南農(nóng)傳染病實(shí)習(xí)報(bào)告-文庫吧
2025-07-21 03:50 本頁面
【正文】 無粘連、是否有纖維狀物滲出，看左右肺的大小、質(zhì)地、顏色等。5. 注意事項(xiàng)：a) 剖檢過程中要注意個(gè)人防護(hù)，剖檢人員必須帶手套，防止手劃傷感染。b) 如病豬已經(jīng)死亡，要及時(shí)進(jìn)行尸體剖檢。c) 剖檢中要做記錄，將每項(xiàng)檢查的各種異?，F(xiàn)象詳細(xì)記錄下來，以便根據(jù)異?，F(xiàn)象做出初步診斷。（三）部分細(xì)菌學(xué)實(shí)驗(yàn)和病毒學(xué)病料處理1． 細(xì)菌的分離培養(yǎng)：取病豬肺臟（冰凍組織需充分解凍），用酒精棉球點(diǎn)燃消毒肺臟表面，無菌手術(shù)刀切口，將接種環(huán)伸入于肺臟肺泡內(nèi)，無菌劃線接種TSA平板。具體操作如下：a) 右手執(zhí)筆式持接種環(huán)，在酒精燈火焰上灼燒接種環(huán)，待冷；b) 左手抓緊瓊脂培養(yǎng)基平皿，用手掌將平皿的底固定，用手指將平皿的蓋略抬起一些，進(jìn)行接種?；蛘?，將平皿蓋放在試驗(yàn)臺(tái)上，盡量直立平皿靠近酒精燈火焰；c) 右手接種環(huán)在瓊脂的一端涂布，劃線時(shí)，接種環(huán)與瓊脂表面是30176。40176。的角度輕輕接觸，利用腕力動(dòng)作，切忌劃破瓊脂表面；d) 接種完畢，蓋好平皿蓋，在平皿底玻璃上用記號(hào)筆注明接種時(shí)間，接種者等，然后將平皿的底朝上，放置在37176。溫箱內(nèi)培養(yǎng)2448小時(shí)（培養(yǎng)后可出現(xiàn)多種菌落，注意區(qū)分不同培養(yǎng)時(shí)間點(diǎn)不同類型菌類形態(tài)）。2．組織觸片和染色觀察：a) 觸片：取一小塊肺臟組織，在潔凈的載玻片上輕輕地作2～3 個(gè)壓跡，制成觸片；b) 干燥：將標(biāo)本面向上，手持載玻片一端的兩側(cè)，小心地在酒精燈上高處微微加熱，使水分蒸發(fā)，但切勿緊靠火焰或加熱時(shí)間過長(zhǎng)，以防標(biāo)本烤枯而變形；c) 固定：在酒精燈處快速的來回通過23秒鐘，并不時(shí)以載玻片背面接觸皮膚，不覺過燙為宜（不超過60℃），放置待冷后，進(jìn)行染色；d) 初染：在涂片薄膜上滴加草酸銨結(jié)晶紫12滴，使染色液覆蓋涂片，染色約1min；e) 水洗：用洗瓶中自來水沖洗，直至洗下的水呈無色為止；f) 媒染：用1001000μL移液槍吸取約300μL碘液滴在涂片薄膜上，使染色液覆蓋涂片，染色約1min；g) 水洗：用洗瓶中自來水沖洗，直至洗下的水呈無色為止； h) 脫色：斜置載玻片，滴加95%乙醇脫色，至流出的乙醇不現(xiàn)紫色為止，大約需時(shí)2030S，隨即水洗；i) 復(fù)染：滴加沙黃染液12滴，使染色液覆蓋觸片約1min；j) 水洗：斜置載玻片，在自來水龍頭下用小股水流沖洗，直至洗下的水呈無色為止；k) 干燥、觀察：用吸水紙吸掉水滴，待標(biāo)本片干后置顯微鏡下，用低倍鏡觀察，發(fā)現(xiàn)目的物后滴一滴浸油在玻片上，用油鏡觀察細(xì)菌的形態(tài)及顏色，紫色的是革蘭氏陽性菌，紅色的是革蘭氏陰性菌。3．病毒學(xué)病料處理a) 臨床上各種疾病的癥狀非常相似，而且極易發(fā)生混合感染，因此確診需 依賴于實(shí)驗(yàn)室的診斷。病毒性疾病的實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)的大致程序如下：臨床標(biāo)本→分離培養(yǎng)→初步鑒定→最后鑒定。b) 用剪刀剪取病變明顯的肺臟部位，置于小青瓶或平皿中，用小剪刀剪成大小約1mm3的碎塊，然后加入等量滅菌生理鹽水或PBS，置于玻璃勻漿器中進(jìn)行勻漿，組織勻漿液倒入小青瓶中，置于20℃冰箱凍存?zhèn)溆?。c) 王老師幫助我們反復(fù)凍融三次。(四) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果1. 剖解記錄表格時(shí)間：2013528地點(diǎn)：逸夫樓4017組號(hào)： 第五組品種： 乳豬性別：公年齡： 不詳外部檢查體表被毛粗亂，體形消瘦；可站立，眼結(jié)膜顏色正常；腰臀皮膚可見芝麻到綠豆大的紅點(diǎn)，肛門附近無糞便污染狀況，耳朵、胸、腹、背、四肢：全身有不同體積的瘀血斑，可視粘膜發(fā)紺，關(guān)節(jié)有輕微腫脹，站立姿勢(shì)不穩(wěn)，肛門周圍有少量糞便污染。觸診下頜淋巴結(jié)腫脹，發(fā)紅，顏色不均，質(zhì)地較硬，有結(jié)節(jié)狀結(jié)構(gòu)。腹股溝淋巴結(jié)腫脹，橫切斷面也有出血點(diǎn)，肺門淋巴結(jié)腫脹，腹股溝淋巴結(jié)腫脹，發(fā)紅，顏色不均，質(zhì)地較硬，表面凹凸不平呈結(jié)節(jié)狀變化類似，髂下淋巴結(jié)，腫脹明顯，表面更不平整。臟器剖檢胸腔肺臟有淡紅色輕度肉質(zhì)病變，但不腫脹，表面不光澤，不平整。心臟無明顯病變，肝正常肺門淋巴結(jié)顏色變紅，有腫脹變化和結(jié)節(jié)狀結(jié)構(gòu)。腹腔各個(gè)腸斷和肝組織基本正常，脾呈紫黑色，邊緣卷褶皺，有萎縮，光澤低，表面不是特別平整。腎表面有點(diǎn)狀出血點(diǎn)，被膜松軟，光澤低， 2. 鏡檢結(jié)果可能由于細(xì)菌含量較低，所以只能看見肺組織細(xì)胞，未能見到副豬嗜血桿菌，后來對(duì)于副豬嗜血桿菌的陽性培養(yǎng)液進(jìn)行涂片鏡檢觀察，可以見到紅色的細(xì)短桿菌。肺組織細(xì)胞豬肺組織涂片鏡檢（X40）副豬嗜血桿菌陽性副豬嗜血桿菌涂片鏡檢（X40）第三天：病毒的分離接種（病料過濾和接種細(xì)胞）；分離細(xì)菌鏡檢和增殖（一）細(xì)菌菌落觀察，并且挑取單個(gè)菌落到TSB液體培養(yǎng)基中具體步驟：在接菌之前，加入100μL輔酶A和100μL小牛血清，挑取疑似菌落（HPS為無色或淡灰色，半透明小菌落）接到TSB培養(yǎng)基中，放到搖床，37℃培養(yǎng)24h。明天觀察。（二） 病毒部分：1.
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