沉淀分離法及應(yīng)用ppt課件-資料下載頁
2025-05-01 05:36本頁面
【正文】 B、 沉淀的顆粒往往比較大 ， 產(chǎn)物比較容易收集； C、 PEG非但不會(huì)使 pro變性 ,而且可以提高它的穩(wěn)定性； D、 PEG無毒 ， 優(yōu)先使用在臨床產(chǎn)品的加工過程中被 。 缺點(diǎn)： A、 PEG比其他沉淀劑更難從蛋白質(zhì)溶液中除去為此需用超濾和液 液萃取來解決； B、 價(jià)格較昂貴 。 熱沉淀 定義 在較高溫度下，熱穩(wěn)定性差的蛋白質(zhì)將發(fā)生變性沉淀，利用這一現(xiàn)象，可根據(jù)蛋白質(zhì)間的熱穩(wěn)定性的差別進(jìn)行蛋白質(zhì)的熱沉淀，分離純化熱穩(wěn)定性高的目標(biāo)產(chǎn)物。 適用對(duì)象 ： 熱穩(wěn)定性高的蛋白質(zhì) 沉淀動(dòng)力學(xué) 溶解度是一個(gè)平衡特性 ， 但是溶解度值的降低是一個(gè)動(dòng)力學(xué)過程 。 當(dāng)體系變得不穩(wěn)定以后 ， 分子互相碰撞并產(chǎn)生聚集作用 。 通常認(rèn)為相互碰撞由下面幾種運(yùn)動(dòng)引起： A、 熱運(yùn)動(dòng) （ Brownian運(yùn)動(dòng) ） ； B、 對(duì)流運(yùn)動(dòng) ， 由機(jī)械攪拌產(chǎn)生； C、 差示沉降 ， 由顆粒自由沉降速度不同造成的 。 第 A、 B兩種機(jī)理在蛋白質(zhì)沉淀中起主導(dǎo)作用 ， 第 ③ 種機(jī)理在沉降過程中起主導(dǎo)作用 (如在廢水處理中 )。 異向聚集：由 Brownian運(yùn)動(dòng)所造成的碰撞導(dǎo)致 。 同向聚集：而由對(duì)流運(yùn)動(dòng)所造成的碰撞導(dǎo)致 。 沉淀動(dòng)力學(xué) 沉淀過程步驟： A、 初始混合 ， 蛋白質(zhì)溶液與沉淀劑在強(qiáng)烈攪拌下混合； B、 晶核生成 ， 新相形成 ， 產(chǎn)生極小的初始固體微粒； C、 擴(kuò)散限制生長 ， 晶核在 Brownian擴(kuò)散作用下生長 ， 生成亞微米大小的核 ， 這一步速度很快； D、 流動(dòng)引起的生長 ， 這些核通過對(duì)流傳遞 （ 攪拌 ） 引起的碰撞進(jìn)一步生長 ， 產(chǎn)生絮體或較大的聚集體 ， 這一步是在較低的速度下進(jìn)行的 。 E、 絮體的破碎 ， 破碎取決于它們的大小 、 密度和機(jī)械阻力 。 F、 聚集體的陳化 ， 在陳化過程中 ， 絮體聚得大小和阻力平衡 。 Applications 早在 50年前 ， Edwin Cohnx及其合作者就是用乙醇來完成蛋白質(zhì)沉淀經(jīng)典實(shí)驗(yàn)的 。 他們應(yīng)用低溫乙醇分級(jí)沉淀人血漿的辦法制備了白蛋白溶液 ， 并通過冷凍干燥將乙醇從成品中去除 ， 所得產(chǎn)品成功地救治了1941年珍珠港空襲后的幸存者 。 除此以外 ， 免疫球蛋白 、 血纖維蛋白原等其他許多蛋白質(zhì)都是利用上述方法進(jìn)行沉淀的 。 水的凈化 如何對(duì)一杯混濁的天然水進(jìn)行處理？ 方法一、 將燒杯中的水靜置一段時(shí)間，使水中的一些 不溶性固體雜質(zhì)沉降下來，然后再采 用某種 方法將固體與水分開。 方法二、 向水中加入某些凈水劑如明礬，利用明礬溶 于水后生成的膠狀物對(duì)雜質(zhì)進(jìn)行吸附，使雜 質(zhì)沉降來達(dá)到凈水的目的，再采用某種方法 使沉淀物與水分離。 方法三、 通過加熱使水沸騰成水蒸氣，然后使水蒸氣 冷凝成蒸餾水，從而除去水中的雜質(zhì)。 自來水廠凈水過程示意圖 酪蛋白的制備 牛奶中提取酪蛋白 ? 牛奶中主要的蛋白質(zhì)是酪蛋白，含量約為35g/L ? 酪蛋白是一些含磷蛋白質(zhì)的混合物，等電點(diǎn)為 ? 利用等電點(diǎn)時(shí)溶解度最低的原理，將牛乳的 pH調(diào)至 ，酪蛋白就沉淀出來 ? 用乙醇洗滌沉淀物，除去脂類雜質(zhì)后便可得到純的酪蛋白
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