【正文】 中，科學家從Ashanthi身上抽取血液并分離得到少量 白細胞，進行體外培養(yǎng)擴增。然后，他們利用改造后的逆轉錄病毒將正常的人ADA基因轉移到靶細胞里，使白細胞代償性地表達了 ADA蛋 白。十天以后，這種經(jīng)過“修飾”的白細胞通過靜脈緩緩地輸回到女孩體中。通過這種治療方式， Ashanthi的免疫系統(tǒng)功能提高了40%以上。 治療結果 由于那些經(jīng)過遺傳改造的細胞只能正常工作幾個 月，所以這并沒有完全治愈 Ashanthi，其后必須要反復重復這個治療過程，才能保證免疫系統(tǒng)繼續(xù)工作。至今， Ashanthi的健康狀態(tài)一直保持良好，她甚至開始讀大學了。小女孩徹底告別了 與世隔絕的無菌病房，走進了陽光燦爛的新生活。 晚近成功基因治療的病例 2022年 4月 28日：英研究人員首次利用基因療法改善了一名先天失明患者的視力。英國倫敦大學醫(yī)學院及摩爾菲爾茲眼科醫(yī)院的研究人員成功開展了一項臨床實驗，首次革命性地采用基因療法改善了一位 18歲的先天失明患者 Steven Howarth的視力。他們指出，這種治療方法十分安全有效。此項研究是基因療法技術的一大里程碑，它將對眼部疾病治療產(chǎn)生深遠的影響。 利伯先天性黑朦 ? 利伯先天性黑朦（ Leber congenital amaurosis, LCA） ,是一種由單個基因突變引起的遺傳性疾病。這種病在幼年時期就開始影響視力，病人在 40歲就會完全失明。研究 人員認為這種病的其中一種形式由視網(wǎng)膜色素上皮細胞 65（ retinal pigment epithelium 65, RPE65） 基因突變造成。 RPE65編碼的蛋白能夠將維生素 A轉化為能被視網(wǎng)膜感光細胞（視桿細胞和視錐細胞）利用的形式，以產(chǎn)生視紫紅質。視紫紅質為可吸收光的色 素物質。如果沒有視紫紅質，這些感光細胞最終將會死亡。導致患者最終完全失明。 2022年，研究人員報道，往攜帶 RPE65基因突變的伯瑞犬的視網(wǎng)膜細胞插入功能性 RPE65基 因拷貝，能恢復其光感受器的功能。接受基因療法治療后，這些伯瑞犬可以避開障礙物，走出迷宮（ ScienceNOW, 27 April 2022）。 我國的基因治療 ?復旦大學遺傳所與第二軍醫(yī)大學長海醫(yī)院合作 ,曾對血友病 B患者進行基因治療 ,使用攜帶有人 Ⅸ 因子基因的反轉錄病毒載體轉染培養(yǎng)中的皮膚成纖維細胞 ,分泌 Ⅸ 因子的自體成纖維細胞包埋于膠原并注入患者皮下 ,患者 Ⅸ 因子的水平從 70ug /L 上升到 240ug/L,凝血活性由 %上升至 %.臨床癥狀明顯改善。 我國的基因治療 ? 2022年 10月中國國家食品藥品監(jiān)督管理局批準了基因治療藥物 “ 今又生 ” 的商業(yè)化銷售，成為世界上第一例國家批準的基因治療藥物。到 2022年底，全國 22個省市150多家三甲醫(yī)院的 3100多名病人接受了該藥物的治療，治療的惡性腫瘤達 43種，表明其抗癌具有廣譜性。 ? 2022年 11月，第二個基因治療藥物 —— 重組人 p53腺病毒注射液 H101又獲國家一類新藥許可。 H101主要用于治療鼻咽癌等頭頸部腫瘤，并對非小細 胞肺癌、腸癌、軟骨肉瘤等癌癥具有明顯療效。 P53 的治療價值 今又生 通用名 ：重組人 p53腺病毒注射液 英文名 ： Rebinant Human Adp53 Injection 漢語拼音 ： Chongzuren p53 Xianbingdu Zhusheye 注冊商標 ：今又生（ Gendicine） 主要組成成分 ：重組腺病毒 p53基因顆粒 [性狀 ] 本品為淡白色澄明液體 3. 基因治療失敗的教訓 1999年 9月 17日美國費城青年蓋辛格接受腺病毒載體的基因治療因全身免疫反應導致多臟器衰竭而最終死亡，年僅 18歲。這不僅引發(fā)了全球性的大辯論，同時使美國的 FDA下令暫停賓夕法尼亞大學的 8項基因治療實驗。 4. 基因治療的基本條件 １ . 基因診斷明確 ２ . 現(xiàn)行的治療方法無效或欠佳 ３ . 相關基因的克隆、載體的構建和基因 轉移等技術已經(jīng)相當成熟。 ４ . 較低的表達水平足可以治療疾病。 ５ . 基因轉移有效性和安全性的檢測系統(tǒng) 已經(jīng)建立。 ６ . 動物實驗的驗證。 5. 基因治療的基本過程 1. 病例的選擇 2. 基因診斷 3. 目的基因的獲得與擴增 4. 靶細胞的選擇與分離 5. 載體的選擇與構建 6. 目的基因與載體的連接 7. 基因轉移 8. 療效的觀察與確定 基因轉移技術 基因轉移的物理學方法 : 基因注射 ,電穿孔等 . 基因轉移的化學方法 : 氯化鈣轉移法 ,脂質體轉移法等 . 基因轉移的生物學方法 : 逆轉錄病毒載體 , 腺病毒載體 , 其他病毒載體 逆轉錄病毒載體的優(yōu)點 1. 結構簡單，遺傳背景清楚 2. 病毒基因可在真核細胞表達 3. 可以獲得高病毒滴度 4. 可選擇性的進入靶細胞 5. 感染效率高 逆轉錄病毒載體的缺點 １ . 靶細胞必須處于增殖狀態(tài) ２ . 外源基因容量有限（～９ kb） ３ . 重組病毒的滴度較低 ４ . 感染靶細胞的特異性不高 病毒載體的安全性 １ . 總體來說，病毒載體是安全的。 ２ . 逆轉錄病毒攜帶基因整合到靶 細胞基因是隨機的，理論上有 激活癌基因的可能。 ３ . 許多病毒是致病的，科研史上 有基因治療使接受者死亡的先 例。 逆轉錄病毒的基本結構 1. 兩端有長末端重復序列（ LTR），其中包括啟動子，增強子和整合到目的基因中所需的序列。 ２ .結構基因：核殼蛋白基因（ gag），逆轉錄酶基因（ pol）和外殼蛋白基因（ env） 3. 包裝信號序列（ psi,ψ） 逆轉錄病毒載體的缺點 １ . 逆轉錄病毒中逆轉錄酶的存在 的意義 ,為逆轉錄提供了可能 . ２ . 在基因治療中不能造成病毒的反 復感染 ,甚至造成疾病 . ３ . 要兼顧上述兩個問題 ,要揚長補短 , 優(yōu)勢互補 . 6. 基因治療的前景 ? 基因治療是醫(yī)學臨床領域的一項革命和創(chuàng)新，為臨床醫(yī)學許多目前尚無有效治療疾病的患者帶來福音和希望。 ? 基因治療既有成功的先例，同時也有失敗的慘痛教訓。基因治療的改進和出路在于分子生物學理論的突破和實驗技術的創(chuàng)新。 ? 目前我們不能因成功的先例盲目崇拜基因治療，也不能因失敗的教訓而放棄基因治療?；蛑委熅哂袩o限光明的前途。 Questions? ？舉例說明基因與疾病的關系。 ？何謂 PCRRFLP和 PCR SSCP？簡述 PCRRFLP和 PCR SSCP技術的基本原理和操作過程。并 簡要討論該兩種基因診斷技術的應用特 點和各自的優(yōu)缺點。 ？結合所學基因治療的知 識，談一談你對基因治療現(xiàn)狀的認識和 對其將來的展望。 謝謝 光臨