巴西橡膠樹乙烯途徑中抑制因子ein3的western印跡畢業(yè)論文-資料下載頁(yè)
2025-06-26 07:07本頁(yè)面
【正文】 Sample 0h 1h 4h 6h 12h 24h(2)標(biāo)準(zhǔn)曲線（3）樣品蛋白濃度（OD值代入y=+）樣品蛋白濃度(μg/μl)上樣量(μl)0h1h4h6h12h24h三種定蛋白的方法所用到的牛血清蛋白和樣品蛋白是在同一條件下保存的同一試管中取得的，因此其蛋白濃度理論上應(yīng)該是相等的，但是從三種方法的結(jié)果來(lái)看，不同方法所得的結(jié)果有一定的差距。首先，配置的標(biāo)準(zhǔn)濃度的牛血清蛋白液做標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)，Esen method和BCA法測(cè)得的牛血清蛋白相同濃度的OD值接近，而Bradford法把牛血清蛋白稀釋了20倍左右后所得OD值與另外兩種方法相差很大，說明稀釋過程中操作不當(dāng)引起了濃度的誤差。相對(duì)于BCA法而言，Esen method和Bradford法所得樣品的OD值比較接近，且各個(gè)處理的濃度變化差異也相差不大。重復(fù)實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)表明Esen method的重復(fù)性好，兩次實(shí)驗(yàn)得出的蛋白濃度比較接近，而另兩種方法兩次實(shí)驗(yàn)的結(jié)果差異較大，說明Esen method在定植物蛋白濃度時(shí)比BCA法和Bradford法精確。本實(shí)驗(yàn)主要采用的就是Esen method定蛋白濃度，用BCA法和Bradford法可以更好地驗(yàn)證Esen method的精確性，同時(shí)也可大致確定所提取的橡膠葉片蛋白的濃度。通過十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳所得的凝膠染色脫色后與雙色預(yù)染寬分子量蛋白Marker的說明書中的條帶大小進(jìn)行比對(duì)得出橡膠葉片總蛋白的大小介于40kD55kD之間。從顯色的明暗程度來(lái)說，0h、1h、6h、12h的比較明顯，而4h的比較暗，而且24h的觀察不到蛋白的存在。 觀察顯色后的PVDF膜，可以看到在 [1]EP阿姆利,[J].云南熱作科技,1980,04:6068.[2]蔣菊生,[A]..中國(guó)科協(xié)2004年學(xué)術(shù)年會(huì)海南論文集[C].:,2004:5.[3]黃炎,郭慶水,徐立新,[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2008,02:442445+456.[4]祁棟靈,王秀全,張志揚(yáng),[J].熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué),2013,02:7987.[5]潘延云,郭毅,趙軍峰,[J].浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版),2003,04:101108.[6]Reid, M. S. and pratt, H. K. Effects of ethylene on potato tuber respiration. Plant Physiol. 1972, 49: 252255[7]范思偉,[J].熱帶作物研究,1991,03:6977.[8]楊少瓊,[J].熱帶作物研究,1982,04:1113.[9]Chao Q, Rothenberg M, Solano R, et al. Activation of the ethylene gas response pathway in Arabidopsis by the nuclear protein ETHYLENEINSENSITIVE3 and related proteins. Cell, 1997, 89: 1133–1144[10]Yamasaki K, Kigawa T, Inoue M, et al. Solution structure of the major DNAbinding domain of Arabidopsis thaliana ethyleneinsensitive3like3. J Mol Biol, 2005, 348: 253–264[1] Toyama H , Nishibayashi E , Saeki M, et required for thecatalyt ic reaction of PqqC/ D which produces pyrroloquinoline quinine[ J] .Biochem Biophys Res Commun , 2007 , 354(1):290295 .[2]Springer A L , Ramamoorthi R, Lidstrom Marye E .Characterization andnucleotide sequence of pqqE and pqqF in Methylobacterium extorquensAM1[ J] .J Bacteriol , 1996 ,178(7):21542157.。致 謝本論文是在翟金玲副教授的悉心指導(dǎo)下完成的。從論文選題、試驗(yàn)設(shè)計(jì)到論文的撰寫等過程，翟老師都付出了大量的時(shí)間和精力。長(zhǎng)期以來(lái)，翟老師不僅在實(shí)驗(yàn)過程中幫助我，在我有疑惑時(shí)給予細(xì)心的指導(dǎo)，讓我學(xué)會(huì)了很多實(shí)驗(yàn)的方法和技術(shù)，還在學(xué)習(xí)和生活上給予我關(guān)懷和鼓勵(lì)。翟老師以認(rèn)真、負(fù)責(zé)、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)慕虒W(xué)態(tài)度讓我受益匪淺。在此向翟金玲副教授致以衷心的感謝和崇高的敬意。此外，我要特別感謝黃惜教授和生物技術(shù)研究所的各位老師長(zhǎng)期以來(lái)對(duì)實(shí)驗(yàn)相關(guān)環(huán)節(jié)的耐心指導(dǎo)和熱心幫助。另外，還要感謝王啟超師兄、范玉龍師兄等師兄師姐在我實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)困難時(shí)的幫助和對(duì)此實(shí)驗(yàn)的支持。最后，我要感謝大學(xué)里所有教導(dǎo)我的每一位老師和關(guān)心過我的每一位同學(xué)同學(xué)，感謝在背后默默支持我的家人，感謝你們?cè)谖覍W(xué)習(xí)和成長(zhǎng)過程中給予的巨大幫助和鼓舞。
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