽糖脲酶試驗(yàn) + + + 氧化酶接觸酶+硫化氫+鳥氨酸未知乙胺酰胺未知注：“＋”表示產(chǎn)酸；“○”表示產(chǎn)氣；“”表示既產(chǎn)酸又產(chǎn)氣；“－”表示不產(chǎn)酸也不產(chǎn)氣。4. 鏡檢結(jié)果可以見(jiàn)到兩個(gè)或三四個(gè)連在一起的紫色球菌，需要再接板確認(rèn)。5. 跑膠結(jié)果結(jié)果可以看出陽(yáng)性副豬嗜血桿菌跑出結(jié)果，但實(shí)驗(yàn)樣品沒(méi)跑出結(jié)果，說(shuō)明其不是副豬噬血桿菌。（六） 結(jié)果分析該乳豬可能為副豬嗜血桿菌、藍(lán)耳病毒以及四疊球菌的混合感染，依據(jù)如下：1. 乳豬的臨床癥狀：身上有瘀血斑，但范圍不大，和副豬嗜血桿菌臨床病變有相似地方。有些部位的淋巴結(jié)腫脹，肺臟和脾臟有一些病變，其中脾臟病變類似圓環(huán)病毒感染?？偟膩?lái)說(shuō)，該豬體表臨床癥狀觀察和剖解并不能確診是何種疫病。2. 細(xì)菌性檢查：通過(guò)取肺臟組織涂片、接種TSA平板、TSB液體培養(yǎng)基擴(kuò)增，最后再通過(guò)鏡檢鑒定該豬為一種球菌和一種桿菌。隨后進(jìn)行藥敏試驗(yàn)、生化試驗(yàn)和血平板培養(yǎng)基接種病菌，以及用PCR擴(kuò)增以及跑膠試驗(yàn)。確認(rèn)分離到的是一種未知的球菌和副豬嗜血桿菌。通過(guò)詢問(wèn)老師和查閱文獻(xiàn)資料，該球菌初步定為四疊球菌。3. 病毒學(xué)檢查：將勻漿組織液凍融離心后接種Vero細(xì)胞，在接種三天后可以明顯見(jiàn)到陽(yáng)性樣品的細(xì)胞空泡病變，但是并沒(méi)有進(jìn)行病毒基因組的提取以及PCR基因擴(kuò)增的鑒定，因此只能初步定為藍(lán)耳病病毒的感染。（七） 小結(jié)1. 通過(guò)近一周的傳染病診斷實(shí)習(xí)，對(duì)如何規(guī)范的診斷畜禽傳染病的流程有一個(gè)相對(duì)清楚的了解。特別是掌握了豬細(xì)菌與病毒混合感染的病原分離與鑒定。2. 因?yàn)檫@是實(shí)習(xí)，不是實(shí)驗(yàn)，所以很多實(shí)習(xí)材料都需要自己配，自己準(zhǔn)備。在第一天TSA配制過(guò)程中，相關(guān)負(fù)責(zé)的同學(xué)沒(méi)有將TSA搖勻，導(dǎo)致最后倒出來(lái)的液體特別粘稠，剛從高壓鍋拿出來(lái)，還沒(méi)來(lái)得急倒，平板就凝固了。而其他組的平板在完全冷卻后也沒(méi)能凝固，最終很多平板不能使用。3. 對(duì)豬剖檢前，要將豬放血處死，在豬頸部把血管隔斷時(shí)，還要注意不能將氣管割破，不然豬會(huì)將血嗆到肺中，影響后繼檢查。4. 進(jìn)行細(xì)菌劃線接種時(shí)，要先將平板周圍在酒精燈外焰下燒一圈，然后左手抓緊TSA平板，用手掌將平皿的底固定，用拇指和食指將平皿的蓋略抬起一些，然后右手持接種環(huán)，接種環(huán)也要先燒一下，然后接觸病料，再與平板平面呈30176。輕輕劃線，一定要利用腕力，很多同學(xué)將平板劃破了，同時(shí)注意劃線時(shí)盡量靠近酒精燈。不過(guò)事后好多組的平板上還是有好多雜菌，或者是沒(méi)有任何菌落。甚至是，有同學(xué)用副豬嗜血桿菌進(jìn)行陽(yáng)性對(duì)照劃線培養(yǎng)后依舊沒(méi)有長(zhǎng)菌，說(shuō)明接種環(huán)還未冷卻就接觸了病料。5. 最重要的是貫徹?zé)o菌操作的準(zhǔn)則，不然如果有外來(lái)病原污染，那么診斷結(jié)果肯定是不準(zhǔn)確的。a) 操作前，要先帶手套，然后開(kāi)啟風(fēng)扇，開(kāi)始操作前要用70％酒精擦拭手套，然后是實(shí)驗(yàn)用品，特別是一些瓶口，管口，蓋子。打開(kāi)前還要在酒精燈外焰灼燒，打開(kāi)后應(yīng)迅速，準(zhǔn)確的處理，完畢后再進(jìn)行灼燒，然后快速蓋上。b) 小心取用無(wú)菌之實(shí)驗(yàn)物品，勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開(kāi)之容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開(kāi)后，務(wù)必將瓶蓋朝上放置桌面。c) 進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，細(xì)菌接種時(shí)，特別要細(xì)心，動(dòng)作要熟練準(zhǔn)。6. 此次實(shí)習(xí)是Vero細(xì)胞，王老師特別介紹了一些常用的專門為分離特定病毒當(dāng)做培養(yǎng)基的細(xì)胞系，其細(xì)胞系的選擇都不是隨意的，而是根據(jù)已有的生長(zhǎng)效果而來(lái)。王老師另外介紹了培養(yǎng)PRRS用肺泡巨噬細(xì)胞PAM，分離PCV‖用PK15，分離PRV可用PK1PHA21，分離PPV可用ST，分離豬瘟可用vero、PK1ST等。7. 進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，一定要及時(shí)記錄一些信息，及時(shí)分析。有些是實(shí)驗(yàn)結(jié)果，有些是關(guān)鍵的操作步驟，倘若結(jié)果又問(wèn)題，可以迅速的聯(lián)想到可能出錯(cuò)的地方。8. 雖然在此次的實(shí)習(xí)中有好多內(nèi)容在以前的微生物課，生化課等相關(guān)課程實(shí)驗(yàn)課上接觸過(guò)了，但此次實(shí)習(xí)發(fā)現(xiàn)我們依舊不夠熟練，每天都不斷出現(xiàn)一些細(xì)節(jié)上的問(wèn)題。在此很感謝王老師全稱為我們講解，出現(xiàn)問(wèn)題的時(shí)候也沒(méi)有顯得很不高興，而是說(shuō)出錯(cuò)是好事，這樣能讓大家加深印象，況且也在學(xué)校里，爭(zhēng)取以后不再重犯就好了。9. 雖然每組同學(xué)進(jìn)行實(shí)習(xí)操作，總有個(gè)別同學(xué)不給力，偷懶跑掉，但最后所有小組都完成了實(shí)習(xí)全過(guò)程，大家增加了合作的默契與相互之間的同學(xué)之情。實(shí)習(xí)單位考核意見(jiàn)評(píng)語(yǔ)（在校內(nèi)實(shí)習(xí)本欄不用填）：考核等級(jí)（五級(jí)記分制）：實(shí)習(xí)單位指導(dǎo)教師（簽名）：實(shí)習(xí)單位（蓋章）年 月 日指導(dǎo)教師考核意見(jiàn)評(píng)語(yǔ)：考核等級(jí)（五級(jí)記分制）：指導(dǎo)教師（簽名）：年 月 日備注１４
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