【正文】 中和試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、病毒的紅細(xì)胞凝集和紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn)、熒光抗體試驗(yàn)、免疫酶標(biāo)記技術(shù)和免疫擴(kuò)散試驗(yàn)、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）和基因序列分析。 24雞新城疫病毒的分離鑒定步驟： （1）病料的采集和處理：可采集病雞呼吸道分泌物、脾臟、血液、腦組織，按1：5的比例加入滅菌的生理鹽水或緩沖液，用研磨器將組織研碎制成20%的懸液，反復(fù)凍融23次，5000r/min離心20分鐘，取上清液，用滅菌濾器過(guò)濾除菌或加抗生素殺滅病料中雜菌。 （2）分離培養(yǎng)：將處理好的病料經(jīng)尿囊腔接種911日齡無(wú)母源抗體的雞胚，37℃孵育，每天照蛋2次，棄除24小時(shí)內(nèi)死亡胚，收集24 96小時(shí)死亡胚，96小時(shí)內(nèi)未死亡胚取出。 （3）收集雞胚尿囊液采用血凝試驗(yàn)檢查是否有血凝活性，對(duì)有血凝活性分離物應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)的抗新城疫病毒，采用血凝抑制血清學(xué)試驗(yàn)對(duì)病毒進(jìn)行鑒定。 確定為新城疫病毒后對(duì)病毒的致病性做進(jìn)一步鑒定致病性試驗(yàn)。 250、 在一定時(shí)間內(nèi)能使特定動(dòng)物發(fā)生半數(shù)死亡的最小微生物量或毒素量，稱(chēng)為半數(shù)致死量（LD50）。 25 在一定時(shí)間內(nèi)能使特定動(dòng)物在感染后全部死亡的最小微生物或毒素量，稱(chēng)為最小致死量。 25 在一定時(shí)間內(nèi)能使特定動(dòng)物發(fā)生半數(shù)感染的最小微生物量或毒素量，稱(chēng)為半數(shù)感染量。 25熱空氣滅菌法常用溫度和維持時(shí)間是160℃，23小時(shí)。 25干烤滅菌法常用溫度和維持時(shí)間160℃，23小時(shí)。 25高壓蒸汽滅菌采用的溫度和時(shí)間是121℃，1520分鐘。 25濕熱的穿透力比干熱強(qiáng)，所以濕熱的滅菌效果更好。 25消毒劑對(duì)動(dòng)物機(jī)體細(xì)胞和微生物都有毒性。 25巴氏消毒法： 利用高溫殺死物品中的病原菌或一般雜菌，同時(shí)又不致嚴(yán)重?fù)p害食品質(zhì)量。加溫6163℃加熱30min，或7172℃加熱1530s,然后迅速冷卻到10℃左右，可將其中的非芽孢病原菌殺死。常用于葡萄酒、啤酒及牛奶等食品的消毒。 25影響血清學(xué)試驗(yàn)的因素： （1）電解質(zhì)：為了促使沉淀物或凝集物的形成，常用生理鹽水或各種緩沖液（PBS）作為抗原和抗體的稀釋液或反應(yīng)液。但電解質(zhì)的濃度不宜過(guò)高，否則會(huì)出現(xiàn)鹽析現(xiàn)象。 （2）溫度：在一定溫度范圍內(nèi)，溫度越高，抗原、抗體分子運(yùn)動(dòng)速度越快。適宜的溫度可增加抗原、抗體活性及相互接觸的機(jī)會(huì)，如凝集和沉淀反應(yīng)通常在37℃水浴感作。 （3）pH：血清學(xué)試驗(yàn)要求在一定的pH下進(jìn)行，常用的pH值為6～8，過(guò)高或過(guò)低，均可使已結(jié)合的抗原抗體復(fù)合物重新解離。若pH降至抗原或抗體的等電點(diǎn)時(shí)，會(huì)發(fā)生非特異性的酸凝集，造成假象。 （4）振蕩：適當(dāng)?shù)臋C(jī)械振蕩能增加分子或顆粒間的相互碰撞，加速抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)，但強(qiáng)烈的振蕩可使抗原抗體復(fù)合物解離。 （5）雜質(zhì)和異物：試驗(yàn)介質(zhì)中如有與反應(yīng)無(wú)關(guān)的雜質(zhì)、異物（如蛋白質(zhì)、類(lèi)脂質(zhì)、多糖等物質(zhì)）存在時(shí)，會(huì)抑制反應(yīng)的進(jìn)行或引起非特異性反應(yīng)，故每批血清學(xué)試驗(yàn)都應(yīng)設(shè)陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照試驗(yàn)。 260、免疫血清學(xué)檢測(cè)技術(shù)包括免疫非標(biāo)記技術(shù)和免疫標(biāo)記技術(shù)。免疫非標(biāo)記技術(shù)主要包括凝聚性反應(yīng)（凝集試驗(yàn)、沉淀試驗(yàn)）、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、中和試驗(yàn)（病毒中和試驗(yàn)、毒素中和試驗(yàn)）；免疫標(biāo)記技術(shù)包括標(biāo)記熒光素、酶分子、金屬顆粒、乳膠顆粒、放射性同位素等。 26凝集試驗(yàn)是細(xì)菌、紅細(xì)胞等顆粒性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合，在有適當(dāng)電解質(zhì)存在下，形成肉眼可見(jiàn)的凝集團(tuán)塊的試驗(yàn)，分為直接凝集試驗(yàn)與間接凝集試驗(yàn)。參與的抗體主要為IgG、IgM。凝集試驗(yàn)可用于檢測(cè)抗原或抗體，優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便。26直接凝集試驗(yàn)與間接凝集試驗(yàn)的區(qū)別： （1）直接凝集試驗(yàn)是顆粒性抗原與凝集素直接結(jié)合并出現(xiàn)凝集現(xiàn)象的試驗(yàn)。按操作方法可分玻片法和試管法兩種。 （2）間接凝集試驗(yàn)是將可溶性抗原(或抗體)吸附在不溶性顆粒載體的表面，與相應(yīng)抗體(或抗原)作用，在電解質(zhì)存在條件下，出現(xiàn)的特異性的凝集反應(yīng)。間接凝集試驗(yàn)敏感性高，比直接凝集反應(yīng)敏感28倍。 二、動(dòng)物傳染病及流行病學(xué)調(diào)查基本知識(shí) 26傳染病是由病原微生物引起的，具有一定的潛伏期和臨床癥狀并具有傳染性的疾病。 26傳染病流行過(guò)程的三個(gè)基本環(huán)節(jié)是傳染源、傳播途徑和易感動(dòng)物。 26動(dòng)物傳染病的主要發(fā)展階段為潛伏期、前驅(qū)期、明顯期（發(fā)病期）和轉(zhuǎn)歸期。 26垂直傳播是從親代到其子代之間的縱向傳播形式，傳播途徑包括：胎盤(pán)傳播、經(jīng)卵傳播和產(chǎn)道傳播。如：豬瘟、禽白血病、雞白痢等。 26隱性感染是指動(dòng)物已經(jīng)感染病原但未有臨床癥狀。 26外表健康，但經(jīng)過(guò)病原學(xué)檢測(cè)為陽(yáng)性的動(dòng)物，該動(dòng)物是帶毒動(dòng)物。 26傳染源是指在體內(nèi)有病原體寄生、生長(zhǎng)、繁殖，并能排出體外的動(dòng)物。 270、疫源地是傳染源及其排出的病原體存在的地區(qū)。 27SPF動(dòng)物是指無(wú)特定病原體動(dòng)物。 27病毒的持續(xù)感染是動(dòng)物長(zhǎng)期或終生帶毒、但無(wú)明顯臨床癥狀的感染。 27在動(dòng)物傳染病的流行過(guò)程中，根據(jù)在一定時(shí)間內(nèi)發(fā)病率的高低和傳播范圍的大小(即流行強(qiáng)度)，可分為四種表現(xiàn)形式： （1）散發(fā)性：發(fā)病數(shù)目不多，在一個(gè)較長(zhǎng)時(shí)間里只有個(gè)別的零星發(fā)生，稱(chēng)為散發(fā)。 （2）地方流行性：在一定的地區(qū)或畜禽群中，發(fā)病動(dòng)物的數(shù)量較多，但傳播的范圍不大，帶有局限性傳播的特征。 （3）流行性：是指在一定時(shí)間內(nèi)，一定畜禽群出現(xiàn)比尋常為多的病例，疾病發(fā)生頻率較高的一個(gè)相對(duì)名詞。 （4）大流行性：發(fā)病數(shù)量大，流行的范圍可達(dá)幾個(gè)省甚至全國(guó)或幾個(gè)國(guó)家。27死亡率是指某病病死數(shù)占某種動(dòng)物總頭數(shù)的百分比。 27動(dòng)物防疫工作的基本原則是預(yù)防為主，防重于治。 27動(dòng)物檢疫是對(duì)動(dòng)物及其制品進(jìn)行疫病檢查。通過(guò)動(dòng)物檢疫，對(duì)可疑或已證實(shí)的疫病對(duì)象實(shí)行強(qiáng)制隔離，或作出適當(dāng)處理,目的是防止動(dòng)物傳染病的傳播,保障畜牧業(yè)生產(chǎn)和人民健康。 27終末消毒是指疫點(diǎn)最后一頭（只）病畜（禽）痊愈或死亡后，在疫區(qū)解除封鎖前，為消滅疫區(qū)內(nèi)可能殘留的病原體所進(jìn)行的全面徹底的大消毒。 27馬屬動(dòng)物不會(huì)感染口蹄疫。 27結(jié)核桿菌病的特征是漸進(jìn)性消瘦和多種組織器官形成特殊結(jié)節(jié)。 280、豬支原體肺炎是由支原體科豬肺炎支原體引起的一種接觸性、慢性、消耗性呼吸道傳染病，俗稱(chēng)豬喘氣病。 28偽狂犬病其特征為發(fā)熱、奇癢及腦脊髓炎。但是成年豬常為隱性感染，可有流產(chǎn)、死胎及呼吸系統(tǒng)癥狀。 28禽流感的潛伏期從數(shù)小時(shí)到數(shù)天，最長(zhǎng)可達(dá)21天。 28口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的偶蹄獸的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病，該病的臨診特征是傳播速度快、流行范圍廣，成年動(dòng)物的口腔黏膜、蹄部和乳房等處皮膚發(fā)生水泡和潰爛，幼齡動(dòng)物多因心肌炎使其死亡率升高。 28 高致病性豬藍(lán)耳病是由豬繁殖與呼吸綜合癥病毒變異株引起的豬的一種急性高致死性傳染病，仔豬發(fā)病率可達(dá)100%、死亡率可達(dá)50%以上，母豬流產(chǎn)率可達(dá)30%以上，育肥豬可發(fā)病死亡是其特征。 28新城疫是由新城疫病毒感染家禽引起的急性、高度接觸性傳染病，是我國(guó)規(guī)定的一類(lèi)動(dòng)物疫病，本病春季多發(fā)。 28新城疫的典型病理變化： 出血和壞死，尤其以消化道和呼吸道最為明顯。腺胃乳頭和乳頭間有出血點(diǎn)，或有潰瘍和壞死，肌胃角質(zhì)層下也常見(jiàn)有出血點(diǎn)，氣管、直腸粘膜多見(jiàn)出血。 28新城疫的主要傳染源是病雞和帶毒雞。 28新城疫的自然感染途徑主要經(jīng)呼吸道和消化道，其次是眼結(jié)膜，也可經(jīng)外傷及交配傳染。 28雞新城疫病的流行特點(diǎn)： 一年四季均可發(fā)生，特別在春初、秋冬季節(jié)變換時(shí)易發(fā)。流行時(shí)以雞易感性最高，鴿子、鵪鶉、鸚鵡、火雞、鵝、鴨、鴕鳥(niǎo)等都可感染發(fā)病。其中鴿子和鸚鵡對(duì)本病的流行起著很關(guān)鍵的作用。病死雞是本病的主要傳染源。健康雞接觸病雞及其排泄物、分泌物、污染的飼料、飲水、墊料等，通過(guò)呼吸道、眼結(jié)膜以及消化道感染發(fā)病。290、豬瘟臨床剖檢的特征性病理變化： 體表有紫斑或出血點(diǎn)，淋巴結(jié)周邊出血，呈大理石樣變，脾臟出血性梗死，盲腸、回腸、結(jié)腸內(nèi)形成紐扣狀腫脹，腎臟表面有針尖狀出血，嚴(yán)重時(shí)呈麻雀卵樣變化，膀胱粘膜有針尖狀出血。 29炭疽的特征病變： 天然孔出血，血液凝固不良，敗血癥變化，脾臟顯著腫大和皮下、漿膜下結(jié)締組織出血性膠樣浸潤(rùn)。 29禽流感的傳播途徑包括： 病禽和健康禽直接接觸傳播、病毒污染物和健康禽間接接觸傳播兩種。家禽主要通過(guò)呼吸道和消化道感染。 禽流感病毒存在于病禽和感染禽的消化道、呼吸道和禽體臟器組織中。因此病毒可隨眼、鼻、口腔分泌物及糞便排出體外，含禽病毒的分泌物、糞便、死禽尸體污染的任何物體都能成為間接接觸傳播的媒介，如飼料、飲水、雞舍、空氣、籠具、飼養(yǎng)管理用具、運(yùn)輸車(chē)輛、昆蟲(chóng)以及各種攜帶病毒的鳥(niǎo)類(lèi)等均可機(jī)械性傳播。 　 29高致病性禽流感的流行特點(diǎn)： 高致病性禽流感病毒與普通流感病毒相似，一年四季均可流行，但在冬季和春季容易流行，因此禽流感病毒在低溫條件下抵抗力較強(qiáng)。各品種和不同日齡的禽類(lèi)均可感染高致病性禽流感，發(fā)病急、傳播快，其致死率可達(dá)100％。 29牛結(jié)核病的流行特點(diǎn): 本病奶牛最易感，其次為水牛、黃牛、牦牛。人也可被感染。結(jié)核病病牛是本病的主要傳染源。牛型結(jié)核分枝桿菌隨鼻汁、痰液、糞便和乳汁等排出體外，健康?？赏ㄟ^(guò)被污染的空氣、飼料、飲水等經(jīng)呼吸道、消化道等途徑感染。 29牛結(jié)核病以肺結(jié)核、乳房結(jié)核和腸結(jié)核最為常見(jiàn)。 29馬傳染性貧血病的特征性臨床癥狀： 臨床反復(fù)發(fā)作，呈現(xiàn)發(fā)熱并伴有貧血、出血、黃疸、心衰、浮腫和消瘦等癥狀。 29能引起母豬流產(chǎn)、死胎的主要疫病： 豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合癥、細(xì)小病毒病、豬偽狂犬病、日本乙型腦炎、布魯氏菌病、豬弓形蟲(chóng)病等。 29能引起豬呼吸道疾病的主要病原體： （1）豬肺炎支原體（引起豬喘氣病）； （2）胸膜肺炎放線(xiàn)桿菌（引起豬胸膜肺炎）； （3）多殺性巴氏桿菌（引起豬肺疫）； （4）敗血波氏桿菌（引起豬傳染性萎縮性鼻炎）； （5）副豬嗜血桿菌（引起豬肺炎、胸膜炎）； （6）鏈球菌（引起育肥豬咳嗽、肺炎）； （7）豬繁殖與呼吸綜合癥病毒（引起豬繁殖與呼吸綜合癥)； （8）豬圓環(huán)病毒（引起斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合癥、皮炎與腎病綜合征、呼吸道疾病等）； （9）豬流行性感冒病毒（引起豬上呼吸道炎癥）； （10）偽狂犬病病毒(引起育肥豬呼吸道癥狀)。 29能引起雞產(chǎn)蛋下降的主要疫?。?減蛋綜合征、雞傳染性支氣管炎、產(chǎn)蛋雞非典型新城疫、雞腫頭綜合征、禽流感、禽腦脊髓炎、禽痘、敗血霉形體、傳染性鼻炎和禽霍亂等。 300、能引起奶牛流產(chǎn)的主要疫?。?布魯氏菌病、鉤端螺旋體病、弧菌病、病毒性腹瀉、傳染性氣管炎、霉菌性流產(chǎn)、衣原體病、李氏桿菌病、流行性熱、滴蟲(chóng)病、肉孢子蟲(chóng)病、新孢子蟲(chóng)病等。 30馬立克氏病在臨床上分為神經(jīng)型、內(nèi)臟型、眼型、皮膚型。 30豬口蹄疫的主要臨床癥狀： 潛伏期2～8天左右。病初體溫升高到41℃～42℃，精神和食欲不振、流涎，唇內(nèi)面、齒齦、舌面、蹄部、乳房發(fā)生大小不等的米黃色水泡，局部紅腫、疼痛、破潰后出血，蹄殼脫落，水皰破裂后形成紅色糜爛。 30豬口蹄疫的主要病理變化： （1）在口腔、蹄部有水皰和爛斑； （2）心臟病變、心包膜有彌漫性及點(diǎn)狀出血，心肌切面有灰白或淡黃色斑點(diǎn)或條紋（虎斑心）。 30口蹄疫的流行病學(xué)特點(diǎn)（從傳染病的三個(gè)基本環(huán)節(jié)論述）： （1）易感動(dòng)物主要是偶蹄動(dòng)物，包括?？苿?dòng)物（牛、瘤牛、水牛、牦牛）、綿羊、山羊、豬及所有野生的反芻和豬科動(dòng)物，駝科動(dòng)物（駱駝、單峰駱駝、美洲駝、美洲駱馬）亦可感染但易感性較低。（2）傳染源主要為潛伏期感染及臨床發(fā)病動(dòng)物。感染動(dòng)物呼出物、唾液、糞便、尿液、乳、精液及肉和副產(chǎn)品均可帶毒。康復(fù)期動(dòng)物可帶毒。 （3）可通過(guò)呼吸道、消化道、生殖道和傷口感染病毒，通常以直接或間接接觸（飛沫等）方式傳播，或通過(guò)人或犬、蠅、蜱、鳥(niǎo)等動(dòng)物媒介，或經(jīng)車(chē)輛、器具等被污染物傳播。如果環(huán)境氣候適宜，病毒可隨風(fēng)遠(yuǎn)距離傳播。 30豬繁殖與呼吸綜合癥（又稱(chēng)豬藍(lán)耳?。┦怯韶i繁殖與呼吸綜合癥病毒引起的，以母豬繁殖障礙、早產(chǎn)、流產(chǎn)、死胎、木乃伊胎及仔豬呼吸綜合征的高度接觸性傳染病。按臨床表現(xiàn)不同，豬藍(lán)耳病分為經(jīng)典豬藍(lán)耳病和高致病性藍(lán)耳病。 30高致病性豬藍(lán)耳病是由豬繁殖與呼吸綜合癥病毒變異株引起的一種急性高致病性傳染病。以高度接觸性傳播、全身出血、肺部實(shí)變和母豬繁殖障礙為特征，仔豬、育肥豬和成年豬均可發(fā)病和死亡，其中仔豬發(fā)病率可達(dá)100%、死亡率可達(dá)50%以上，母豬流產(chǎn)率可達(dá)30%以上，育肥豬也可發(fā)病死亡是其特征。 30小豬偽狂犬病的臨床診斷特點(diǎn)是發(fā)熱、運(yùn)動(dòng)失調(diào)、嘔吐、腹瀉、痙攣死亡 。 30豬痢疾是豬的一種腸道傳染病，其病變特點(diǎn)是大腸粘膜發(fā)生卡他性出血性炎癥或纖維素性壞死性炎癥?！?30豬瘟持續(xù)性感染表現(xiàn)為妊娠母豬感染豬瘟病毒后不表現(xiàn)癥狀，但病毒能通過(guò)胎盤(pán)傳染于胎兒，引起死胎、流產(chǎn)、早產(chǎn)或產(chǎn)出體弱仔豬。 3雞傳染性支氣管炎病原的特點(diǎn)是血清型眾多，型與型之間的交叉保護(hù)力低。 31雞傳染性喉氣管炎的特征病變是喉頭和氣管粘膜充血、出血，干酪樣偽膜將氣管堵塞。 31引起仔豬黃痢的病原是產(chǎn)腸毒素大腸桿菌；而引起仔豬水腫病的病原是產(chǎn)志賀樣毒素大腸桿菌。 31豬肺疫急性型的病理變化是全身性出血和纖維素性肺炎。 31乙型腦炎的流行病學(xué)特點(diǎn)是蚊蟲(chóng)傳播、有季節(jié)性。 31初產(chǎn)母豬感染豬細(xì)小病毒后，主要臨床癥狀是繁殖障礙（流產(chǎn)、死胎、木乃伊、病弱仔豬）。 31當(dāng)發(fā)生豬傳染性胃腸炎時(shí)，死亡率最高的是10日齡以?xún)?nèi)仔豬。　 31鴨瘟的特征性臨床癥狀是頭頸部腫大、兩腳麻痹。　 31犬細(xì)小病毒感染的臨床表現(xiàn)有腸炎型和心肌炎型?！　?31貂病毒性腸炎的特征性病變是小腸急性、卡他性纖維素性或出血性炎癥。　　 3豬蛔蟲(chóng)最主要的致病作用是奪取宿主營(yíng)養(yǎng)?！　?32貝氏莫尼茨絳蟲(chóng)蟲(chóng)卵的鑒別特征是近似四角形，卵內(nèi)有梨形器，內(nèi)含六鉤蚴?！　　?32莫尼茨絳蟲(chóng)可感染羔羊。 32預(yù)防伊氏錐蟲(chóng)病最實(shí)用的措施為消滅媒介昆