【正文】 2 . 0 0 2 . 5 0 3 . 0 0 3 . 5 0 4 . 0 0 4 . 5 0 5 . 0 0 5 . 5 0 6 . 0 0 6 . 5 0 7 . 0 02.1934.3106.448二極管矩陣檢測(cè)器是在 1982年首度出現(xiàn)的 在整個(gè) UVVis帶寬上檢測(cè)吸光度 都需要相應(yīng)的軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的分析 PDA檢測(cè)器的用途及要求 光電二極管檢測(cè)器可以提供許多又用的功能 光譜信息 色譜峰純度 譜庫(kù)擬合 像其他所有的 UV/Vis檢測(cè)器一樣，需要： 高的信噪比；好的線性 另外；還需要： 光學(xué)分辨率 光譜靈敏度及光譜分析軟件 光學(xué)分辨率（帶寬） 好的光譜分辨率可得到高質(zhì)量的光譜信息 nm Benzene vs 損失分辨率， UV最大波長(zhǎng)移動(dòng) nm nm 190 nm nm 分辨率與色譜性能 高分辨率給出更多數(shù)據(jù)點(diǎn)（同樣波長(zhǎng)范圍） 高分辨率有更好的線性 低分辨率的數(shù)據(jù)文件尺寸較小 寬的光學(xué)帶寬可以得到更高的光通量（靈敏度） AU0 . 0 0 00 . 0 0 10 . 0 0 2nm2 5 0 . 0 0 3 0 0 . 0 02 6 6 . 2AU0 . 0 0 00 . 0 0 10 . 0 0 20 . 0 0 3nm2 5 0 . 0 0 3 0 0 . 0 02 7 1 . 53 1 2 . 1 nm nm PDA的優(yōu)點(diǎn)及缺點(diǎn) 優(yōu)點(diǎn) 通用的 UV/Vis檢測(cè) 好的選擇性、線性 提供色譜峰的 UV/Vis光譜圖（峰確認(rèn)） 可提供純度估計(jì) 缺點(diǎn) 低光學(xué)通量（較窄的帶寬通量） 與普通 UV/Vis相比更復(fù)雜，容易漂移 燈輸出能量隨時(shí)間降低 質(zhì)譜（ Mass Spec.）作為 HPLC檢測(cè)器 m/z +/ MS： 質(zhì)譜（ Mass Spectrometry）是一種按照分子量及其電荷分離物質(zhì)的技術(shù)，經(jīng)過(guò)多年的不斷開(kāi)發(fā)及改進(jìn)，已經(jīng)使質(zhì)譜成為一種多功能、高靈敏度，并被愈來(lái)愈廣泛使用的分析技術(shù)。 LC/MS： 液相色譜與質(zhì)譜的連用。 需要： 除去 HPLC的溶劑；產(chǎn)生離子；分離離子；檢測(cè)離子；計(jì)算離子強(qiáng)度；處理數(shù)據(jù) 除去溶劑 離子化前的準(zhǔn)備： 1. 霧化（ Nebulization） 2. 蒸發(fā)溶劑或解吸附（ Evaporation/ or Desorption） 3. 大氣壓下或減壓下（ Atmosphere or Pressure reduction） 4. 離子化（ Ionization － Ion Source） Liquid Gas LC MS Co(l) C+/(l) C+/(g) Co(g) Evaporation Desorption LC/MS Interface LCMS的離子產(chǎn)生 電子轟擊源（ Electron Impact / Electron Ionization － EI） 大氣壓電離源（ Atmospheric Pressure Ionization － API） 大氣壓化學(xué)電離源（ Atmospheric Chemical Ionization － APCI） 電噴霧源（ Electrospray － ESI） 200 300 400 500 600 700 800 m/z 529 527 233 489 543 APCI(): 40V 100 200 300 400 500 m/z 57 97 147 219 278 515 530 EI OHC H 3CH 3CH 3CH 3C H 3CH 3OO(C H 2 ) 17C H 3LCMS技術(shù)的應(yīng)用 10 410 210 110 310 5LCGC PolarityM o le c u la r We ig htVo latility LCGCE l ec tr o sp ra y (E S I )A P C IEIGC不同離子源的流速范圍 Flow rate, mL/min 0 50 100 Relative intensity APCI Pneumatically assisted ESI ‘Pure’ ESI 流速對(duì) API源的影響 Intensity1x 1062x 1063x 1064x 1065x 1066x 1067x 1068x 106M i nut es 11. 0 0色譜的數(shù)據(jù)類(lèi)型 采集類(lèi)型： – 單離子模式（ SIR） – 掃描模式（ Scan） – 總離子流（ TIC或 BPC） ESI +ve 180400 m/z TIC ESI ve 180400 m/z TIC 極性切換： – 正離子 – 負(fù)離子 離子排序及檢測(cè) 離子排序方式 四極桿（ Quadrupole） 離子阱（ Ion Trap） 飛行時(shí)間（ Time of Flight） 磁質(zhì)譜（ Sector Mass Analyzers） 富里葉變換（ Fourier Transform） 檢測(cè)方式 電子倍增 光電倍增 …… 液相色譜的分離依然重要 0200400600800100012001400160018000 200 400 600 800 1000M o l e c u l a r W e i g h tFrequency of Occurrance標(biāo)稱(chēng)分子量在 250 的化合物的數(shù)量超過(guò)了 1500！ Adapted from: R. Willoughby et al ‘A Global View of LC/MS’, 1998 液相色譜的分離依然重要 Intensity0 . 05 . 0 x 1 051 . 0 x 1 062 9 4 . 2 0Intensity05000002 9 4 . 2 0Intensity01 x 1 062 x 1 06m / z2 4 0 . 0 0 2 5 0 . 0 0 2 6 0 . 0 0 2 7 0 . 0 0 2 8 0 . 0 0 2 9 0 . 0 0 3 0 0 . 0 0 3 1 0 . 0 0 3 2 0 . 0 02 7 8 . 2 2Intensity3 x 1 064 x 1 0 65 x 1 06M i n u t e s0 . 0 0 1 . 0 0 2 . 0 0 3 . 0 0 4 . 0 0 5 . 0 0 6 . 0 0 7 . 0 0 8 . 0 0 9 . 0 0 1 0 . 0 02.4592.8039.572 min min min trans10hydroxyamitriptyline (EHAT) cis10hydroxyamitriptyline (ZHAT) amitriptyline 其他重要的檢測(cè)器 電化學(xué)檢測(cè)器 Electrochemical 電導(dǎo)檢測(cè)器 Conductivity W R C 有機(jī)及無(wú)機(jī)離子 兒茶酚胺 Catecholamines 亞硝胺 Nitrosamines 有機(jī)酸 Organic acids 碳水化合物 Carbohydrates 氨基酸 Amino Acids 特殊的檢測(cè)器 N2/S2 Radiochemical NMR 液相色譜對(duì)數(shù)據(jù)處理最基本的要求 數(shù)據(jù)的采集 數(shù)據(jù)的處理 數(shù)據(jù)的報(bào)告 液相色譜的數(shù)據(jù)處理及其要求 色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng) 一般用戶(hù)所期望的更多功能 儀器控制 采集二維數(shù)據(jù)及 GC的數(shù)據(jù) 可靠且強(qiáng)壯 服務(wù)與支持 用戶(hù)培訓(xùn) 從基本要求的基礎(chǔ)上擴(kuò)展 色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng) 能使用先進(jìn)的檢測(cè)方式及特殊應(yīng)用 光電二極管矩陣（ PDA）、質(zhì)譜（ MS）檢測(cè) 不同領(lǐng)域的應(yīng)用及其特殊計(jì)算 從基本要求的基礎(chǔ)上擴(kuò)展 色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng) 色譜數(shù)據(jù)管理及用戶(hù)自定義計(jì)算、自定義報(bào)告 自定義文檔字段 用戶(hù)自定義報(bào)告 搜索能力 排序能力 綜合計(jì)算 從基本要求的基礎(chǔ)上擴(kuò)展 色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng) 網(wǎng)絡(luò)及系統(tǒng)管理能力 配置規(guī)?？蓴U(kuò)展 災(zāi)難防御與恢復(fù) 系統(tǒng)安全性 開(kāi)放結(jié)構(gòu) 存檔功能 從基本需求的基礎(chǔ)上擴(kuò)展 色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng) 法規(guī)遵從 支持 GXP所要求的工具 軟件的確認(rèn)（ Qualification） 支持電子記錄 支持電子簽名 從基本需求的基礎(chǔ)上擴(kuò)展 色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)