菊花的組織培養(yǎng)(1)-資料下載頁(yè)
2025-05-02 13:33本頁(yè)面
【正文】 20ml， 濃度為 1mg/ml， 再放置冰箱內(nèi)貯存?zhèn)溆?。 細(xì)胞分裂素 如激動(dòng)素 (Kt)、 6芐基嘌呤 (6BA)。 準(zhǔn)確稱取20mg， 先用 2ml的 1mol/ml HCL或 NaOH溶解 ， 然后加水 ， 定容至 20ml， 濃度為 1mg/ml， 再放置冰箱內(nèi)貯存?zhèn)溆?。 五、操作步驟 培養(yǎng)基配制 (I)— 母液配制 ： 取 1000ml燒杯一只 ， 加大量元素 10倍母液100ml， 微量元素 100倍母液 10ml， 鐵鹽 100倍母液 10ml,有機(jī)物質(zhì) 100倍母液 10ml。 此外 ,根據(jù)培養(yǎng)材料和實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪€要附加一定量的生長(zhǎng)素 ,細(xì)胞分裂素及蔗糖等 ,然后加水至 1000ml,待蔗糖充分溶解后用 1mol/L 的 NaOH或 HCl調(diào)酸堿度為 ,最后加入瓊脂粉 ,如用瓊脂條 ,則要加 8g。 五、操作步驟 培養(yǎng)基配制 (II)— 配制與分裝 ： 將盛有培養(yǎng)基的燒杯在電磁爐上 ， 煮至瓊脂完全融化 ， 補(bǔ)加蒸餾水至 1000ml。 將配制好的培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)用三角瓶中 ， 每只 100ml三角瓶約裝 40ml培養(yǎng)基 。 分裝時(shí)要避免把培養(yǎng)基倒在瓶口上 ， 否則培養(yǎng)時(shí)容易引起雜菌污染 。 五、操作步驟 培養(yǎng)基配制 (II)— 配制與分裝 ： 把裝好的培養(yǎng)基的三角瓶放入高壓滅菌鍋中 ，蓋好鍋蓋 。 設(shè)置滅菌參數(shù)為 121℃ ， 20min， 開(kāi)始滅菌 。 五、操作步驟 培養(yǎng)基配制 (III)— 滅菌 ： 取新鮮胡蘿卜莖 ， 用去離子水洗凈 。 在胡蘿卜莖上切一塊含有形成層的組織 ， 放入磨口三角瓶中 ， 倒入適量 10%亞硫酸溶液 ， 輕輕搖動(dòng) 1530s。 倒去亞硫酸溶液 ， 無(wú)菌水洗滌 34次 ， 徹底清除殘留葉面和瓶?jī)?nèi)的亞硫酸溶液 五、操作步驟 胡蘿卜的取材與處理 先用肥皂洗手 ， 穿上工作服 ， 戴上口罩和工作帽 。 放入培養(yǎng)瓶和滅菌后的接種用具 (鑷子 、 解剖刀、 接種針 )， 把鑷子 、 解剖刀 、 接種針插入內(nèi)盛70%酒精的廣口瓶中 。 用鑷子把胡蘿卜夾入培養(yǎng)皿內(nèi)的吸水紙上 ， 吸干水珠 ， 把胡蘿卜切成含有 “ 木質(zhì)部 ” 、 “ 形成層” 和 “ 韌皮部 ” 三部分的小塊 。 五、操作步驟 接種 小心打開(kāi)三角瓶 ， 把組織塊投入瓶?jī)?nèi) ， 用接種針撥勻 ， 蓋上封口膜 。 用記號(hào)筆在瓶壁上寫明 培養(yǎng)材料 、 培養(yǎng)基代號(hào)、 接種日期 。 五、操作步驟 接種 注意事項(xiàng) 全部接種操作都是在無(wú)菌條件下進(jìn)行的 ， 所以要特別認(rèn)真仔細(xì) ， 以防雜菌污染 。 接種完畢后 ， 取出培養(yǎng)瓶中 ， 置于 26~28℃ 光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 。 觀察記錄生長(zhǎng)情況 ， 并照相存檔 。 五、操作步驟 培養(yǎng) 植物組織培養(yǎng)技術(shù)有哪些實(shí)際用途 ？ 植物激素與器官分化有何關(guān)系 ？ 怎樣理解在中藥提取活性成分時(shí)要把握好藥材的采收時(shí)間 ？ 為保證無(wú)菌 ， 操作時(shí)有哪些注意事項(xiàng) ？ 六、思考題 結(jié)束
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