【正文】 性物質(zhì)長期得不到啟用，會鈍化或喪失活力。通過更換培養(yǎng)基，特別是天然營養(yǎng)物質(zhì)的更換能改變碳、氮、礦質(zhì)元素成分，恢復(fù)菌絲活力。（三）有孔膠塞封藏 棉塞封口培養(yǎng)基易失水干縮；而用無孔膠塞封口造成缺氧，菌絲會因缺氧而死亡或發(fā)生生理反應(yīng)(菌絲或基質(zhì)產(chǎn)生色素)。如在膠塞上鉆孔，再用棉花封孔口來協(xié)調(diào)保水與通氣的矛盾，菌種貯藏9～12個月后仍能成活80%以上。（四）自然基質(zhì)保藏 Lambert(1959)發(fā)現(xiàn)，如果母種保存在燕麥或瓊脂培養(yǎng)基上，而不是保存于堆料中，則容易出現(xiàn)絨毛狀菌絲。Stoller(1962)觀察到，如果在小米培養(yǎng)基中加入石膏，就可抑止絨毛狀菌絲和扇變角菌落的出現(xiàn)。如果在培養(yǎng)基中含有大量的淀粉則可誘導(dǎo)絨毛狀菌絲和扇變角菌落的出現(xiàn)。Fritsche(1968)認(rèn)為，多種瓊脂培養(yǎng)基如燕麥粉瓊脂能誘導(dǎo)絨毛狀菌絲的形成，而堆料＋瓊脂培養(yǎng)基則不會誘導(dǎo)絨毛狀菌絲的形成。在英國，谷粒菌種常常形成絨毛狀菌絲和扇變角菌落；而糞肥菌種則不會形成絨毛狀菌絲和扇狀變異菌落。另外，多種化合物，主要是芳香族化合物也誘導(dǎo)絨毛狀菌絲和扇狀變異菌落的形成。Fritsche(1968)指出，兩個單孢子培養(yǎng)物由索狀菌絲變?yōu)榻q毛狀菌絲，這些菌絲在菇床表面形成致密的白色斑點(diǎn)，因而產(chǎn)量下降。Fritsche(1981)報道了另一種蓬松的絨毛狀菌絲，在瓊脂培養(yǎng)基中呈現(xiàn)扇形濃密菌絲，這種菌絲的大量出現(xiàn)將會影響產(chǎn)量。在培養(yǎng)皿中合適的營養(yǎng)培養(yǎng)基上觀察菌絲的生長特性雖能夠反映菌種的退化，但有些重要的退化特征用這種方法是難以識別的。營養(yǎng)生長正常并不意味著該菌種沒有發(fā)生退化。根據(jù)蘑菇的特性，利用自然基質(zhì)保藏其菌種的方法。草腐菌采用以糞草為主料的培養(yǎng)基。自然基質(zhì)營養(yǎng)全面，且大部為緩釋養(yǎng)分，不易產(chǎn)生營養(yǎng)過剩或饑餓；其次，培養(yǎng)基理化性狀好，可吸收或緩沖菌絲代謝出的有害物質(zhì)，水分與通氣協(xié)調(diào)平衡，部分菌絲扎入基質(zhì)內(nèi)生長，不裸露于空氣中，菌絲呼吸強(qiáng)度低，生命力強(qiáng)。（五）石蠟隔氧封藏 將液態(tài)石蠟分裝入三角瓶內(nèi)，裝量達(dá)瓶空間的l/3，塞好棉塞，于121℃滅菌2小時，然后置40℃溫箱中，使其水分蒸發(fā)，或置于干燥器內(nèi)數(shù)日以除去水分，石蠟呈透明狀為宜。在無菌條件下，用無菌吸管裝入已長好菌絲的斜面試管，使液面高出斜面頂部1厘米左右。塞上無菌橡皮塞，豎直保存。此法可使菌種存活3年以上，但以12年移植一次為好。移植時不必倒出石蠟，用接種鉤取一塊菌絲即可。因轉(zhuǎn)移時帶有石蠟，菌絲生長弱，需要再轉(zhuǎn)管1～2次，方能復(fù)壯。第三節(jié) 制種設(shè)施及設(shè)備菌種生產(chǎn)是蘑菇生產(chǎn)的重要環(huán)節(jié)，所需設(shè)施如下：一、接種設(shè)施設(shè)備（一）接種室 接種室為高度潔凈的無菌區(qū)，一般長寬各2米左右。墻頂裝紫外線燈和日光燈各1盞。地面光潔有下水道，墻壁用防水涂料或油漆刷白，便于沖洗消毒。接種室外間為緩沖室，其長度與接種室相同，寬1米。緩沖室墻頂也裝紫外線燈和日光燈各l盞，壁上有掛衣架。接種室和緩沖室的門均應(yīng)為推拉門結(jié)構(gòu)（圖46）。圖46 接種室；；；；；；；紫外線燈用于空氣消毒，既干凈又無污染，是一種很好的消毒方法，因而長期被廣泛地采用。紫外線燈管以懸吊在頂棚下為宜。℃。在潮濕情況下，效果降低。紫外線燈一般在最初使用的100小時中很快降低功率，故需在使用100小時后測定其強(qiáng)度(用紫外線光度計測)。如功率下降為原有功率的70%時，就認(rèn)為失效了，應(yīng)當(dāng)即時更換。若不即時更換，不但沒有殺菌效力，這個能量還會有利于細(xì)菌生長。紫外線燈管的維護(hù)極為重要，至少2～4周，甚至每周清潔一次?？捎酶蓛糗洸蓟蚓凭珴櫇襁^的棉花輕輕擦，要避免在玻璃上產(chǎn)生痕跡，禁止用有油或有臘的布擦，裝卸燈管要避兔用手直接接觸燈管表面，以防燈管發(fā)生失透現(xiàn)象。在使用中，操作人員的眼睛和皮膚切不可直接暴露在紫外線燈光照射下，以防受傷害。接種室單獨(dú)使用紫外線照射，而不同時進(jìn)行無菌通風(fēng)，是不能達(dá)到無菌要求的，其原因是: 紫外線雖有很強(qiáng)的表面殺菌效果，但有效輻射面積有限，即使在應(yīng)用合理的情況下，也不能殺死空氣中全部細(xì)菌。因此還需要配合使用化學(xué)滅菌及空氣過濾，來濾除未被殺死的細(xì)菌。 細(xì)菌多數(shù)依附在灰塵上，而紫外線穿透力較弱，對灰塵上的(特別是較大顆粒)細(xì)菌，滅活效果并不徹底，而無菌通風(fēng)是移除灰塵必不可少的措施。 接種室為密閉房間，不能自然通風(fēng)，如果不采用人工通風(fēng)，則由于人汗及料瓶（袋）水份的蒸發(fā)增加了室內(nèi)溫度和濕度，致使細(xì)菌和霉菌繁殖，且不利于操作人員的身體健康。條件允許時，應(yīng)安裝空氣過濾裝置，以濾除雜菌灰塵。無菌通風(fēng)設(shè)備一般是由離心鼓風(fēng)機(jī)、裝有濾板的風(fēng)箱和風(fēng)道組成。理想的通風(fēng)設(shè)備應(yīng)有加熱或和冷卻空氣的裝置。無菌空氣應(yīng)自室頂棚中央進(jìn)入，而由房間的下角風(fēng)口排出，排風(fēng)的方向應(yīng)先經(jīng)過緩沖間，再經(jīng)過更衣室。標(biāo)準(zhǔn)接種室的氣壓應(yīng)保持正壓，～，這樣就防止了外界不潔空氣的反流?？傊臃N室的空氣處理，既不能單靠通風(fēng)，也不能單靠紫外線照射，必須二者結(jié)合起來才能達(dá)到室內(nèi)空氣凈化的目的。接種室內(nèi)也可設(shè)置超凈工作臺（圖47），利用其過濾除菌的原理，先將空氣過濾到無菌，然后將無菌空氣從風(fēng)洞處朝一個方向吹出，使工作臺面成為局部無菌狀態(tài)。圖47 超凈工作臺，因它們不能獨(dú)立存在，都寄附于塵埃上而成為一個群體，故高效空氣過濾器（High Efficiency Particulare Air)）在除塵時除了菌。接種室或超凈工作臺的潔凈效果如何，可用簡便方法檢驗(yàn)：在接種工作臺上，以平均間隔位置擺放平皿3個,每個皿內(nèi)裝營養(yǎng)豐富并經(jīng)滅菌的牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基約20毫升。打開皿蓋暴露培養(yǎng)基30分鐘再蓋上，于37℃培養(yǎng)48小時檢查菌落數(shù)，平均每個皿中不超過4個為除菌合格。潔凈度基本達(dá)到100級（國際標(biāo)準(zhǔn)：空氣中≥≤，即達(dá)到100級）。（二）連續(xù)式空氣消毒潔凈器 MKJ空氣消毒潔凈器是一種新型的空氣消毒潔凈設(shè)備（圖版50）。與傳統(tǒng)的空氣消毒設(shè)備比較，MKJ空氣消毒潔凈器能在有人現(xiàn)場操作的過程中除菌除塵，對人體無害，室內(nèi)空氣可達(dá)到10萬級～100萬級潔凈度，因而特別適合接種室進(jìn)行動態(tài)消毒除塵。1．消毒除塵原理與特點(diǎn) 傳統(tǒng)的紫外線、臭氧、化學(xué)藥物等消毒方法都不能在有人狀態(tài)下持續(xù)消毒。實(shí)驗(yàn)證明，經(jīng)過以上方法消毒的接種室，在接種過程中由于人的活動，空氣中的菌類總數(shù)會達(dá)到消毒剛結(jié)束時的9倍多。也有實(shí)驗(yàn)證明，上述消毒方法消毒過的接種室2小時后空氣中菌類含量會回升到消毒處理以前的狀態(tài)。此外，傳統(tǒng)的空氣消毒方法無法在有人活動的條件下持續(xù)消毒。MKJ空氣消毒潔凈器的核心是一種特殊設(shè)計的正離子發(fā)生器，它能持續(xù)不斷地產(chǎn)生高濃度的正離子?？諝庵械木愄幱谡x子的包圍之中，使細(xì)胞迅速獲得飽和電量。帶負(fù)電的菌類細(xì)胞在高濃度、高能量的正離子浸潤作用下，會迅速發(fā)生電解過程，這是一個能量釋放過程。由于快速的能量釋放，菌類細(xì)胞壁遭受嚴(yán)重的破壞，正離子與菌細(xì)胞表面接觸，放出電荷，吸收相反的電荷。足夠的正離子會穿透多孔的細(xì)胞壁，滲透到細(xì)胞內(nèi)部，破壞細(xì)胞電解質(zhì)，損壞細(xì)胞膜，電刺激作用殺死生物的應(yīng)用例子很多，但要截殺微米級及亞微米級的細(xì)菌或直徑更小的病毒，則需要很好的專業(yè)設(shè)計。工業(yè)靜電除塵器具有100多年的應(yīng)用歷史。本世紀(jì)80年代，日本JEP公司曾經(jīng)根據(jù)工業(yè)電除塵器的原理開發(fā)研制過電子滅菌器。其發(fā)表的報告表明，靜電除塵器用以空氣除菌可以達(dá)到100%的效率。上海交通大學(xué)與上海今是凈化技術(shù)有限公司合作，采用特種電除塵器的電場結(jié)構(gòu)型式研究靜電除菌消毒技術(shù)，并與空氣動力、化學(xué)吸附等多種技術(shù)結(jié)合，研制成可以移動的空氣消毒器。2．接種室空氣潔凈的必要性 塵粒不僅是菌類的依存條件，也是菌類的繁殖條件，并且塵粒還起傳播、擴(kuò)散菌類的作用。實(shí)踐證明，接種室僅僅通過消毒方法來防止雜菌污染是消極的。只有有效地拉制空氣中的可吸入顆粒物，才能達(dá)到消毒的較高要求。例如10萬級的潔凈室標(biāo)準(zhǔn)為：生物粒子≤㎡，塵埃粒子≤3500個/L。3．層 3．傳統(tǒng)潔凈設(shè)備的局限性 高效空氣過濾器（HEPA），雖然可以在有人操作的場合持續(xù)除菌除塵，但其結(jié)構(gòu)復(fù)雜、體積大、費(fèi)用高（雙人工作臺價格約7000元）。而且，被高效過濾器截獲的菌類并沒有被殺滅，在溫、濕度適宜的環(huán)境中仍會繁衍。有人采用紫外線燈對過濾材料照射的方法來殺滅濾網(wǎng)上的菌類，這樣設(shè)備就更顯復(fù)雜，成本更高。建筑式層流潔凈設(shè)備需要有較高的建筑要求，還需要有較高的專業(yè)施工與維護(hù)的要求，由于建筑、施工、維護(hù)達(dá)不到要求而造成層流設(shè)備失效的實(shí)例很多。4．MKJ空氣消毒潔凈器的特點(diǎn) （1）無毒副作用 能在有人的場所持續(xù)除菌除塵，對人體無毒、副作用。（2）廣譜截殺空氣中菌類 該產(chǎn)品對空氣中的氣溶膠微生物都可以有同樣的截殺功能。實(shí)驗(yàn)測試報告證明，該產(chǎn)品工作10分鐘，%；工作15分鐘，%。對60立方米空間消毒30分鐘，細(xì)菌總數(shù)可以從180OCFU/㎡下降1CFU/㎡以下。（4）高效去除可吸入顆粒物 能高效去除空氣中的可吸入顆粒物，達(dá)到l～10萬級潔凈度。（5）移動方便 為非建筑型設(shè)計，因而價格便宜（30004000元/臺），移動方便。（6）能消除空氣中有害氣體與異味 由于組合式靜電場裝置的阻力小，因此在設(shè)備內(nèi)可以設(shè)置較大吸附容量的活性炭過濾器。活性炭采用特殊的化學(xué)浸漬工藝，能有效去除空氣中的一氧化碳、苯類、甲醛、氨、臭氧等有害氣體，并能濾除各種異味，例如麻醉劑味、血腥味、藥物味及用高頻電刀手術(shù)時產(chǎn)生的異味。（三）接種箱 在資金與場地條件都不充裕的情況下，可用接種箱因陋就簡進(jìn)行接種。接種箱(圖48)的頂部兩側(cè)呈傾斜狀，斜面為可開閉的窗門，窗門與箱框需密閉。箱底部兩側(cè)箱壁上各有兩孔，孔上裝袖套，接種時手由袖套伸入箱內(nèi)操作。箱內(nèi)有紫外線燈和日光燈。圖48 雙人接種箱 (單位:厘米)（四）培養(yǎng)室 接種后的種瓶需要在適溫條件下培養(yǎng)。為提高建筑面積的利用率,室內(nèi)可設(shè)置菌種架。架數(shù)、層次、層距等的設(shè)計除考慮培養(yǎng)空間的利用率外,還應(yīng)顧及擺放種瓶及檢查的方便性。床架可以是竹木結(jié)構(gòu)，也可以用角鋼制作。架上鋪以木板或塑料板，以便擺放菌種瓶。架子的大小規(guī)格，依房間大小而定。中間擺放的床架，～。依墻擺放的床架，～。床架的層數(shù)視菇房高度而定,一般5～6層，,頂層距屋頂至少1米。這里特別強(qiáng)調(diào)，蘑菇菌種的培養(yǎng)溫度不能超過25℃。否則菌絲容易老化變黃。因此，培養(yǎng)室必須安裝空調(diào)設(shè)備，這也是蘑菇菌種生產(chǎn)成本較高的原因。蘑菇菌種最好避光培養(yǎng)，檢查時采用手持式照明燈較為方便。二、滅菌設(shè)備 年生產(chǎn)能力20～50萬瓶菌種，加工300～500噸鹽漬菇的蘑菇生產(chǎn)廠，必須安裝1～2噸的高壓蒸氣鍋爐。需要指出，蘑菇菌種的生產(chǎn)時間一般處于7～8月份高溫高濕季節(jié)，因而要求采用高壓高溫滅菌設(shè)備。如果采用常壓常溫的蒸鍋滅菌，則因霉菌孢子或芽孢桿菌不易殺滅而導(dǎo)致麥粒染菌酸敗，菌種成品率很低。高壓高溫（～2㎏/㎡，125℃以上）滅菌罐，其價格在2～10萬元之間，價格高低取決于容積大小與建造水平。不同型號的高壓滅菌設(shè)備及其適用范圍參見表42。表42 高壓滅菌設(shè)備及其有關(guān)數(shù)據(jù)設(shè) 備 參考價 消耗能源 用 途 生 產(chǎn) 效 率手提高壓滅菌器 800元 2千瓦/小時 母種制備 100支/2小時臥式圓形滅菌罐 2萬元 高壓鍋爐 制栽培種 1200瓶/4小時臥式方形滅菌柜 6萬元 高壓鍋爐 制栽培種 800瓶/4小時利用高壓蒸氣設(shè)備滅菌時，應(yīng)注意兩點(diǎn)：一是滅菌罐內(nèi)的菌種瓶排列密度須適當(dāng)，使蒸汽暢通，無死角。二是滅菌罐內(nèi)冷空氣必須排盡，通蒸汽后。打開排氣閥，隨著罐內(nèi)溫度上升。鍋內(nèi)冷空氣便逐漸排出。當(dāng)有大量蒸汽從排氣閥中排出時，再關(guān)閉排氣閥。滅菌結(jié)束后，讓其自然冷卻。當(dāng)壓力指針回到0位時，打開罐蓋1/4開度，利用余熱烘烤棉塞，防止驟冷產(chǎn)生冷凝水。然后趁熱取出，送入清潔的冷卻室進(jìn)行冷卻。第五章 蘑菇堆肥配方與發(fā)酵第一節(jié) 原料與配方一、堆肥主料 蘑菇堆肥所用的主料是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的副產(chǎn)物，如稻草、麥秸、玉米秸、高梁秸、甘薯藤，花生藤等秸稈都可以用來種蘑菇。人、馬、牛、豬、羊、雞、鴨、兔等糞便，都是蘑菇堆肥可選用的糞肥。此外，畜棚禽舍內(nèi)的墊草(廄肥)，沼氣渣以及種過草菇、平菇等食用菌的下腳料也可以作為堆料時的主料。主料約占堆肥總量的90～95％。不論采用那一種原料作為基本材料，都必需充分考慮其保水性和通氣性是否合適，僅以營養(yǎng)合適為指標(biāo)是不行的。例如，玉米秸稈的含糖量雖然高于麥秸，但是用其為主料的堆肥粘重，透氣性差，不利于發(fā)菌，產(chǎn)菇率亦低。（一）草料 蘑菇菌絲不能固定空氣中的二氧化（CO2），因而堆肥中的草料是蘑菇生長所需碳素的主要來源。除氮素外，草料中還含有氮、磷、鉀等營養(yǎng)元素。以麥秸為例，1畝小麥約產(chǎn)麥秸400千克，（相當(dāng)于碳銨12千克），（）。在我國，產(chǎn)稻區(qū)以稻草為堆肥主料，稻草莖稈軟，葉片多，易吸水，腐熟快；產(chǎn)麥區(qū)以麥秸為堆肥主料，麥秸較硬且含有蠟質(zhì)，不易吸水，發(fā)酵較慢；將麥秸與玉米秸搭配利用，可揚(yáng)長避短，互補(bǔ)不足，從而提高堆肥的發(fā)酵質(zhì)量。干玉米秸應(yīng)無霉變，將其鍘成20～30厘米長的段并經(jīng)碾壓，便于吸水發(fā)酵。當(dāng)年產(chǎn)的鮮玉米秸含水過大，須晾曬幾天，含水量降到70%時再用于堆肥。軟爛霉變的草料不能用。麥秸在收割之后，必須于烈日下曝曬數(shù)天，以速曬速干的麥秸質(zhì)量最好。若在曝曬時遭雨淋，應(yīng)及時翻曬，力求干透。優(yōu)質(zhì)的麥秸要呈金黃色，質(zhì)地堅挺，無霉臭味。這種麥秸堆制發(fā)酵時，產(chǎn)熱量大，養(yǎng)分損失小。麥秸雨淋發(fā)熱后再攤開曬干，質(zhì)量就差多了。曬干的麥秸最好貯放在能避雨的通風(fēng)良好的場棚內(nèi)。保管不當(dāng)或水份過高的草料，在貯藏期容易發(fā)熱霉變而草莖變軟，以后堆肥時產(chǎn)熱量小，易造成厭氣發(fā)酵，不可能得到優(yōu)質(zhì)堆肥。（二）畜禽糞 蘑菇堆料所用畜禽糞需周年收集，鮮牛糞含水75%左右，通常400～420千克濕牛糞，才能曬出100千克干糞。較大的糞塊如不曬透，貯藏時會發(fā)熱霉變，對以后的堆肥發(fā)酵有不利影響。也可采用濕糞貯藏法，事先選好高地挖出糞塘，將隨時收集的濕糞倒入糞塘內(nèi)，用薄膜覆蓋好以防雨淋。畜禽糞的營養(yǎng)成分和理化特性介紹如下：1．馬糞 性熱、質(zhì)松，保水性強(qiáng)，發(fā)酵效果好，碳氮比為21:1，是最理想的糞肥。但馬糞含氮量比牛、豬糞低，%，使用時增加些餅肥或含氮化肥以提高其營養(yǎng)成分。2．牛糞 牛是反自動物，飼料消化徹底，特別是食用青草的耕牛及牧牛，其糞養(yǎng)分不高。1頭成年牛的全年糞便，大約可栽培50平