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堿性磷酸酶km值測(cè)定(存儲(chǔ)版)

2025-06-25 18:01上一頁面

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【正文】 pH pH對(duì)某些酶活性的影響 胃蛋白酶 淀粉酶 膽堿酯酶 2 4 6 8 10 堿性磷酸酶 km值的測(cè)定 以不同濃度的磷酸苯二鈉作為堿性磷酸酶的底物,在最適條件下 (pH=, 37℃) ,準(zhǔn)確反應(yīng) 15min。 ? Km值的定義和意義是什么? ? 米氏方程度表達(dá)式是什么,如何求出 Vmax和 Km? 【 實(shí)驗(yàn)討論 】 ⑴ 加入堿性磷酸酶液的量要準(zhǔn)確,否則誤差較大。 操作 試劑 ( ml) 1 2 3 4 5 6 蒸餾水 - - 堿性緩沖液 混勻后, 37℃ 水浴 5min 堿性磷酸酶 - 混勻后, 37℃ 水浴 15min(準(zhǔn)確計(jì)時(shí)) 酚試劑 堿性磷酸酶 - - - - - 10%碳酸鈉 混勻后, 37℃ 水浴 15min,以第 6管調(diào) 0與 650nm比色,讀取各管 A值。 * 低溫的應(yīng)用 酶 活 性 0 10 20 30 40 50 60 溫度 186。 ② 意義: a) Km是酶的特征性常數(shù)之一; b) Km可近似表示酶對(duì)底物的親和力; c) 同一酶對(duì)于不同底物有不同的 Km值。 [S]: 底物濃度 V: 不同 [S]時(shí)的反應(yīng)速度 Vmax: 最大反應(yīng)速度 (m
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