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小鼠肝細胞線粒體的染色觀察docxdocx-資料下載頁

2025-07-18 02:31本頁面
  

【正文】 的拿捏方式可以使處死小鼠的過程更為方便。(2) 打開小鼠腹腔的時候,開口在橫膈膜下方,比上次實驗的開口要往上一些,但要注意不能剪到胸腔處。 (3) 打開腹腔后,可以看到肝臟位于左手邊,呈紅色,但顏色有一些偏淡,不要與右手邊血紅色的脾臟混淆,切下小鼠的肝臟,備用,剪的時候要注意避開各種血管,防止出血量過多凝結。(4) 從小鼠肝臟上取組織塊的時候,要選取薄邊的一端,從此處取2小塊,這一部分血少,易?。硪欢颂?,不易取也不易染色,而且剪的時候出血量比較多)。(5) 剪下來的組織塊要立即放到Ringer緩沖液中去洗去其上的血液,因為如果組織塊長時間暴露在空氣中的話,其上的血液會凝固,使得染色操作變得困難,洗的時候用鑷子輕輕的夾住涮洗,這樣可使血液快速的被洗脫,但不要太用力,這樣會將組織塊弄碎。(6) 染色時染液從組織塊邊緣處滴加,使染液慢慢浸過組織塊或浸到一半,不能從組織塊上方滴加,這樣半浸的一組上半部分也會接觸到染液,影響實驗效果。(7) 由于染色不是很容易,所以可以適當?shù)难娱L染色的時間,不要只局限于實驗步驟中的30分鐘。(8) 將組織塊剪碎時,要注意拿剪刀的方式,學會靈活運用各種工具;剪的時候要將其盡量剪碎,使小燒杯中的液體成懸濁液的狀態(tài)。(9) 鏡檢時要注意區(qū)分線粒體與糖原細胞的區(qū)別,同時還要判斷線粒體染得是藍色還是綠色,注意對比。而且制作裝片時,所滴加的懸液不要過多,液體過多會導致細胞在顯微鏡下快速流動,給觀察增加了不小的難度,很難找到合適的線粒體進行觀察和拍照。(10) 直接向懸液中滴加染液時,所加染液要適量,過多的話,顯微鏡下的線粒體會覆蓋一層很淡的藍色,影響觀察。(11) 肌細胞含線粒體同樣豐富,希望可以也對其進行實驗觀察,與肝細胞線粒體進行對比。參考文獻:[1]韓貽仁 主編.2007.分子細胞生物學.第三版.北京:高等教育出版社[2]王崇英、高清祥 主編.2011.細胞生物學實驗.第三版.北京: 高等教育出版社[3]王鏡巖 朱圣庚 徐長法 .生物化學.第三版(下冊).北京: 高等教育出版社[4]百度百科
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