分子生物學(xué)復(fù)習(xí)題答案匯總-資料下載頁
2025-06-26 11:39本頁面
【正文】 體而發(fā)揮作用。受體：是位于細(xì)胞膜或細(xì)胞內(nèi)能夠特意識(shí)別并結(jié)合配體的蛋白質(zhì)。配體：是指與受體特異結(jié)合的各種信息分子。如神經(jīng)遞質(zhì)、神經(jīng)肽、激素、細(xì)胞因子等?！诙攀梗涸S多化學(xué)信號(hào)（第一信使）與細(xì)胞膜受體結(jié)合，觸發(fā)細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生小分子物質(zhì)，包括cAMP、cGMP、DAG、IPCa2+等，這些物質(zhì)稱為第二信使。第三信使：負(fù)責(zé)細(xì)胞核內(nèi)外信息傳遞的物質(zhì)稱為第三信使。鈣調(diào)蛋白：鈣調(diào)蛋白是真核生物細(xì)胞中的胞質(zhì)溶膠蛋白，由148個(gè)氨基酸組成單條多肽,。問答題▲試述腎上腺素與受體結(jié)合后調(diào)節(jié)糖原代謝的信息傳遞過程。（下圖所占篇幅較大，請(qǐng)自行參考簡(jiǎn)化）腎上腺素+βAR↓腎上腺素βAR ↓無活性GS→有活性GS ↓無活性的AC→有活性的AC ↓ATP→cAMP→5’AMP ↓無活性PKA→有活性PKA ↙ ↘ ↙ ↘ ↙ ↘無活性磷酸→有活性磷酸 有活性糖→無活性糖化酶b激酶 化酶b激酶 原合酶2 原合酶D ↙ ↓ ↙ ↓ ↙ ↓ 無活性糖原→有活性糖原 ↓ 磷酸化酶b 磷酸化酶b ↓ ↙ ↓ 糖原→葡萄糖1磷酸 ↓ ↓ ↓ 糖原分解加強(qiáng) 糖原合成抑制 └─────────┘ ↓ 血糖升高受體與激素、細(xì)胞因子的結(jié)合特征是什么？高度特異性②高度親和力③可逆性④可飽和性⑤受體與激素、細(xì)胞因子的結(jié)合量與配體的生物學(xué)效應(yīng)呈正比關(guān)系▲簡(jiǎn)述cAMP蛋白激酶A途徑?；瘜W(xué)信號(hào)→GPCR→Gs→AC→cAMP→PKA→關(guān)鍵酶/功能蛋白→細(xì)胞效應(yīng)細(xì)胞內(nèi)Ca2+是如何作為第二信使起作用的？Ca2+與細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)內(nèi)游離的PKC結(jié)合，引導(dǎo)其向細(xì)胞膜胞質(zhì)面轉(zhuǎn)運(yùn)，并與細(xì)胞膜內(nèi)層脂上的DAG結(jié)合，徹底激活PKC。Ca2+還與細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)內(nèi)的鈣調(diào)蛋白（CaM）結(jié)合形成復(fù)合物，激活另一種蛋白絲氨酸/蘇氨酸激酶——鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶。▲那些物質(zhì)是第二信使？通常將Ca2+、DAG、IPCer、cAMP、cGMP等這類在細(xì)胞內(nèi)傳遞信息的小分子化合物稱為第二信使?！鴆AMP的生成與分解分別是有何種酶催化？生成cAMP的底物是什么？cAMP分解的產(chǎn)物是什么？ATP經(jīng)腺苷酸環(huán)化酶催化合成cAMP，由磷酸二酯酶分解cAMP生成5’AMP說明G蛋白有幾種類型，是如何調(diào)控細(xì)胞膜上腺苷酸環(huán)化酶的活性的？G蛋白的類型 功能Gs 激活腺苷酸環(huán)化酶Gi 抑制腺苷酸環(huán)化酶Gp/Gq 激活磷脂酰肌醇的特異磷脂酶CGo 大腦中主要的G蛋白，可調(diào)節(jié)離子通道GT 激活視覺核酸的提取與鑒定名詞解釋▲質(zhì)粒：是游離于細(xì)菌染色體之外的遺傳單位，是一種雙鏈的共價(jià)閉合環(huán)的DNA分子，其大小在1kb至200kb不等?！娪荆簬щ婎w粒在電場(chǎng)中將向與自身電荷相反的電極移動(dòng)，從而達(dá)到分離的方法。問答題（1）提取真核生物基因組DNA的注意事項(xiàng)是什么？答：176。C冰箱，以免DNaes降解DNA。，使用中反復(fù)凍融。 ，造成DNA分子斷裂。 ，且用粗口滴管和吸管。 ?！?）如何判斷DNA和RNA樣品的純度？如不純應(yīng)怎樣處理？答：可以用紫外分光光度法進(jìn)行判斷。⑴ DNA純度：OD260/OD280≈，表示為純的DNA； OD260/OD280 ＞，表示有RNA污染； OD260/OD280 ＜，表示有蛋白質(zhì)、酚等污染。⑵ RNA純度： ＜OD260/OD280＜，表示為純的RNA； OD260/OD280 ＜，表示有蛋白質(zhì)或酚污染； OD260/OD280 ＞，表示可能有異硫氰酸殘存。⑶ OD230/，若比值較高說明有殘余的鹽和小分子如核苷酸、氨基酸、酚等的存在。若樣品不純，則比值發(fā)生變化，此時(shí)無法用分光光度法對(duì)核酸進(jìn)行定量。DNA純化方法： DNA用等體積的酚/氯仿抽提一次，重復(fù)此步驟，加入兩倍體積的無水乙醇和1/10體積的3 mol/L乙酸鈉溶液后混勻，零下20攝氏度沉淀30 min后12000 r/min離心10 min，沉淀用75%乙醇洗滌一次，12000 r/min離心5 min，棄上清，沉淀自然干燥后溶于20～ mol/L ,加入1 uL RNase（20 ug/mL），37攝氏度溫育30 min。？▲（3）核酸電泳的支持介質(zhì)主要有哪些?答：瓊脂糖、聚丙烯酰胺（4）簡(jiǎn)述幾種DNA測(cè)序的方法，比較優(yōu)缺點(diǎn)。答：；；。MaxamGilbert法所能測(cè)定的長(zhǎng)度要比Sanger法短一些，它對(duì)放射性標(biāo)記末端 250個(gè)核苷酸以內(nèi)的DNA序列效果最佳。Sanger 法需要單鏈模板和特異寡核苷酸，并需獲得大腸桿菌DNA 聚合酶IKlenow 片段的高質(zhì)量酶制劑，而MaxamGilbert法只需簡(jiǎn)單化學(xué)試劑。隨著M13 噬菌體和噬菌粒載體的發(fā)展，也由于現(xiàn)成的合成引物唾手可得及測(cè)序反應(yīng)日臻完善，雙脫氧鏈終止法如今遠(yuǎn)比MaxamGilbert法應(yīng)用得廣泛?；瘜W(xué)降解較之鏈終止法具有一個(gè)明顯的優(yōu)點(diǎn)：所測(cè)序列來自原DNA 分子而不是酶促合成所產(chǎn)生的拷貝。因此，利用MaxamGilbert法可對(duì)合成的寡核苷酸進(jìn)行測(cè)序，可以分析諸如甲基化等DNA 修飾的情況。由于Sanger法既簡(jiǎn)便又快速，因此是現(xiàn)今的最佳選擇方案。事實(shí)上，目前大多數(shù)測(cè)序策略都是為Sanger法而設(shè)計(jì)的。 原癌基因 是存在于細(xì)胞基因組中的一種正?；?，其功能是抑制細(xì)胞生長(zhǎng)和分化，是病毒基因的同源序列。原癌基因受物理、化學(xué)、微生物等因素的作用，發(fā)生突變或擴(kuò)增，激活成為癌基因，為了區(qū)別于病毒癌基因，原癌基因又稱細(xì)胞癌基因。癌基因 是癌基因色突變體，其編碼產(chǎn)物可以使培養(yǎng)細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)化，或在動(dòng)物體內(nèi)誘發(fā)腫瘤。病毒癌基因 是存在于致癌病毒基因組內(nèi)的基因。抑癌基因 是一類存在于正常細(xì)胞內(nèi)、調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)的基因，具有潛在的抑癌作用。若這類基因發(fā)生突變而失活，可以引起細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化而導(dǎo)致腫瘤發(fā)生。PCR技術(shù)在分子生物學(xué)的應(yīng)用原癌基因、抑癌基因題型及分值：?jiǎn)芜x301分、多選101分、填空20分、判斷10分、名解102分、大題10分（兩道）寧可累死在路上，也不能閑死在家里！寧可去碰壁，也不能面壁。是狼就要練好牙，是羊就要練好腿。什么是奮斗？奮斗就是每天很難，可一年一年卻越來越容易。不奮斗就是每天都很容易，可一年一年越來越難。能干的人，不在情緒上計(jì)較，只在做事上認(rèn)真；無能的人！不在做事上認(rèn)真，只在情緒上計(jì)較。拼一個(gè)春夏秋冬！贏一個(gè)無悔人生！早安！—————獻(xiàn)給所有努力的人.學(xué)習(xí)參考
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