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第十一章基因工程-資料下載頁

2025-08-01 13:27本頁面
  

【正文】 連接 具有平末端的酶切載體只能與平末端的目的基因連接。 T4 DNA連接酶可催化相同和不同限制性核酸內(nèi)切酶切割的平端之間的連接 有時載體 DNA片段是平末端,而目的基因卻是粘性末端,那就需要進行處理,使載體DNA和目的基因的末端一致起來,通常是將目的基因的粘性末端修飾成平末端,即 添補法 和 削除法 。 人工接頭連接 同聚物加尾連接 同聚物加尾連接是利用同聚物序列之間的退火作用完成的連接 基因轉(zhuǎn)移 ①轉(zhuǎn)化 (transformation), 是將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細菌細胞 ②轉(zhuǎn)染 (transfection), 是將攜帶外源基因的病毒感染受體細胞 ③微注射技術(shù) (microinjection) ④電轉(zhuǎn)化法 (electrotransformation) ⑤微彈技術(shù) (micro neblast technique也叫高速粒子轟擊法 micro projector或基因槍技術(shù)gene blaster technique) ⑥脂質(zhì)體介導(dǎo)法 (liposome mediated gene transfer); 重組體的鑒定篩選 轉(zhuǎn)基因技術(shù) 轉(zhuǎn)基因動物 是指以實驗方法導(dǎo)入外源基因,在染色體組內(nèi)穩(wěn)定整合并能遺傳給后代的一類動物。 融合法 ,包括細胞融合,微細胞介導(dǎo)融合等 化學(xué)法 ,包括 DNA磷酸鈣沉淀法、 DEAE葡聚糖法、染色體介導(dǎo)法等 物理法 ,包括顯微注射法、電脈沖法、細胞凍存法等 病毒感染法 ,包括重組 DNA病毒感染、重組 RNA病毒感染等 克隆技術(shù) 生產(chǎn)哺乳動物克隆的方法主要有胚胎分割和細胞核移植兩種,目前應(yīng)用的主要是后者。 ( 1)培育優(yōu)良畜種和生產(chǎn)實驗動物; ( 2)生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因動物 ( 3)用于細胞和組織替代療法; ( 4)復(fù)制瀕危的動物物種 用分子生物學(xué)方法檢測患者體內(nèi)遺傳物質(zhì)的水平或結(jié)構(gòu)變化而作出的或輔助臨床診斷的技術(shù),稱為 基因診斷 核酸雜交 聚合酶鏈反應(yīng) 限制性內(nèi)切酶酶譜分析 RFLP
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