蛋白質(zhì)化學(xué)部分名詞解釋-資料下載頁
2025-06-07 23:26本頁面
【正文】 所截留閾值分子量的物質(zhì)可擴(kuò)散穿過膜，高于膜截留閾值分子量的物質(zhì)則被保留在半透膜的另一側(cè)。 層析 chromatography基于不同物質(zhì)在流動(dòng)相和固定相之間的分配系數(shù)不同而將混合組分分離的技術(shù)。當(dāng)流動(dòng)相(液體或氣體)流經(jīng)固定相(多孔的固體或覆蓋在固體支持物上的液體)時(shí)，各組分沿固定相移動(dòng)的速度不同而分離。能用于微量樣品的分析和大量樣品的純化制備。 超濾ultrafiltration。hyperfiltration 在壓力差的驅(qū)動(dòng)下，用可以阻擋不同大小分子的濾板或?yàn)V膜將液體過濾的方法。是常用的分離方法。離子交換層析（Ion Exchange Chromatography依據(jù)流動(dòng)相中組分離子與固定相（離子交換劑）上平衡離子進(jìn)行可逆交換時(shí)的結(jié)合力大小差別，進(jìn)行分離的一種層析方法。使用有一定大小孔隙的凝膠作層析介質(zhì)(如葡聚糖凝膠、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等)，利用凝膠顆粒對分子量和形狀不同的物質(zhì)進(jìn)行分離的層析技術(shù)。由于各種分子的大小、形狀不同，擴(kuò)散到凝膠孔隙內(nèi)的速度不同，因而通過層析柱的快慢不同而分離。分子排阻層析。溶液通過具 有分子篩性質(zhì)的固定相(凝膠：凝膠珠顆粒，顆粒內(nèi)部為多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。一定型號(hào)凝膠網(wǎng)孔大小一定，只允許相應(yīng)大小的分子進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部，大分子則被排阻在外）。親和層析（ Affinitychromatography 化學(xué)方法將B物質(zhì)（配體）共價(jià)結(jié)合到不溶性載體(R)上,得到RB,偶聯(lián)到R上的B能與A結(jié)合；將含有A的混合蛋白質(zhì)通過裝有RB層析柱，A與B非共價(jià)結(jié)合，得到RBA，不能與B結(jié)合雜蛋白從柱上流出；適當(dāng)洗脫液將A從層析柱上洗脫。SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳萊姆利()于1970年創(chuàng)建的含十二烷基硫酸鈉(SDS)的變性聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質(zhì)方法。向樣品加入還原劑(打開蛋白質(zhì)的二硫鍵)和過量SDS，SDS是陰離子去垢劑，使蛋白質(zhì)變性解聚，并與蛋白質(zhì)結(jié)合成帶強(qiáng)負(fù)電荷的復(fù)合物，掩蓋了蛋白質(zhì)之間原有電荷的差異，使各種蛋白質(zhì)的電荷／質(zhì)量比值都相同，因而在聚丙烯酰胺凝膠中電泳時(shí)遷移率主要取決于蛋白質(zhì)分子大小。是分析蛋白質(zhì)和多肽、測定其分子量等常用的方法。 等電聚焦電泳（IFE，isoelectric focusing electrophoresis）利用特殊的一種緩沖液（兩性電解質(zhì)）在凝膠（常用聚丙烯酰胺凝膠）內(nèi)制造一個(gè)pH梯度，電泳時(shí)每種蛋白質(zhì)就將遷移到等于其等電點(diǎn)（pI）的pH處（此時(shí)此蛋白質(zhì)不再帶有凈的正或負(fù)電荷），形成一個(gè)很窄的區(qū)帶雙向電泳（twodimensional electrophoresis）是等電聚焦電泳和SDSPAGE的組合，即先進(jìn)行等電聚焦電泳（按照pI分離），然后再進(jìn)行SDSPAGE（按照分子大小），經(jīng)染色得到的電泳圖是個(gè)二維分布的蛋白質(zhì)圖。
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