肽的人工合成ppt課件-資料下載頁
2025-05-03 03:21本頁面
【正文】 Fmoc固相合成法為基礎(chǔ)，將肽合成自動化 ? 監(jiān)測： Fmoc有明顯的紫外吸收 第三節(jié) 酶促肽合成和半合成 一、基本原理： 利用蛋白水解酶催化肽鍵的形成 ? 優(yōu)點(diǎn)：反應(yīng)條件溫和；不引起 aa消旋； 不要求 aa側(cè)鏈保護(hù)；副產(chǎn)物少，后處理較簡單 1. 酶促合成多肽的酶類： ? 主要有四類： Ser蛋白水解酶； HS蛋白水解酶； 羧肽酶； 金屬蛋白酶類 2. 對 aa成分的選擇： 為使反應(yīng)向肽鍵生成方向進(jìn)行 二 酶合成反應(yīng)的幾個系統(tǒng)： ? 為了使反應(yīng)定向進(jìn)行，將參與反應(yīng)的氨基組分的羧基端和羧基組分的氨基端保護(hù) ? 為提高合成反應(yīng)效率，防止二次水解，創(chuàng)建一些特定的反應(yīng)系統(tǒng)，如： 1. 沉淀系統(tǒng)：降低產(chǎn)物溶解度，使其沉淀，防止水解 如： ZPheCOOH + ZLeuNH2 ? ZPheLeuNH2 在凝乳酶 (200?mol/L)催化下， PH7反應(yīng) 20hr，收率為 70 ~ 80%。隨反應(yīng)進(jìn)行溶液逐步變褐色，黏稠化、最終完全固化 2. 二相系統(tǒng)：將緩沖液與有機(jī)溶劑攪拌成乳濁液（二相系統(tǒng)，水相一般占 2~5%），底物和酶在水的懸滴中反應(yīng)，但生成的產(chǎn)物為脂溶性的。隨著反應(yīng)地進(jìn)行，產(chǎn)物自動轉(zhuǎn)移至有機(jī)相中，不再與酶接觸。如： ZGluCOOH + AlaODPM ? ZGlu AlaODPM(二苯甲酯 ) 三 酶促半合成 ： ? 對于無保護(hù)的大肽段的之間的定向銜接，無法用化學(xué)法完成，但用蛋白水解酶的特異性可能取得成功 如：以枯草桿菌蛋白酶為催化劑，把化學(xué)合成的 RNAase A小片段 S肽與天然水解大片段 S蛋白轉(zhuǎn)化成半合成 RNAase A取得成功 ? 酶促半合成胰島素： 豬胰島素 羧肽酶 A 去 Ala胰島素 胰蛋白酶 切除 B鏈 Ala30 在 B30處接上叔丁氧基 Thr ? 酶促半合成人胰島素（產(chǎn)率 90%） 小結(jié) ?肽合成方法： 液相法 固相法（肽合成儀） 酶促合成（半合成）法 ?原理： 基團(tuán)保護(hù)，肽鍵合成，接肽，脫保護(hù) 蛋白質(zhì)部分復(fù)習(xí)題 ? 簡述蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)層次以及各層次主要的特點(diǎn)和存在類型。 ? 蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)測定的基本步驟和方法。 ? 研究蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的主要方法有哪些？簡述其原理。 ? 舉例說明各種膜蛋白及纖維蛋白的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。 ? 試述細(xì)胞內(nèi)各種蛋白質(zhì)跨膜運(yùn)輸?shù)臋C(jī)理和途徑。 ? 試述肌肉收縮的分子機(jī)理。 ? 簡述肽人工合成的思路和常用方法。
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