微生物計數(shù)方法-資料下載頁
2025-07-25 16:21本頁面
【正文】 ．稱取10克土樣，放入90ml無菌水中，振蕩20min，讓菌充分分散，然后按十倍稀釋法將供試土樣制成101—106的土壤稀釋液。2．將22支裝有Ashby無氮培養(yǎng)液的試管按縱4橫5的方陣排列于試管架上，第一縱列的4支試管上標(biāo)以102，第二縱列的4支試管上標(biāo)以103……第五縱列的4支管上際以106（即采用5個稀釋度，4個重復(fù)），另外2支試管留作對照。3． 用lml無菌吸管按無菌操作要求吸取106的土壤稀釋液各lml放入編號106的4支試管中，再吸取105稀釋液各lml放入編號105的4支試管中，同法吸取1010102稀釋液各lml放入各自對應(yīng)編號的試管中。對照管不加稀釋液。4．將所有試管置28—30℃培養(yǎng)7天后觀察結(jié)果。5．精確稱取3份10克稀釋用土，放入稱量瓶中，置105110℃烘2h后放入干燥器中，至恒重后稱重，然后計算干土在土樣中所占的質(zhì)量份數(shù)。五、實驗作業(yè)： 培養(yǎng)7天后，取出試管，檢查實驗結(jié)果。 凡有固氮菌生長的試管，則培養(yǎng)液與濾紙接觸處有黑褐色或粘液狀菌膜，即為陽性，否則為陰性。對照管應(yīng)為陰性。依次檢查每管生長情況，將結(jié)果填入下表，計算每克干土所含的活菌數(shù)。土壤稀釋度102103104105106重復(fù)次數(shù)44444固氮菌生長管數(shù) 數(shù)量指標(biāo) 干土的質(zhì)量分?jǐn)?shù) 菌數(shù)近視值 每克干土固氮菌數(shù)個/克干土附表231 幾種主要微生物生理群MPN計數(shù)法一覽表微生物生理群培養(yǎng)基常用稀釋度常用重復(fù)次數(shù)培養(yǎng)時間 (天)主 要 檢 查 方 法氨化細(xì)菌蛋白胨氨化培養(yǎng)基06—10947根據(jù)培養(yǎng)液加奈氏試劑后是否出現(xiàn)棕色或褐色，確定是否產(chǎn)生氨。亞硝酸細(xì)菌銨鹽培養(yǎng)基02—107314根據(jù)培養(yǎng)液加格利斯試劑Ⅰ及Ⅱ的反應(yīng)，出現(xiàn)絳紅色證明有NO2生成；或在培養(yǎng)中加鋅碘淀粉試劑及體積比值為20%的H2SO4，若出現(xiàn)藍(lán)色，證明有NO3生成。硝酸細(xì)菌亞硝酸鹽培養(yǎng)基02—106314根據(jù)培養(yǎng)液加入濃硫酸及二苯胺試劑后，是否出現(xiàn)藍(lán)色，確定是否有NO3生成。反硝化細(xì)菌反硝化細(xì)菌培養(yǎng)基04—108314根據(jù)杜氏小管有無氣體，確定有無N2生成；利用格利斯試劑Ⅰ及Ⅱ和二苯胺試劑、濃硫酸檢測有無NO2生成及有無NH3存在，判斷反硝化作用進(jìn)行情況。好氣性自生固氮菌阿須貝無氮培養(yǎng)基02—1063714根據(jù)培養(yǎng)液表面與濾紙接觸處有無褐色或粘液狀菌膜生成，判斷有無好氣性自生固氮菌生長。好氣性 纖維素分解菌赫奇遜噬纖維培養(yǎng)基01—105314根據(jù)各試管中濾紙條上有無黃色或桔黃色菌斑出現(xiàn)及濾紙斷裂狀況，確定有無好氣性纖維素分解細(xì)菌的生長。厭氣性纖維素分解菌嫌氣性纖維素分解細(xì)菌培養(yǎng)基01—10531421根據(jù)各試管中濾紙條上有無穿洞、破裂、完全分解情況，確定有無嫌氣性纖維素分解細(xì)菌的生長。硫化細(xì)菌硫化細(xì)菌培養(yǎng)基02—10832123在每管培養(yǎng)液中加入10g/L的BaCL2溶液2滴，如有白色沉淀出現(xiàn)，則證明有硫化菌活動。反硫化細(xì)菌斯塔克反硫化細(xì)菌培養(yǎng)基02—10732130根據(jù)培養(yǎng)液試管底部、管壁有無黑色沉淀出現(xiàn)，判斷有無反硫化細(xì)菌活動。
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