第十一章基因工程-在線瀏覽
2024-09-11 13:27本頁面
【正文】 酸酶 S1核酸酶 ① 去除 DNA片段的單鏈突出端，使之成為平端 ② 去除 cDNA合成時形成的發(fā)夾結(jié)構(gòu) ③ 施行 Sl核酸酶保護(hù)試驗（ Sl protection或 Sl mapping）， 分析轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物 ④ 成熟 mRNA與基因組 DNA雜交后，結(jié)合 Sl核酸酶水解，可確定內(nèi)含子在基因組 DNA中的定位 ⑤ 修整漸進(jìn)性刪除突變的末端 核酸酶 Bal 31核酸酶 ① 用于不同長度的刪除突變克隆實驗及基因結(jié)構(gòu)、機能分析 ② 繪制 DNA限性內(nèi)切圖譜 ③ 研究超螺旋 DNA的二級結(jié)構(gòu)和致畸劑引起的雙鏈 DNA螺旋結(jié)構(gòu)變化 基因工程載體 載體 （ vector） 是把外源基因引入受體細(xì)胞并在其中能自我復(fù)制的小 DNA 分子。 基因工程概述 基因工程的基本流程 目的基因獲得 重組 DNA分子構(gòu)建 導(dǎo)入受體細(xì)胞 轉(zhuǎn)化體細(xì)胞擴增、鑒定與篩選 工具酶 識別雙鏈 DNA中特定序列并切割雙鏈 DNA的核酸內(nèi)切酶。 動物克隆技術(shù)與轉(zhuǎn)基因技術(shù) 基因工程 （ geic engineering）， 也叫基因操作、遺傳工程，或重組體 DNA技術(shù)。第十一章 基因工程 本章重點 基因工程的概念和一般操作流程。 基因工程工具酶、載體、目的基因獲得方法、重組連接技術(shù)、導(dǎo)入技術(shù)、以及重組的篩選等。它是一項將生物的某個基因通過基因載體運送到另一種生物的活性細(xì)胞中，并使之無性繁殖（稱之為“ 克隆 ”）和行使正常功能（稱之為“ 表達(dá) ”），從而創(chuàng)造生物新品種或新物種的遺傳學(xué)技術(shù)。 Ⅰ 型和 Ⅲ 型限制酶的切點不固定，不能產(chǎn)生可以利用的 DNA片段，只有 Ⅱ 型限制酶具有可以控制和預(yù)測的位點特異性切割的性質(zhì)，并且產(chǎn)生固定的 DNA片段，因此基因工程中所用的限制酶都是 Ⅱ 型限制酶 。 基因工程中的載體應(yīng)具有如下一些特性 ： 獨立和穩(wěn)定的 DNA自我復(fù)制 易于從宿主細(xì)胞中分離，并進(jìn)行純化 具有適當(dāng)?shù)南拗菩詢?nèi)切酶位點 有報告基因 細(xì)菌質(zhì)粒載體 質(zhì)粒 是細(xì)菌染色體外的小型環(huán)狀雙鏈的DN
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