【導讀】一種新型水蛭素及其生產(chǎn)方法。采用全人工合成的方法獲得變異的。HV2全基因，在其5’端上游加入一段合適前導序列。篩選高效表達菌株，經(jīng)優(yōu)化發(fā)酵誘導、分離純化步。驟，提高了重組基因產(chǎn)物的生產(chǎn)效率，產(chǎn)物表達水平和生物學活性，型的大規(guī)模生產(chǎn)和臨床應用的深入研究提供了物質(zhì)來源。進優(yōu)良種源或野外捕捉到健壯的菲牛蛭，進行人工分級分段馴、喂養(yǎng)，血物質(zhì)比其它品種菲牛蛭含量高，藥用效果好，提取水蛭素方法簡單，6-7毫升左右，產(chǎn)品質(zhì)量好，又節(jié)約資源，提高了菲牛蛭的利用價值。在體內(nèi)的壽命，有效血藥濃度維持可達6-24，并有較好的生物利用度，具有潛在新一代口服抗凝藥物的價值。泛，可用于制備治療血栓引起的心腦血管疾病的藥物。栓劑治療的病人，抑制或預防心肌或心血管疾病。治療未經(jīng)溶栓治療的急性心肌梗塞病人的藥物組合物。粉，治療中風、半身不遂、心腦血管疾病，還可制成保健食品。醫(yī)用天然水蛭素的提取方法，涉及動物有效成分的提取。

　　

【正文】 合物 本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，公開了一種藥物組合物及其制備方法和用途，該組合物主要由西洋參提取物、水蛭提取物和紅花黃色素組成，三者可以按如下配比組成： 西洋參提取物 10～ 200 份、水蛭提取物5～ 100 份、紅花黃色素 10～ 200 份；三者可以單獨或與藥用輔料組合，制成臨床上或藥學上可接受的劑型，如注 射劑、口服常釋劑型、緩釋控釋劑型、 顆粒劑、丸劑、口服液體劑等；三藥合用，可協(xié)同發(fā)揮擴張血管、改善心肌血供、抗凝血、抗血栓、抗缺氧、降血脂等藥理作 用，可用于冠心病、心絞痛、腦梗阻、腦血栓等疾病。 以油體蛋白作載體在轉(zhuǎn)基因大豆中生產(chǎn)重組水蛭素的方法 本發(fā)明涉及以油體蛋白作載體在轉(zhuǎn)基因大豆中生產(chǎn)重組水蛭素的方法。將人工合成的、按照植物所偏愛的密碼子優(yōu)化后的水蛭素基因及蛋白酶切割識別信號與油體蛋 白基因進行體外拼接，然后通過轉(zhuǎn)基因途徑以融合蛋白的方式在大豆中表達并定位在大豆油體的表面，從大豆種子中分離出油體及融合改造后的油體蛋白并經(jīng)蛋白酶 進行特異性切割可釋放出有活性的重組水蛭素蛋白。 一種水蛭的真空冷凍干燥方法 本發(fā)明涉及一種水蛭的處理方法，特別涉及一種水蛭的真空冷凍干燥方法。主要解決油炸法破壞水蛭有效成分的技術(shù)問題。本發(fā)明的技術(shù)方案為：一種水蛭的真空冷 凍干燥方法，包括以下步驟：預處理過程：將養(yǎng)殖好的水蛭禁食 2～ 4 天，流水清洗；預凍過程：將已經(jīng)預凍好的水蛭進行切塊，并裝盤；將水蛭的中心溫度降低到 35～45℃℃ ，使其全部凍結(jié)；升華干燥過程：將冷井的溫度降到 46～55℃ ，開始抽真空，當降到 25～ 35Pa時，根據(jù)水蛭的重量，調(diào)節(jié)板層溫 控， 使得水蛭在升華過程中溫度一直低于 25～ 35℃ ，當真空室壓力達到 2～ 5Pa 時，升華過程結(jié)束；解析干燥過程：將板溫設(shè)為25～ 35℃ ，并保持恒 定，當真空室壓力達到 2～ 5Pa時，解析過程結(jié)束。本發(fā)明主要用于水蛭的干燥。 一種水蛭保健藥酒及其生產(chǎn)方法 本發(fā)明公開了一種水蛭保健藥酒及其生產(chǎn)方法，它是由按一定重量份比例的水蛭、枸杞、銀杏葉提取物、蜂蜜和酒，經(jīng)傳統(tǒng)浸泡工藝精制而成；它保存了水蛭中最主 要的有效活性成分 ——天然水蛭素，并可采用凝血酶直接滴定法檢測其含量，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。本保健藥酒具有改善血液循環(huán)、促進新陳 代謝，擴張毛細血管、降低血 液粘度、清除自由基等功效，從而可防治富貴病，解決亞健康的問題。 水蛭素的制取方法 本發(fā)明公開了一種水蛭素的制取方法。該方法不以水蛭蟲體為原料而是將養(yǎng)殖水蛭的水進行處理，以經(jīng)過處理的養(yǎng)殖水蛭的水處理液替代現(xiàn)有工藝中的水蛭提取液來制取水蛭素的制取方法。 水蛭和 /或地龍分子量 5800 道爾頓以下的提取物 本發(fā)明提供一種水蛭和 /或地龍分子量 5800道爾頓以下提取物及其制備方法和藥物組合物、用途。所述的水蛭和 /或地龍分子量 5800 道爾頓以下提取物，在 產(chǎn)品的可見異物和不溶性微粒等方面，明顯優(yōu) 于已有的水蛭和 /或地龍?zhí)崛∥?，產(chǎn)品的安全性也大大提高。本發(fā)明的產(chǎn)品可用于制備預防或治療血栓性疾病的藥物。 一種天然水蛭素有效成分的提取方法 本發(fā)明公開了一種天然水蛭素有效成分的提取方法，是用水清洗吸血水蛭干凈后加入含量 15～ 25％的乙醇水溶液浸泡 3050 小時后，過濾，得濾液和藥渣； 將菲牛蛭藥渣絞碎，再加含量 15～ 25％的丙酮水溶液浸泡，濾過，得濾液，分別將兩次濾液真空回收乙醇和丙酮后，合并濾液，常規(guī)真空冷凍干燥，得到產(chǎn)品。 本發(fā)明工藝簡單、成本低廉，收率較高、產(chǎn)品質(zhì)量好、保存期長，整個生產(chǎn)過程無 “三廢 ”排放，產(chǎn)品作為醫(yī)藥、美容、保健食品三大領(lǐng)域的原料。 一種治療心腦血管疾病的水蛭微粉制劑及其制備方法 本發(fā)明公開一種治療心腦血管疾病的水蛭微粉制劑及其制備方法。將符合國家《藥典》規(guī)定的水蛭藥材 70℃ 以下干燥，在 20℃ 以下超微粉碎成為細度達到 200 目以上的水蛭微粉，加入 010％輔料，混勻填充膠囊，制成硬膠囊；或?qū)⑴c油類輔料混勻的水蛭微粉制成軟膠囊；或?qū)⒒靹蜉o料的水蛭微粉制粒后制成硬膠囊或 片劑；或制成水丸；或制成顆粒劑；或制成滴丸。水蛭微粉制劑治療冠心病心絞痛以及腦梗死等心腦血管疾病的臨床療效與試驗藥效較傳 統(tǒng)的水蛭粉制劑顯著提高。 一種利用陰離子交換柱輔助聚乙二醇修飾水蛭素的方法 一種利用陰離子交換柱輔助聚乙二醇 (PEG)修飾水蛭素的方法，屬于蛋白修飾技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明的特征是采用離子交換柱輔助蛋白進行PEG 修飾。反應 pH為 6～ 9，反應時間 15～ 120min，水蛭素與 PEG摩爾比 1∶ 3～ 1∶ 9。離子交換柱為強陰離子交換柱，帶電基團為季氨基。柱中基質(zhì)為交聯(lián)葡聚糖或瓊脂 糖，基質(zhì)平均粒徑范圍 30～90μm。本發(fā)明的效果和益處是簡化蛋白修飾中反應和分離的步驟，相應減少各個步驟之間樣品的損耗，洗脫水蛭素脫鹽后可以回 收。與傳統(tǒng)的液相方式修飾相比，可以得到體外活性很高的單 PEG 化水蛭素。 一種水蛭提取物及其制備方法與應用 本發(fā)明公開了一種水蛭提取物的制備方法：將水蛭加水勻漿后，經(jīng)可控酶解、有機溶劑沉淀、超濾、陰離子交換層析制得水蛭提取物。該水蛭提取物可用于制備具有 抗凝作用、溶栓作用、抑制血小板聚集作用及神經(jīng)保護作用的藥物。本發(fā)明從中藥現(xiàn)代化的技術(shù)要求出發(fā)，采用可控酶解技術(shù)提取水蛭中的肽類成分，結(jié)合生物制藥 技術(shù)，采用超濾、凝膠層析的分離技術(shù)進一步進行純化，得到了比傳統(tǒng)水蛭提取物純度更高、活性更強的提取物。該方法突破了傳 統(tǒng)動物藥在提取、分離方面的瓶 頸，解決了傳統(tǒng)動物藥以原粉應用時用量大、味道腥臭的問題，進一步提高了動物藥提取物活性和質(zhì)量可控性，大大提高了藥材的利用率。 一種中草藥水蛭在腦血管病的應用及其制備方法 本發(fā)明涉及一種中草藥水蛭在腦血管病的應用及其制備方法，具體地說是以中草藥為原料制備的中成藥，本發(fā)明涉及該藥物的制備方法，它是以天麻、鉤藤、石決 明、地龍、全蟲、水蛭、女貞子、兔絲子、枸杞子、當歸、川穹、菊花、砂仁、神曲、杜仲、甘草為原料，根據(jù)每味中藥的不同特性，分別以凍干或風干粉碎或溶劑 提取，按比例配比，再經(jīng)熟 化，滅菌制成散劑或膠囊劑、丸劑。 水蛭養(yǎng)殖塘防逃裝置 一種用于水蛭養(yǎng)殖塘的防逃裝置，它包括防逃網(wǎng)及固定部，該防逃網(wǎng)的防逃部固定在固定部上，防逃網(wǎng)的主體部分埋在養(yǎng)殖塘的泥土中，固定部突露于養(yǎng)殖塘周圍的泥土表面，并朝養(yǎng)殖塘內(nèi)的方向傾斜。該裝置能有效防止水蛭在人工繁育過程中逃逸現(xiàn)象的發(fā)生，且結(jié)構(gòu)簡單，成本低廉。 水蛭養(yǎng)殖防逃水池 本實用新型提供了一種水蛭養(yǎng)殖防逃水池，所采取的技術(shù)方案是：在養(yǎng)殖水池的周邊砌起圍墻，圍墻中上部向池內(nèi)橫伸出一放滿干燥河沙的平臺，圍墻頂部蓋有向下 斜伸的頂瓦。本實用新型的優(yōu)點：能安全有效 防止水蛭外逃，現(xiàn)防逃率高達 95％以上；用材適宜不受天氣及氣候的影響，經(jīng)久耐用；該設(shè)計實用性強，不但可以安 全防逃， “7”字型專用瓦的設(shè)計既遮蓋平臺上的干沙，同時又遮蓋了養(yǎng)殖池中的泥面，長期保持泥面的濕潤度，有宜于水蛭的產(chǎn)卵繁殖。并為使用者節(jié)約成本，也 省時、省工。 水蛭養(yǎng)殖箱 本實用新型公開了一種水蛭養(yǎng)殖箱，包括一個帶網(wǎng)眼的網(wǎng)狀底，并且還包括一個沿底邊緣向上延伸的網(wǎng)狀壁；在其內(nèi)壁的頂端有向網(wǎng)中心延伸的凸起，防止水蛭爬出 箱體；所述的箱的底與壁的網(wǎng)眼目數(shù)大于 20。該水蛭養(yǎng)殖箱具有有效防止水蛭逃跑、便于養(yǎng)殖、結(jié) 構(gòu)簡單等特點。它適合于廣泛使用在水蛭養(yǎng)殖上。 水蛭防逃逸裝置 本實用新型公開了一種水蛭防逃逸裝置，具有硬質(zhì)防漏水池，防止水蛭從水中或泥土中鉆逃。水池四周邊上采用薄壁迂回原理，分層設(shè)防，用四根長 50 公分木樁， 在距水池角邊緣 50 公分處，向心呈 45176。角插入，取鐵絲在木樁上分底上兩道線繞水池一周固定好；然后用兩塊寬10 公分的塑料薄膜分層斜搭在上下兩道鐵絲 上，周圍密封并固定。木樁下面的池面要填充一定厚度的土，用以保證水蛭產(chǎn)卵。本實用新型取材方便，經(jīng)濟實惠，操作簡單，保證水蛭產(chǎn)卵，易于推廣，地區(qū)適應 性強。