snp檢測技術ppt課件-資料下載頁
2025-05-05 18:24本頁面
【正文】 片基質(zhì)共結(jié)晶后在質(zhì)譜儀的 真空管經(jīng)強激光激發(fā)，核酸分子解吸附為單電荷離 子，電場中離子飛行時間與離子質(zhì)量成反比，通過 檢測核酸分子在真空管中的飛行時間而獲得樣品分 析物的精確分子量，從而 檢測出 SNP位點信息。 MassARRAY技術原理 : ? MassEXTEND單堿基延伸反應，緊挨 SNP位點設計一段探針，在反應體系中以 ddNTP替代 dNTP，使探針僅在 SNP位點處延伸一個堿基即終止。根據(jù) SNP位點的不同，探針將結(jié)合不同的 ddNTP，從而具有不同的分子量，質(zhì)譜儀即可檢測出這種分子量差異，從而實現(xiàn) SNP分型的目的。 MassARRAY技術流程： 應用： 1. 確定基因多態(tài)性和疾病的關系 2. 解釋個體間的表型差異對疾病的易感程度 3. 對未來疾病做出診斷 4. 研究不同基因型個體對藥物反應的差異，指導藥物開發(fā)及臨床合理用藥 5. 個體間 SNP千差萬別，通過 SNP檢測等技術進行法醫(yī)鑒定及個體識別 優(yōu)勢 ? （ 1）質(zhì)譜儀檢測的是分子最本質(zhì)的特征之一 —— 分子量，不涉及熒光標記、凝膠電泳等，就能檢測一個堿基的差異，準確性高，機器本身出錯的概率非常低； ? （ 2）質(zhì)譜儀的靈敏度非常高，檢測窗口內(nèi)，任何 pmol級別的物質(zhì)都能被檢測出來； ? （ 3）通量高：幾秒就能檢測完一個反應孔； ? （ 4）操作簡單，儀器要求簡單，除質(zhì)譜儀外，都是常規(guī) PCR儀器； ? （ 5）靈活：每天可以完成幾個反應至上萬個反應； ? （ 6）便宜：引物不帶熒光標記，普通長度（ 3條引物總長 80bp左右），此外在一個反應孔內(nèi)能完成 4個或更多的反應，即通常所說的 4重反應； ? （ 7）兼容性強：質(zhì)譜儀還能在核酸的其它方向，以及蛋白質(zhì)組學、微生物鑒定等領域也能應用。 ? （ 8）質(zhì)譜技術是 “ 一管式操作 ” ，即反應體系在生化學實驗過程中始終在一個試管內(nèi)反應，沒有多次轉(zhuǎn)移，這樣就減少被污染的概率。
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