【正文】 一周。3． 避免嚴(yán)重脂血或溶血。RBC內(nèi)ALT活力比血清高7倍。溶血使結(jié)果偏高。三．試劑、校準(zhǔn)品及質(zhì)控品：：原裝試劑2~80C避光保存，在效期內(nèi)使用。：中生21項(xiàng)質(zhì)控血清（3ml*10規(guī)格）小心開啟瓶塞（請(qǐng)勿丟失），用奧氏吸管準(zhǔn)確吸取3ml蒸餾水溶解粉劑，顛倒混勻，避免產(chǎn)生氣泡和丟失，靜置30min。待完全溶解后，輕輕倒置5~10次即可使用?？梢苑盅b、標(biāo)記、冷凍保存?zhèn)溆?。四．儀器設(shè)備： 1. 卓越310型半自動(dòng)生化儀； 2．基本設(shè)備：離心機(jī)。 五．操作： 質(zhì)控 測(cè) 定 空 白蒸餾水 — — 10ul 質(zhì)控液 10ul — — 血清樣品 — 10ul — 試劑應(yīng)用液 充分混勻，370C保溫1min后，空白調(diào)零，340nm比色，儀器自動(dòng)連續(xù)讀取吸光度并計(jì)算。六．計(jì)算：?jiǎn)挝欢x：370C 1min使1umolNADH轉(zhuǎn)化生成NAD+所需的酶量為1單位（U/L）。 ALT=ΔA/min * Vt/（Vs*e）*1000=ΔA/min * F F=Vt/（Vs * ）*1000=1746七．操作性能： 1．可報(bào)告范圍（線性范圍）：＜600U/L 2．精密度：批間差≤10%3．準(zhǔn)確度：相對(duì)偏差不超過15%；4．試劑空白吸光度：≥：成人：5~40 U/L 新生兒ALT水平可比成人高1倍，3個(gè)月后降至成人水平。九．臨床意義:ALT廣泛存在于多種器官中，按含量多少順序：肝臟、腎臟、心臟、骨骼肌等。由于肝細(xì)胞中ALT活性比血清高2850倍，故有1%的肝臟損傷，就足以使血液中ALT活性升高1倍或更高。 ALT活性在下列疾病可見增高：1． 急性病毒性肝炎：最敏感（不特異）指標(biāo)。ALT活性高低與臨床病情輕重平行。肝炎患者血清ALT變化規(guī)律一般表現(xiàn)為三種：：早期ALT活性升高，出現(xiàn)黃疸后急劇升高，高峰達(dá)正常10倍以上，至黃疸極期，ALT活性迅速下降。某些無黃疸患者早期ALT也可急劇升高，達(dá)高峰后，迅速下降至100~200時(shí)，常持續(xù)一段時(shí)間后恢復(fù)正常。：早期ALT升高不明顯，長(zhǎng)期停留于較高水平，持續(xù)數(shù)月或數(shù)年而轉(zhuǎn)為慢性肝炎。 輕型無黃疸型肝炎：常只有一過型ALT升高，很快恢復(fù)正常。“酶膽分離”現(xiàn)象：急性肝炎和亞急性重癥肝炎早期，ALT明顯增高，隨病情惡化，大量肝細(xì)胞壞死，使血中ALT活性下降，甚至在正常范圍內(nèi)，與此同時(shí)BIL卻進(jìn)行性升高，呈現(xiàn)“酶膽分離”現(xiàn)象，此為重癥肝炎臨終期的表現(xiàn)，預(yù)后極差。2．慢性肝炎和脂肪肝：急性肝炎患者如血清ALT活性持續(xù)升高或反復(fù)波動(dòng)達(dá)半年以上，說明已成為慢性肝炎。慢性遷延性肝炎、慢性活動(dòng)性肝炎ALT水平不超過參考值的3~5倍，如伴有壞死可升高到10倍以上。脂肪肝患者ALT活性可持續(xù)輕度升高并伴有高脂血癥。3. 肝硬化：失代償期ALT可持續(xù)升高；膽汁淤積性肝硬化ALT活性較高可與疸平行。4. 原發(fā)性肝癌：正常、輕、中度升高，明顯升高提示可能并發(fā)肝壞死，預(yù)后嚴(yán)重。5．膽道疾病:膽道梗阻時(shí)，可致ALT中度升高，梗阻緩解后1~2周即恢復(fù)正常。6．藥物引起的ALT活性升高:如奎寧、水楊酸制劑、異煙肼、氯丙嗪、利福平、環(huán)磷酰胺和某些抗生素如氨芐青霉素、藥物麻醉、酒精、CCL重金屬離子及鋁、汞、有機(jī)磷、農(nóng)藥中毒、抗癌藥物等。7．其它：心血管疾病如心肌梗塞,心肌炎,心力衰竭時(shí)，急性腎盂腎炎、大葉性肺炎、支氣管炎、傳單增、流感、急性胰腺炎、甲亢、潰瘍性結(jié)腸炎、瘧疾、血吸蟲病、外傷或手及骨骼疾病如：肌營(yíng)養(yǎng)不良、多發(fā)性肌炎。8．ALT與AST聯(lián)合測(cè)定并計(jì)算比值有助于對(duì)某些疾病的鑒別及判斷肝實(shí)質(zhì)損害的嚴(yán)重程度。健康人AST/。 急性病毒性肝炎AST/ALT 1； 慢性肝炎、肝硬化時(shí)AST/ALT常 2； 原發(fā)性肝癌時(shí)AST/ALT 3；十．質(zhì)量保證:1．；2．本試劑是一步法,為防止血清內(nèi)丙酮酸干擾,試劑加樣品60秒后測(cè)定為好；3．磷酸吡哆醛（P5′P）能使ALT顯示最大活性，國(guó)產(chǎn)試劑一般無。4．避免標(biāo)本溶血。標(biāo)本溶血后除RBC內(nèi)ALT釋出引起結(jié)果偏高外，RBC內(nèi)的谷胱甘肽還原酶釋入血清，使氧化型谷胱甘肽還原，亦消耗NADH，使結(jié)果偏高。嚴(yán)重黃疸及渾濁血清應(yīng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。5．遇到酮癥酸中毒及放置時(shí)間過長(zhǎng)的高酮酸標(biāo)本時(shí)，應(yīng)稀釋或適當(dāng)延長(zhǎng)延遲時(shí)間，即可消除假性增高。，可使底物在延遲期內(nèi)耗盡，表現(xiàn)為初始吸光度很低，結(jié)果也很低，此時(shí)應(yīng)稀釋標(biāo)本再測(cè)。當(dāng)ΔA/，應(yīng)用生理鹽水稀釋5~10倍后再測(cè)。7．適時(shí)保養(yǎng)儀器，適時(shí)校準(zhǔn)儀器，保證儀器正常運(yùn)轉(zhuǎn)。認(rèn)真做好室內(nèi)質(zhì)控。天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）一． 原理： L天門冬氨酸 + a酮戊二酸 AST 草酰乙酸 + L谷氨酸 草酰乙酸 + NADH + H+ MDH L蘋果酸 + NAD+ + H2O二． 標(biāo)本的采集方法及對(duì)病人準(zhǔn)備的要求：1． 采集標(biāo)本必須禁食12小時(shí)以上,靜脈抽血后及時(shí)離心取血清測(cè)定。血清置0~40C可保存一周。2． 避免嚴(yán)重脂血或溶血（RBC中AST為血清含量的15倍）。三．試劑、校準(zhǔn)品及質(zhì)控品：1． 試劑：中生4*50單試劑，原裝試劑2~80C避光保存，復(fù)溶后在2~80C保存可穩(wěn)定1個(gè)月，室溫可穩(wěn)定2天。三．試劑、校準(zhǔn)品及質(zhì)控品：1．試劑：中生10*10單試劑：原裝試劑2~80C避光保存，在效期內(nèi)使用；復(fù)溶后在2~80C保存可穩(wěn)定1個(gè)月，室溫可穩(wěn)定2天。2．質(zhì)控品：中生21項(xiàng)質(zhì)控血清（3ml*10規(guī)格）小心開啟瓶塞（請(qǐng)勿丟失），用奧氏吸管準(zhǔn)確吸取3ml蒸餾水溶解粉劑，顛倒混勻，避免產(chǎn)生氣泡和丟失，靜置30min。待完全溶解后，輕輕倒置5~10次即可使用?？梢苑盅b、標(biāo)記、冷凍保存?zhèn)溆?。四．儀器設(shè)備： 1. 卓越310型半自動(dòng)生化儀； 2．基本設(shè)備：離心機(jī)。 五．操作： 質(zhì)控 測(cè) 定 空 白蒸餾水 — — 10ul 質(zhì)控液 10ul — — 血清樣品 — 10ul — 試劑應(yīng)用液 充分混勻，370C保溫1min后，空白調(diào)零，340nm比色，儀器自動(dòng)連續(xù)讀取吸光度并計(jì)算。六．計(jì)算：?jiǎn)挝欢x：370C 1min使1umolNADH轉(zhuǎn)化生成NAD+所需的酶量為1單位（U/L）。 ALT=ΔA/min * Vt/（Vs*e）*1000=ΔA/min * F F=Vt/（Vs * ）*1000=1746七．操作性能： 1．可報(bào)告范圍（線性范圍）：＜700U/L 2．精密度：批間差≤6%3．準(zhǔn)確度：相對(duì)偏差不超過10%；4．試劑空白吸光度：≥：成人：5~37 U/L 新生兒ALT水平可比成人高2倍，6個(gè)月至1歲后降至成人水平。九．臨床意義： AST在心肌細(xì)胞中含量較多，其次是肝臟、骨骼肌、腎臟。1．AST顯著升高：見于急性肝炎、心肌梗死（一般在發(fā)病后6~12h內(nèi)顯著升高，18~24h達(dá)峰值，AST峰值與梗死灶大小大致成比例。若無新的梗死灶發(fā)生，4~5天后恢復(fù)正常。）藥物中毒性肝細(xì)胞壞死可見AST顯著升高。2． 中度增高：見于肝癌、肝硬化、慢性肝炎、心肌炎等。3． 輕度增高：見于肌炎、胸膜炎、腎炎、肺炎、手術(shù)后及妊娠等。十．質(zhì)量保證：1． ，此試劑失效勿用。超過線性范圍時(shí)用生理鹽水稀釋重測(cè)。2．要避免使用NH+4抗凝劑。避免溶血。3．適時(shí)保養(yǎng)儀器，適時(shí)校準(zhǔn)儀器，保證儀器正常運(yùn)轉(zhuǎn)。認(rèn)真做好室內(nèi)質(zhì)控。血清肌酐檢測(cè)一、檢測(cè)目的規(guī)范血清肌酐（Cr）檢測(cè)，確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。二、原理：在堿性條件下，血清中的肌酐能夠與苦味酸作用生成橘黃色的復(fù)合物，適用生化分析儀檢測(cè)510nm波長(zhǎng)處的吸光度的變化，可知被檢測(cè)血清中肌酐的濃度。三、適用儀器：卓越310全自動(dòng)生化分析儀.四、樣本要求：、樣本種類：新鮮無溶血血清。、樣本采集：常規(guī)靜脈采血約2ml，不抗凝。置普通管中，或采用含有分離膠的真空采血管。、樣本干擾：對(duì)反映吸光度有干擾的樣本，包括溶血和渾濁的樣本都可能影響檢測(cè)結(jié)果遇上述情況建議重新采集標(biāo)本。、樣本保存：血清樣本2℃—8℃可穩(wěn)定3天，20℃可保存一個(gè)月，忌反復(fù)凍融。五、檢測(cè)方法：、試劑的準(zhǔn)備：試劑開瓶即可使用。、檢測(cè)步驟：全自動(dòng)生化分析儀操作步驟：參數(shù)設(shè)置→試劑裝載→校準(zhǔn)→質(zhì)控→樣品加載→測(cè)定→結(jié)果審核→報(bào)告。、校準(zhǔn)：當(dāng)試劑更換批號(hào)、出現(xiàn)質(zhì)控漂移、儀器做完保養(yǎng)后及重要零件更換時(shí)，須按所用標(biāo)準(zhǔn)品說明書以y=ax+b進(jìn)行線性校準(zhǔn)。、結(jié)果計(jì)算：全自動(dòng)生化分析儀會(huì)自動(dòng)給出檢測(cè)結(jié)果。六、參考范圍：男性u(píng)mol/L 女性50105umol/L七、注意事項(xiàng)：、試劑與標(biāo)本用量可因儀器要求按比例增減，測(cè)定結(jié)果不變。、本試劑線性范圍可達(dá)1500umol/L(17mg/dL),超過線性范圍的標(biāo)本可用生理鹽水稀釋，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。、尿標(biāo)本測(cè)定時(shí)須先進(jìn)行稀釋：+5ml生理鹽水，混勻，測(cè)定方法與血清標(biāo)本相同，結(jié)果乘以51。、實(shí)驗(yàn)廢液因含有血清，須按實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)的有關(guān)規(guī)定進(jìn)行消毒處理。八、臨床意義：血清肌酐的臨床意義。①血清肌酐增高：甲狀腺功能亢進(jìn)、巨人癥或肢端肥大癥等及引起腎小球?yàn)V過率減低的疾病均可增高。血清肌酐更能反映腎實(shí)質(zhì)性小球功能損害，但較遲鈍。腎小球?yàn)V過率降到50％以前血清肌酐可正常，也就是說功能性腎單位喪失一半以上時(shí)才增高，此時(shí)即為慢性腎功能不全代償，（2mg/dl）。腎小球?yàn)V過率降到25％以下時(shí)血清肌酐會(huì)急劇增高，可達(dá)5mg/dl以上，此時(shí)一般為尿毒癥期。腎功能完全喪失（例如急性腎衰竭）～，如小于此范圍，說明尚有殘余功能性腎單位，反之說明骨骼肌溶解。②血清肌酐減低：無臨床意義。血清總膽紅素測(cè)定一．用途：本試劑用以測(cè)定人血清中總膽紅素含量，作輔助診斷用。：總膽紅素(是血紅蛋白、肌紅蛋白、過氧化物酶、細(xì)胞色素等含鐵卟琳的化合物在體內(nèi)代謝的產(chǎn)物。血清中有兩類膽紅素，即未結(jié)合膽紅素和合膽紅素。未結(jié)合膽紅素又稱游離膽紅素或間接膽紅素。間接膽紅素在生理pH條件下是難溶于水的脂溶性物質(zhì)，可透過細(xì)胞膜，對(duì)細(xì)胞有毒害作用，不能通腎臟隨尿排出體外。結(jié)合膽紅素即膽紅素葡萄糖醛酸酯，又稱直接膽紅素，直接膽紅素是水溶性的，不易透過細(xì)胞膜，可通過腎臟隨尿排出?？偰懠t素是直接膽紅素與間接膽紅素的和。釩酸鹽氧化法原理如下：總膽紅素釩酸鹽膽綠素膽紅素的減少引起在波長(zhǎng)450nm處吸光度下降，吸光度的變化與總膽紅素含量成正比。：采用空腹無溶血血清，要盡快分離測(cè)定。28℃避光保存，血清中膽紅素可穩(wěn)定3天。冰凍保存3個(gè)月，膽紅素水平未見明顯變化。四、檢測(cè)方法：試劑的準(zhǔn)備：試劑開瓶即可使用。檢測(cè)步驟：全自動(dòng)生化分析儀操作步驟：參數(shù)設(shè)置→試劑裝載→校準(zhǔn)→質(zhì)控→樣品加載→測(cè)定→結(jié)果審核→報(bào)告。校準(zhǔn)：當(dāng)試劑更換批號(hào)、出現(xiàn)質(zhì)控漂移、儀器做完保養(yǎng)后及重要零件更換時(shí)，須按所用標(biāo)準(zhǔn)品說明書以y=ax+b進(jìn)行線性校準(zhǔn)。結(jié)果計(jì)算：全自動(dòng)生化分析儀會(huì)自動(dòng)給出檢測(cè)結(jié)果五.參考值范圍：成年人：⑴判斷有無黃疸、黃疸程度及演變變過程：當(dāng)TBμmol/L但，171342μmol/L為中度黃疸，342μmol/L時(shí)為重度黃疸。在病程中檢測(cè)可以判斷療效和指導(dǎo)治療。⑵根據(jù)黃疸程度推斷黃疸病因溶血性黃疸通常，肝細(xì)胞黃疸為，不完全性梗阻性黃疸為171265μmol/L，完全性梗阻性黃疸通常342μmol/L⑶根據(jù)總膽紅素、結(jié)合及非結(jié)合膽紅素增高程度判斷黃疸類型若STB增高伴非結(jié)合膽紅素明顯增高提示為溶血性黃疸，總膽紅素增高伴結(jié)合膽紅素明顯升高為膽汁淤積性黃疸，三者均增高為肝細(xì)胞性黃疸。45 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