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堿性磷酸酶km值測定-資料下載頁

2025-05-26 18:01本頁面
  

【正文】 值。 ? 1.酚試劑 ? 2. / L磷酸苯二鈉基質(zhì)液 ? 3.堿性緩沖液 () ? 4.堿性磷酸酶液 【 試劑 】 稱取磷酸苯二鈉 635mg,用蒸餾水溶解后定容至 1000ml,加氯仿數(shù)滴以防腐,置于冰箱中可保存 1年之久。 稱取無水 Na2CO3 NaHcO3 ,先以適量蒸餾水溶解,再定容至 1000ml。 稱取堿性磷酸酶 lmg,加水 3~4ml,置于冰箱可保存 5周左右。 操作 試劑 ( ml) 1 2 3 4 5 6 蒸餾水 - - 堿性緩沖液 混勻后, 37℃ 水浴 5min 堿性磷酸酶 - 混勻后, 37℃ 水浴 15min(準確計時) 酚試劑 堿性磷酸酶 - - - - - 10%碳酸鈉 混勻后, 37℃ 水浴 15min,以第 6管調(diào) 0與 650nm比色,讀取各管 A值。 實驗數(shù)據(jù)及結(jié)果 管號 A650 1/A650 [s] 1/ [s] 1 2 3 4 5 6 以上述數(shù)據(jù)雙倒數(shù)作圖,求出 堿性磷酸酶的 Km值。 ? Km值的定義和意義是什么? ? 米氏方程度表達式是什么,如何求出 Vmax和 Km? 【 實驗討論 】 ⑴ 加入堿性磷酸酶液的量要準確,否則誤差較大。 ⑵保濕時間要準確。 【 注意事項 】
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