生物選修三ppt課件-資料下載頁
2025-05-12 04:37本頁面
【正文】 項(xiàng)正確。若質(zhì)粒插入 c點(diǎn)，兩種基因保持完整，在分別含有每種抗生素的培養(yǎng)基上都能生長，C項(xiàng)和 D項(xiàng)均不正確。 11.(2022 濟(jì)南高二檢測 )某線性 DNA分子含有 3 000個(gè)堿基對 (bp)，先用限制酶 a切割，再把得到的產(chǎn)物用限制酶 b切割，得到的 DNA片段大小如下表。限制酶 a和 b的識別序列和切割位點(diǎn)如圖所示。下列有關(guān)說法正確的是 (多選 )( ) DNA分子中， a酶與 b酶的識別序列分別有 3個(gè)和 2個(gè) b酶切出的黏性末端不能相互連接 b酶切斷的化學(xué)鍵相同 DNA連接酶對該 DNA分子進(jìn)行反復(fù)切割、連接操作，若干循環(huán)后， 序列會明顯增多 AGA TCCTCTAGG??【 解析 】 選 C、 D。限制酶 a切割為 3段，有兩個(gè)切割位點(diǎn)，其 產(chǎn)物又被限制酶 b切割，形成兩種產(chǎn)物，即再被切割兩次， 有二個(gè)切割位點(diǎn)， A項(xiàng)不正確。 B項(xiàng)中 a酶與 b酶切出的黏性末 端能相互連接， B項(xiàng)不正確。 C項(xiàng)中兩種限制酶切斷的化學(xué)鍵 都是磷酸二酯鍵。 D項(xiàng)經(jīng)分析 a酶與 b酶的識別序列及切割位 點(diǎn)，不難發(fā)現(xiàn)它們形成的黏性末端可以相互配對連接，但一 旦連接后，形成的重組 DNA中已不存在原來兩種限制酶的識 別序列，不能再被切割，可以保存下來，因此經(jīng)過若干次循 環(huán)操作后： 和 序列會明顯增 多，即 D項(xiàng)是正確的。 【 方法技巧 】 “ 限制酶識別序列 ” 的辨析方法 (1)不同限制酶識別序列的辨析：首先要認(rèn)真分析不同限制酶特定的識別序列，尋找它們的共同點(diǎn)，再分析目的基因或質(zhì)粒切割位點(diǎn)的個(gè)數(shù)和部位，可以簡單地畫些草圖進(jìn)行直觀的分析，同時(shí)結(jié)合相應(yīng)的堿基對比例、切割后的游離磷酸基團(tuán)等知識進(jìn)行解題。 (2)不同識別序列的限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒、目的基因并進(jìn)行拼接時(shí)，首先要分析這種操作的優(yōu)點(diǎn)：可以提高質(zhì)粒與目的基因定向連接效率；其次要分析能進(jìn)行拼接的前提：只有相同黏性末端才能進(jìn)行拼接；最后還要分析拼接保留或破壞了哪些限制酶的識別序列。 (3)形成重組質(zhì)粒后，用不同限制酶進(jìn)行再次切割，可形成的片段分析：解決這類問題一定要分析經(jīng) DNA連接酶形成的重組質(zhì)粒中原限制酶的識別序列有沒有發(fā)生改變 (即是否存在 )。如不存在，則不能被該限制酶再次切割，不能形成原來的黏性末端。 ，通常選取一特定長度的線性 DNA分子，先用一種限制酶切割，通過電泳技術(shù)將單酶水解片段分離，計(jì)算相對大??；然后再用另一種酶對單酶水解片段進(jìn)行降解，分析片段大小。下表是某小組進(jìn)行的相關(guān)實(shí)驗(yàn)。 (1)該實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)主要體現(xiàn)了 _____原則。 (2)由實(shí)驗(yàn)可知，在這段已知序列上， A酶與 B酶的識別序列分別為 _____個(gè)和 _____個(gè)。 (3)根據(jù)表中數(shù)據(jù)，請?jiān)谙聢D中標(biāo)出相應(yīng)限制酶的酶切位點(diǎn)并注明相關(guān)片段的大小。 【 解析 】 (1)分析表格中實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)過程，發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)體現(xiàn)了單一變量的原則 (對照原則 )。 (2)經(jīng) A酶切割，可形成 4個(gè)片段 (2 100、 1 400、 1 000、 500 bp)，即 A酶的識別序列有 3個(gè)；經(jīng) B酶切割，可形成 3個(gè)片段 (2 500、 1 300、 1 200 bp)，即 B酶的識別序列有 2個(gè)。 (3)經(jīng) A、 B酶同時(shí)切割，可形成 6個(gè)片段，即有 5個(gè)識別序列，又結(jié)合計(jì)算推導(dǎo)，可得出： 答案： (1)對照 (單一變量 ) (2)3 2 (3) 小 結(jié) 檢測與鑒定
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