snp檢測技術(shù)ppt課件-資料下載頁
2025-05-05 18:24本頁面
【正文】 片基質(zhì)共結(jié)晶后在質(zhì)譜儀的 真空管經(jīng)強(qiáng)激光激發(fā)，核酸分子解吸附為單電荷離 子，電場中離子飛行時(shí)間與離子質(zhì)量成反比，通過 檢測核酸分子在真空管中的飛行時(shí)間而獲得樣品分 析物的精確分子量，從而 檢測出 SNP位點(diǎn)信息。 MassARRAY技術(shù)原理 : ? MassEXTEND單堿基延伸反應(yīng)，緊挨 SNP位點(diǎn)設(shè)計(jì)一段探針，在反應(yīng)體系中以 ddNTP替代 dNTP，使探針僅在 SNP位點(diǎn)處延伸一個(gè)堿基即終止。根據(jù) SNP位點(diǎn)的不同，探針將結(jié)合不同的 ddNTP，從而具有不同的分子量，質(zhì)譜儀即可檢測出這種分子量差異，從而實(shí)現(xiàn) SNP分型的目的。 MassARRAY技術(shù)流程： 應(yīng)用： 1. 確定基因多態(tài)性和疾病的關(guān)系 2. 解釋個(gè)體間的表型差異對(duì)疾病的易感程度 3. 對(duì)未來疾病做出診斷 4. 研究不同基因型個(gè)體對(duì)藥物反應(yīng)的差異，指導(dǎo)藥物開發(fā)及臨床合理用藥 5. 個(gè)體間 SNP千差萬別，通過 SNP檢測等技術(shù)進(jìn)行法醫(yī)鑒定及個(gè)體識(shí)別 優(yōu)勢 ? （ 1）質(zhì)譜儀檢測的是分子最本質(zhì)的特征之一 —— 分子量，不涉及熒光標(biāo)記、凝膠電泳等，就能檢測一個(gè)堿基的差異，準(zhǔn)確性高，機(jī)器本身出錯(cuò)的概率非常低； ? （ 2）質(zhì)譜儀的靈敏度非常高，檢測窗口內(nèi)，任何 pmol級(jí)別的物質(zhì)都能被檢測出來； ? （ 3）通量高：幾秒就能檢測完一個(gè)反應(yīng)孔； ? （ 4）操作簡單，儀器要求簡單，除質(zhì)譜儀外，都是常規(guī) PCR儀器； ? （ 5）靈活：每天可以完成幾個(gè)反應(yīng)至上萬個(gè)反應(yīng)； ? （ 6）便宜：引物不帶熒光標(biāo)記，普通長度（ 3條引物總長 80bp左右），此外在一個(gè)反應(yīng)孔內(nèi)能完成 4個(gè)或更多的反應(yīng)，即通常所說的 4重反應(yīng)； ? （ 7）兼容性強(qiáng)：質(zhì)譜儀還能在核酸的其它方向，以及蛋白質(zhì)組學(xué)、微生物鑒定等領(lǐng)域也能應(yīng)用。 ? （ 8）質(zhì)譜技術(shù)是 “ 一管式操作 ” ，即反應(yīng)體系在生化學(xué)實(shí)驗(yàn)過程中始終在一個(gè)試管內(nèi)反應(yīng)，沒有多次轉(zhuǎn)移，這樣就減少被污染的概率。
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