第四章中藥鑒定09doc-資料下載頁
2025-07-15 05:28本頁面
【正文】 仁、綠殼砂仁和縮砂所含揮發(fā)油成分相似，主要成分為檸檬烯、芳樟醇、樟腦、龍腦、乙酸龍腦酯，但含量不同，色譜峰也有明顯區(qū)別。 3. 高效液相色譜法(high performance liguid chromatography, HPLC) 具有快速、分離效率高、儀器化等特點(diǎn)，而且其適應(yīng)范圍廣、流動(dòng)相可選擇范圍寬、色譜柱可反復(fù)使用以及組份易收集等優(yōu)點(diǎn)，已成為天然藥物成分分離和定性、定量分析不可缺少的工具。 根據(jù)中藥中主要化學(xué)成分的性質(zhì)，制備適宜的樣品溶液，選擇適當(dāng)?shù)纳V柱和分析條件即可進(jìn)樣分析。 高效液相色譜圖中各色譜峰的保留時(shí)間、相對百分峰面積以及主要色譜峰的紫外吸收光譜等，均可作為中藥真實(shí)性鑒定的指紋資料。HPLC實(shí)例：（蛋白）電泳色譜法 是利用帶電粒子在電場的作用下，遷移的速度不同這一原理進(jìn)行分離的技術(shù)。 聚丙烯酰胺凝膠蛋白電泳是指以為支持介質(zhì)的電泳分離方法。操作簡便，重現(xiàn)性好，電泳譜帶穩(wěn)定可靠。人參、西洋參及偽品鑒別1）.樣品的制備及凝膠系統(tǒng)的選擇： 新鮮樣品，低溫干燥（t60 ℃)，冰箱內(nèi)固定1小時(shí)，搗碎，過40目篩，加電極緩沖液研磨成勻漿，3500rpm離心10分鐘，上清液再5000rmp離心10分鐘，取上清液備用。 凝膠：％,％。電極緩沖為tris－甘氨酸 。2).加樣與電泳：每凝膠管加樣品液100ul,表面小心覆蓋電極緩沖液，上槽負(fù)極緩沖液中加2滴溴酚藍(lán)指示劑，接通電源，調(diào)節(jié)電流至每管1mA，當(dāng)樣品進(jìn)入分離膠后（約20分鐘），加大電流至每管2mA,待溴酚藍(lán)到達(dá)距末端1cm時(shí)，停止電泳。3).固定、染色與脫色：電泳完畢后，％三氯乙酸中固定30分鐘，然后浸入含2％％三氯乙酸中染色2小時(shí)，再用7％醋酸漂洗脫色至背景清晰為止。4).結(jié)果：譜帶分為四級，色深者為一級，色淺者為二級，色極淺者為三級，譜帶擴(kuò)散者為擴(kuò)散帶。（五）光譜法物質(zhì)溶液對于不同波長的光線的吸收能力是不同的，利用分光光度計(jì)將不同波長的單色光連續(xù)通過該溶液，就可得到該物質(zhì)的吸收光譜。每種物質(zhì)都有其特定的吸收光譜，是天然化合物結(jié)構(gòu)鑒定的重要依據(jù)之一。紫外分光光度法比色法紅外分光光度法原子吸收分光光度法串聯(lián)質(zhì)譜法X射線衍射法 光譜法： 主要有紫外分光光度法（200400nm）、比色法(400850nm)。紅外分光光度法（）原子吸收光譜。 可以通過比較樣品和標(biāo)準(zhǔn)中藥的甲醇、一定濃度乙醇氯仿或石油醚等的中藥提取液的紫外吸收光譜異同，用于中藥真實(shí)性鑒定。 由于紫外光譜峰形簡單、可供鑒別的特征少，一些中藥的紫外光譜相似而難于鑒別時(shí)，則可通過比較上述提取液的一階或二階導(dǎo)數(shù)光譜。 ＵＶ 中藥的適當(dāng)溶劑提取物的紅外光譜在種內(nèi)是比較穩(wěn)定的，而種間差異又是顯著的。因此，可用于中藥的真實(shí)性鑒定。 血竭的紅外光譜特征吸收峰是1610cm1和1120cm1，后者為第一強(qiáng)峰； 達(dá)瑪樹膠（1380cm1 、1460cm1 1707cm1）的特征峰為1707cm1， 松香（1280cm1 1692cm1 ）的特征吸收峰是1692cm1 。 手牌血竭和皇冠牌血竭：兩種規(guī)格的血竭的特征吸收峰一致，同時(shí)均出現(xiàn)達(dá)瑪樹膠的特征峰，表明兩種血竭在加工時(shí)均摻入了達(dá)瑪樹膠。 3. 原子吸收分光光度法 從光源輻射出的代測元素特征光波通過樣品蒸汽時(shí)，被蒸汽中該代測元素的基態(tài)原子吸收。測定輻射光強(qiáng)度減弱的程度，求出供試樣品中代測元素含量的一種方法。 測定中藥材中微量元素的含量及分布規(guī)律，作為真?zhèn)舞b別和地道藥材產(chǎn)地鑒別的依據(jù)。（六）色譜－光譜聯(lián)用分析法（七）浸出物測定（八）含量測定常用的分析方法： 滴定法 容量法 重量法 分光光度法 氣相色譜法 高效液相色譜法 薄層掃描法 薄層分光光度法等。 揮發(fā)油含量測定 五、新技術(shù)和新方法（一）DNA分子遺傳標(biāo)記技術(shù)（１）聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）技術(shù)（２）限制性內(nèi)切酶酶切片段長度多態(tài)性（RFLP（３）隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA（DNA RAPD） 任意引物PCR（APPCR）技術(shù) （４）DNA測序方法（二）中藥指紋圖譜技術(shù)：（三）高效毛細(xì)管電泳技術(shù)（四）組織化學(xué)色譜法 顯微操作器 取出細(xì)胞中的結(jié)晶、油滴 色譜分析 鑒定出化學(xué)成分（五）計(jì)算機(jī)技術(shù)10 / 1
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