大花惠蘭、石斛蘭的組織培養(yǎng)-資料下載頁
2025-06-29 23:18本頁面
【正文】 2 mg/ L + NAA 1. 5 mg/ L ，40 d 后調(diào)查分化率，%。將分化的苗轉(zhuǎn)入40g/ L MS 脫水培養(yǎng)基（商店可買）作為生長培養(yǎng)基 ,1個月后苗粗壯、根系發(fā)達、葉片紫綠,長勢比較好?！∫圃裕瑢⒔M培所得的紫皮石斛蘭苗移入溫室,練苗3 d 后移栽。移栽前先洗凈組培苗根部培養(yǎng)基,用50 %的多菌靈可濕性粉劑1 000 倍液浸泡10 min ,然后移入苔蘚基質(zhì)中,移栽成活率為32 %。 ③ 廣東石斛的組織培養(yǎng) 將約3 cm長且生長健壯的幼芽從母株上采下，自來水沖洗1 h，去掉外部葉片，先用75% 酒精消毒30 s，% 升汞溶液(加1 滴吐溫)消毒10 min，無菌水沖洗6~8次，用消毒濾紙吸干表面水分，接種到原球莖誘導(dǎo)培養(yǎng)基：1/2MS+ mg/L+NAA ，%， g/L，pH 。培養(yǎng)溫度(26177。2)℃，連續(xù)光照12 h/d，光照強度為2 000Lx。15 d 左右莖節(jié)處開始膨大，30 d 以后逐漸有綠色原球莖長出。將獲得的原球莖轉(zhuǎn)接叢生芽誘導(dǎo)及增殖培養(yǎng)基：花寶1 號3 g/L+6BA mg/L+ mg/L+ 椰汁100 g/L+ 活性炭(AC) g/L，%， g/L，pH ，進行叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)，培養(yǎng)環(huán)境同上，20 d 時由原球莖上長出綠色叢生芽。將叢生芽再次轉(zhuǎn)入新鮮叢生芽誘導(dǎo)及增殖培養(yǎng)基：即花寶1 號3 gL1+6BA ++ 椰汁100 g/L+ 活性炭(AC) g/L中繼續(xù)培養(yǎng)，30 d 為1 個繼代增殖周期，增殖倍數(shù)可達5倍。將叢生芽接到壯苗培養(yǎng)基：1/2MS+6BA +NAA + 椰汁100 g/L+AC g/L，%， g/L，pH 。將大約3 cm長且生長健壯的無根苗切割成單個苗接入生根培養(yǎng)基：1/2MS+IBA + 香蕉汁100 g/L，%， g/L，pH ，20 d 時開始生根，30d 時幼苗生根率達95%。根數(shù)可達3~4 條，根長2~ 3 cm，根系粗壯。 煉苗與移栽 移栽時特別注意要提前將瓶蓋打開，讓組培苗適應(yīng)一下外界的環(huán)境。2 d 后再將小苗取出，洗凈根部瓊脂，栽入濕潤但擰不出水的水苔中，不需蓋膜保濕，保持環(huán)境溫度20~25℃即可，成活率可達90%。待新根長出后再澆水。 ④春石斛離體培養(yǎng) 材料為春石斛，取春石斛的側(cè)芽， 剝離老葉和根， 流水沖洗2 h， 沿莖縱軸剝離葉片，切成0. 5 cm 長的莖尖和莖段。無菌苗的培養(yǎng)：莖尖和莖段經(jīng)HgCl2 表面消毒6 m in，生理年齡較老的表面消毒8 m in，20 d 后，外植體成活率80％。將1—2 mm 長的莖尖接種于莖尖誘導(dǎo)不定芽培養(yǎng)基上：1／2 M S＋1. 0 mg／L BA + 0. 5 mg／L NAA＋椰乳6 % ＋食用糖30 g／L , 瓊脂8. 0 g／L , pH 5. 2, 溫度25177。1 ℃, 光強1 600 lx, 每天光照16 h，誘導(dǎo)出不定芽。不定芽增殖壯苗：將3—5 株苗為一叢, 接種于M S＋0. 2mg／LNAA＋1. 5mg／L BA ＋ 0. 5mg／LGA 3或以M S+ 3 mg/L 亞精胺，1 個月后增殖率大于 10 — 3 cm 時, 接種到1／2 M S+ 0. 2 mg／L IBA生根培養(yǎng)基中， 20 d 后, 全部苗能長出5— 8 條3— 4cm 長的粗壯根, 可供移栽。應(yīng)根據(jù)苗的具體狀況，在小苗長根生長前一個階段, 叢生芽應(yīng)放在M S+ 3 mg/L 亞精胺培養(yǎng)基中生長一個階段,當(dāng)苗長2— 3 cm 時, 接種到1/2 M S + 0. 2 mg/LIBA 長根培養(yǎng)基中. 20 d 后, 全部苗能長出5— 8 條3—4 cm 長的粗壯根, 可供移栽.6 / 6
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