廣大土壤中分離芽胞桿菌副本-資料下載頁(yè)
2025-06-26 20:59本頁(yè)面
【正文】 甲基紅2d)，震蕩，若培養(yǎng)液呈紅色，記為陽(yáng)性（+）反應(yīng)，若不呈紅色，記為陰性（）。吲哚試驗(yàn)取蛋白胨水培養(yǎng)基，接種，37176。C培養(yǎng)兩天；取出試管，在培養(yǎng)基中加入乙醚12ml，經(jīng)充分震蕩使吲哚萃取至乙醚中，靜置片刻后乙醚層浮于培養(yǎng)液上面，此時(shí)沿管壁緩慢加入510滴吲哚試劑，如有吲哚存在，乙醚層呈現(xiàn)玫瑰紅色，為吲哚試驗(yàn)陽(yáng)性（+），否則為陰性（）。檸檬酸鹽利用試驗(yàn)取裝有西蒙斯氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基斜面的試管，分別將少量菌苔接種于各支相應(yīng)的管中，然后置于37176。C恒溫箱中培養(yǎng)24h。觀察結(jié)果，若培養(yǎng)基變藍(lán)色，則表明該菌能利用檸檬酸鹽作為碳源而生長(zhǎng)，即為陽(yáng)性（+），若培養(yǎng)基無變色，則為陰性（）。耐鹽性試驗(yàn)將分離獲得的細(xì)菌分別接種在NaCl濃度為2%，5%，7%，10%，的牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中，置于37176。C下培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況，并做記錄。硝酸鹽還原試驗(yàn)被檢菌接種于硝酸鹽培養(yǎng)基中，置于35176。C中培養(yǎng)14天，將甲、乙液等量混合后（）加入培養(yǎng)基內(nèi)，立即觀察結(jié)果，若出現(xiàn)紅色為陽(yáng)性。明膠液化試驗(yàn)穿刺接種，深度至明膠層2/3處，于37176。C恒溫箱培養(yǎng)24h；取出后靜置于冰箱中，待其凝固后，再觀察其是否被細(xì)菌液化，如果被液化，則為陽(yáng)性，能產(chǎn)生蛋白酶。運(yùn)動(dòng)性試驗(yàn)使用半固體營(yíng)養(yǎng)瓊脂試管，沿原穿刺線拔出接種針。置于37176。C溫箱中培養(yǎng)24h；觀察是否產(chǎn)生樹根狀生長(zhǎng)，若有，則菌株有鞭毛，若直立生長(zhǎng)，則菌株無鞭毛。 酪素水解試驗(yàn)（酪蛋白水解）將菌種點(diǎn)接在平板上，每皿可點(diǎn)35株菌。37176。C培養(yǎng)，記錄菌落周圍和下面酪素是否已經(jīng)被溶解而呈現(xiàn)透明。酪氨酸水解試驗(yàn)將營(yíng)養(yǎng)瓊脂融化，冷卻至溫?zé)?，與L酪酸銨混勻，分別將菌種點(diǎn)接在平板上，37176。C培養(yǎng)24h；記錄菌落周圍是否由透明圈，若有則證明該菌株能夠分解酪氨酸。淀粉水解實(shí)驗(yàn)用1824h的純培養(yǎng)物，涂布接種與淀粉瓊脂平板（一個(gè)平板可分區(qū)劃“+”字接種），于37℃培養(yǎng)2448h。然后將碘試劑完全浸于培養(yǎng)基表面。立即檢視結(jié)果，陽(yáng)性（淀粉被分解）為瓊脂培養(yǎng)基呈藍(lán)色、菌落或菌苔周圍出現(xiàn)無色透明環(huán)。陰性反應(yīng)則無透明環(huán)。%溶菌酶實(shí)驗(yàn)將菌種接種于液體培養(yǎng)基（含杜氏小管）中，37℃培養(yǎng)24h；加入適量H2O2，震蕩，觀察杜氏小管內(nèi)是否有氣泡產(chǎn)生，若有則表明菌體產(chǎn)生了H2O2酶。卵黃反應(yīng)試驗(yàn)取1224h的斜面或培養(yǎng)液中的菌體點(diǎn)種在平板上，點(diǎn)的直徑約為23cm，每個(gè)平板可分散點(diǎn)23株菌，以不影響觀察為宜，適溫培養(yǎng)1824h。觀察如菌落四周和下面有不透明區(qū)域出現(xiàn)，則表示卵磷脂分解生成脂肪，說明有卵磷脂酶。用1824h的菌體接種于液體培養(yǎng)基中，37℃培養(yǎng)24h。 根據(jù)從伯杰氏細(xì)菌手冊(cè)芽孢桿菌屬中檢索到的芽孢桿菌的生理生化特點(diǎn)，選擇能從土壤中分離到的芽孢桿菌種為標(biāo)準(zhǔn)菌種，其生理生化指標(biāo)如下表：通過對(duì)目的軍中國(guó)進(jìn)行多項(xiàng)生理生化實(shí)驗(yàn)，對(duì)比伯杰氏細(xì)菌手冊(cè)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，從而鑒定出目的菌的種別； 結(jié)果與分析六、討論七、參考文
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