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毛細(xì)管電泳法ppt課件-資料下載頁(yè)

2025-05-01 03:29本頁(yè)面
  

【正文】 析學(xué)界高效微分離的趨勢(shì),尤其適用于復(fù)雜生物及化學(xué)體系的研究 樣品在毛細(xì)管柱中的保留行為同時(shí)受到 電泳 及其在流動(dòng)相與固定相之間 分配系數(shù) 的影響 pCEC對(duì)被分離樣品細(xì)微之處的分辯能力得到極大的提高 毛細(xì)管電泳儀 ? 電壓: 0~ 30kV; ? 分離柱不涂敷任何固定液; ? 紫外或激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)器; ( 可檢測(cè)到: 1019~ 1021 mol/L) 儀器流程與主要部件 ( 1) 0~ 30 kV 穩(wěn)定、連續(xù)可調(diào)的直流電源; ( 2)具有恒壓、恒流、恒功率輸出; ( 3)電場(chǎng)強(qiáng)度程序控制系統(tǒng); ( 4)電壓穩(wěn)定性: %; ( 5)電源極性易轉(zhuǎn)換; 2. 毛細(xì)管柱 ( 1)材料:石英:各項(xiàng)性能好;玻璃:光學(xué)、機(jī)械性能差; ( 2)規(guī)格:內(nèi)徑 20~ 75μ m, 外徑 350~ 400μ m; 長(zhǎng)度 =1m 化學(xué)惰性,機(jī)械穩(wěn)定性好; 4. 檢測(cè)器 要求:具有極高靈敏度,可柱端檢測(cè); 檢測(cè)器、數(shù)據(jù)采集與計(jì)算機(jī)數(shù)據(jù)處理一體化; 類型 檢測(cè)限 /mol 特點(diǎn) 紫外 可見(jiàn) 1013~ 1015 加二極管陣列,光譜信息 熒光 1015~ 1017 靈敏度高,樣品需衍生 激光誘導(dǎo)熒光 1018~ 1020 靈敏度極高,樣品需衍生 電導(dǎo) 1018~ 1019 離子靈敏,需專用的裝置; 毛細(xì)管電泳的進(jìn)樣方式 1. 流體力學(xué)進(jìn)樣方式 ( 1)進(jìn)樣端加壓 ( 2)出口端抽真空 ( 3)虹吸進(jìn)樣 進(jìn)樣量:毛細(xì)管長(zhǎng)度的 1%2%;納升級(jí)、非常小 毛細(xì)管一端插入樣品瓶,加電壓; 2. 電動(dòng)進(jìn)樣方式 進(jìn)樣不均 :電歧視現(xiàn)象,淌度大的離子比淌度大的進(jìn)樣量大; 離子丟失 :淌度大且與電滲流方向相反的離子可能進(jìn)不去; 特別適合黏度大的試樣 ; 3. 擴(kuò)散進(jìn)樣 試樣通過(guò)擴(kuò)散作用進(jìn)入分離柱端口處。 應(yīng)用 — 離子分析 陽(yáng)離子分析 遷移方向和電滲流方向一致; 24種金屬離子; 陽(yáng)極進(jìn)樣,陰極檢測(cè); 具有很高的靈敏度; 陰離子分析 陰離子電泳方向和電滲流方向相反、速度接近,分析時(shí)間長(zhǎng)、效率低; 質(zhì)量小、電荷密度大的離子如:SO4 Cl、 F等,電泳速率大于電滲流,陽(yáng)極端流出,在陰極端無(wú)法檢測(cè); 加入電滲流改性劑,十六烷基三甲基溴化胺等,使電泳方向和電滲流方向一致,可在 36種陰離子;陰極進(jìn)樣,陽(yáng)極檢測(cè); 離子價(jià)態(tài)及存在形態(tài)分析; 藥物分析 檢測(cè)體液或細(xì)胞中某些代謝產(chǎn)物的分析; 尿液中的氨基酸含量作為臨床診斷糖尿病的輔助手段; 采用毛細(xì)管區(qū)帶電泳方式,在 11min內(nèi)分離 17種藥物; 氨基酸與蛋白質(zhì)分析 采用 MEKC模式,在 25分鐘內(nèi)分離了 23種丹酰化氨基酸; HPCE可取代傳統(tǒng)的氨基酸分析儀; 問(wèn)題:吸附和檢測(cè);
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