【導讀】到你的權利請與我們聯(lián)系，我們將及時刪除。牡蠣是我國沿海常見的經(jīng)濟貝類，遼寧、山東沿海稱海蠣子，江蘇、浙江稱蠣黃，福建、廣東稱蠔。富，肉味鮮美，干品蠣肉含有蛋白質45％．57％、肝糖19％。產(chǎn)品，很受人們青睞。可加工成罐頭和醬油，鮮蠣湯濃縮后稱“蠔油”，有“天上天下，牡蠣獨尊”之說法。作燒石灰、水泥、電石的原料及禽畜的飼料，有廣泛的用途。蹤跡，目前已發(fā)現(xiàn)有100多種。各國對牡蠣的研究較多，養(yǎng)殖方。牛上蠣屬于軟體動物門，瓣鰓綱，異形亞綱，珍珠貝目，牡蠣科。合部無齒，或具結節(jié)狀小齒。單柱類，二孔型，無水管，內韌帶。我國沿海約有20余種，主要的養(yǎng)殖。兩殼面環(huán)生薄而平直的黃褐色或暗紫色鱗片，隨年齡增長。形或腎臟形，位于中央背側。貝殼小型，薄而脆，大多為三角形。閉殼肌痕黃褐色，卵圓形，位于背后方。又稱長牡蠣、日本真牡蠣。右殼較平，鱗片堅厚，環(huán)生鱗片呈波紋狀，排列稀。殼內面白色，殼頂內面有寬大的韌帶槽。

　　

【正文】 次。幼蟲在培育過程中每 2~3 天用吸底器吸污一次， 在幼蟲發(fā)育到殼頂初期 (120 微米 )和剛出現(xiàn)眼點時各倒池一次。 ④幼蟲篩選：由于牡蠣幼蟲的生長期長，可達 20 天左右，在這 20 天里，幼蟲生長發(fā)育出現(xiàn)生長差異，大小不同，從而影響采苗效果。若幼蟲個體相差太大時，應進行篩選，采用不同規(guī)格的篩絹做成的網(wǎng)箱篩出不同規(guī)格的幼蟲分池培養(yǎng)。 (7)投放附著基 ①附著基的投放時機：當眼點幼蟲達到 40％以上時，便可投放附著基，一般采用貝殼作附著基，在扇貝殼或牡蠣殼中間穿上孔，用細塑料繩穿著，根據(jù)育苗池的深淺確定長度，懸掛在水池中，一般每立方米水體投放 5 000 片左右。貝殼投放前， 要用稀 第 37 頁 共 72 頁 鹽酸浸泡后洗刷干凈。 育苗場培育的眼點幼蟲，可以運輸?shù)狡渌纳a(chǎn)單位進行采苗。將眼點幼蟲過濾出來，用紗布包裹起來保持一定的濕度，置于泡沫塑料箱中，利用塑料袋在箱內分置冰塊進行運輸。 ②投附著基后的管理工作 a．投放附著基后要立即大換水，確保幼蟲處于良好的水環(huán)境中，防止幼蟲因投附著基后環(huán)境變化大而造成幼蟲下沉和死亡，使育苗失敗或不理想。 b．牡蠣幼蟲在貝殼上附著達到要求 (100 個／片 )后，采用網(wǎng)箱濃縮法，把幼蟲移入另池培養(yǎng)，繼續(xù)投附著基進行二次采苗?；驅⒏街恳频搅硗獾乃乩^續(xù)培養(yǎng)，原池流水改善水質后，可以再次投放附著基進行二次采苗。二次采苗的意義不僅能提高附苗量，增加稚貝的生長速度和存活率，而且能使附著基附苗均勻，對稚貝以后的生長發(fā)育有利。 c．投附著基后，幼蟲在貝殼上附著不均，有的多，有的少或無，一般上面多下面少，所以投附著基的池子要微量充氣，讓幼蟲在池子分布均勻；光線要均勻并弱，光照強度在 300 勒克斯以下；長流水和換水要經(jīng)常變動方位或移動附著基的位置；對不同水層，可把附著基定期上下顛倒，以上措施可保證牡蠣苗附著均勻。 第 38 頁 共 72 頁 3．單體牡蠣人工育苗術 所謂單體牡蠣，是指牡蠣呈游離狀態(tài)，在不固著的情 況下就能正常生活。 牡蠣具有群聚的生活習性，常多個固著一起，不僅造成牡蠣間的食物競爭，影響其生長速度，而且由于生長空間的限制，大小相差懸殊，殼形極不規(guī)則，在牡蠣苗種生產(chǎn)過程中，固著基的搬運需要花費大量的人力物力。近年來，為了提高養(yǎng)殖牡蠣的商品價值和產(chǎn)量，國內外一直在研究一種生產(chǎn)單體牡蠣苗種的方法。單體牡蠣無固著基，其生長不受空間限制，殼形規(guī)則，大小均勻，易于裝運、放養(yǎng)、收獲和加工。單體牡蠣深受國內外的歡迎，商品價值高，在美國每 0． 5 公斤帶殼牡蠣為 8 美元。因此，單體牡蠣養(yǎng)殖具有廣闊的發(fā)展前途。目前，單體牡蠣的 苗種生產(chǎn)主要有物理和化學兩種方法。 (1)物理方法 ①先固著后脫基法：使用易彎曲的材料作采苗器，如塑料薄板、聚丙烯包裝帶等，待牡蠣固著后，生長到 0． 5 厘米左右時，通過彎曲使之從采苗器上脫落，從而獲得單體牡蠣。 ②顆粒固著基法：采用微細的貝殼碎屑或其他微粒作幼蟲的固著基。顆粒的大小一般為附著幼蟲的殼長，如以 0． 3～ 0． 5毫米的貝殼粉或細沙粒作為附著變態(tài)幼體的固著器，直接獲得單體牡蠣。 第 39 頁 共 72 頁 物理方法簡單易行，但需要特殊的固著基，根據(jù)固著基使用的材料不同，脫基時稚貝須長到一定的大小，過早脫基容易損傷稚貝。 物理方法除 使用的固著基不同以外，其他的苗種培育過程與常規(guī)育苗方法相同。 (2)化學法用化學藥品誘導牡蠣的眼點幼蟲不固著著而變態(tài)，從而形成單體牡蠣，目前有效的誘導藥物為腎上腺素 (EPI)和去甲腎上腺素 (NE)。以誘導太平洋牡蠣為例，當幼體即將附著變態(tài)時，將幼蟲用 100 目篩絹濃縮在水槽中，密度在每毫升 100 個左右，向水體中加人最終濃度為 10 摩爾／升的腎上腺素，持續(xù)處理時間為 1 小時，處理結束后，用篩絹濃縮沖洗，移人用 100 目篩絹制成的網(wǎng)箱中暫養(yǎng)。經(jīng)腎上腺素處理的幼蟲立即下沉，并開始變態(tài)，當處理幼蟲密度較大時，為防止互相重疊 積壓造成缺氧死亡，須連續(xù)充氣。 誘導變態(tài)率與誘導時幼蟲的發(fā)育階段有關，腎上腺素誘導幼蟲變態(tài)必須是眼點明顯，足部發(fā)達，剛出現(xiàn)眼點的幼蟲不能誘導變態(tài)。在人工苗種生產(chǎn)過程中，牡蠣幼蟲間的生長差異是客觀存在的，適當降低培育密度，保證足夠合適的餌料和水質條件，可縮小幼蟲間的生長差異，培育出較整齊的眼點幼蟲，必要時可通過篩選，使幼蟲的發(fā)育階段基本同步，這是使用腎上腺素誘導獲得較高變態(tài)率的前提，發(fā)育整齊的眼點后期幼蟲，經(jīng)處理后的變態(tài)率在 80％以上。藥物處理后的幼蟲經(jīng)沖洗移人 100 目的網(wǎng)箱內第 40 頁 共 72 頁 暫養(yǎng)一段時間，根據(jù)不同大小裝入 30~40 目的網(wǎng)袋在海上進行中間育成至苗種規(guī)格。 這種單體牡蠣的苗種生產(chǎn)方法與傳統(tǒng)的牡蠣育苗方法有很大不同，傳統(tǒng)的育苗工藝采用貝殼等采苗，附著基的處理、串著、搬運需耗費大量勞動力，由于附著基的體積較大，在培育池中也不能充分投放。另外，在每個貝殼上附著的稚貝又不能太多，單片的稚貝太多，下海后影響生長，并給筏式養(yǎng)殖帶來不便。因此，單位水體的出苗量有限。使用腎上腺素誘導的方法生產(chǎn)單體牡蠣，單位水體出苗量的潛力很大，稚貝在重疊積壓的情況下，只要滿足充氣條件，稚貝可以正常生長。 4．三倍體牡蠣育人工育苗 所謂三 倍體牡蠣是指每個體細胞中含有三個染色體組的牡蠣。一般情況下，真核生物在形成配子的過程中，經(jīng)過兩次成熟分裂過程，即染色體復制一次，細胞分裂兩次，形成四個子細胞，每個子細胞中所含染色體數(shù)目減半，成為單倍體配子。雌雄配子結合使染色體得以重組，恢復到原來的二倍體，從而保持了生物個體遺傳上的穩(wěn)定性和延續(xù)性。 牡蠣的雄性配子細胞在性成熟過程中已經(jīng)完成了兩次成熟分裂。它首先一分為二成為兩個精母細胞，這些精母細胞然后又一分為二，成為精子細胞，每一個精子細胞只含有親本 (母本或父本 )一半的染色體數(shù)。精子細胞成熟發(fā)育為精子。 第 41 頁 共 72 頁 在 雌性個體中，成熟的卵子一般停留在第一次成熟分裂的前期或中期，只有在受精或受激活后才完成兩次成熟分裂。不過，與雄性配子細胞不同的是，雌性配子細胞并不最終產(chǎn)生四個相同的細胞，并且每一個細胞只含有一套染色體。相反，卵母細胞在其第一次成熟分裂的時候排出第一極體，第一極體含有細胞半數(shù)的染色體 (2N)，緊接著卵母細胞開始第二次成熟分裂，排出第二極體，第二極體只含有所剩兩套染色體中的一套，于是，卵子象精子一樣只含有一套染色體 (1N)。當精卵結合后就產(chǎn)生二倍 體個體。 雌性配子細胞的成熟分裂過程可以通過溫度、壓力、化學藥品 等方法進行控制，抑制極體的排出，得到含有三套染色體的合子，合子繼而發(fā)育成三倍體。三倍體貝類的生長不需要特殊的維護，雖然發(fā)育階段開始時死亡率較高，但是最終三倍體的幼蟲會像二倍體一樣生長。 目前，多倍體育種是海洋經(jīng)濟動物育種研究的熱點，這種育種方法具有見效快，效率高，目的性強等優(yōu)點，因此，引起了人們的廣泛關注。在海洋經(jīng)濟動物方面，當前主要進行的是三倍體育種研究。 (1)三倍體牡蠣的主要特點從細胞遺傳學角度來看，三倍體是非偶數(shù)染色體組，故阻礙了生殖細胞正常的減數(shù)分裂，結果常常導致性腺發(fā)育的衰退或非整倍體配子的產(chǎn)生 。三倍體最明顯的優(yōu)第 42 頁 共 72 頁 勢在于其具有不育性，使其只有極少能量用于性腺發(fā)育，更多的能量用于生長。因此，在養(yǎng)殖生產(chǎn)過程中，當生殖輸出引起產(chǎn)品質量下降，死亡率升高及阻礙生長時，三倍體變會顯示出它的優(yōu)越性?？杀苊庑韵侔l(fā)育階段的生長停滯和死亡率增加；縮短養(yǎng)殖周期，降低養(yǎng)殖成本；提高養(yǎng)殖種類的商品質量。三倍體牡蠣具有如下突出特點。 ①生長快：太平洋牡蠣二倍體在繁殖季節(jié)里由于精卵的排放，體重明顯下降 (下降 64％ )，殼的生長停止，而三倍體則保持繼續(xù)生長，養(yǎng)殖一年的三倍體太平洋牡蠣軟體重比二倍體增加 25％。在幼貝期間，三倍體的殼長 生長快于二倍體；至成體后，二者在殼的生長方面差異不顯著，但在重量方面差異較大。三倍體群的體重生長明顯快于二倍體對照組群體，比二倍體群體重增加16％～ 42％。繁殖高峰過后，二倍體由于大量排放精卵，軟體重明顯降低，而三倍體群變化不明顯，二者軟體重的差異達到最高值。繁殖季節(jié)過后，隨著二倍體的恢復和生長，三倍體與二倍體間生長差異有所降低。 ②育性差：從外觀上看，三倍體太平洋牡蠣的性腺都能發(fā)育，并能產(chǎn)生配子，但發(fā)育程度較差，雄性的性腺發(fā)育程度僅為二倍體的 1／ 2，而雌性的卵巢發(fā)育程度僅為正常二倍體的 1／ 4。牡蠣在繁殖季 節(jié)由于產(chǎn)卵、排精等活動，軟體消瘦，品質受到較大的影響；牡蠣隨著性腺的發(fā)育，體內糖原含量下降，品味受到較大的影響，三倍體牡蠣由于性腺發(fā)育程度差，周年保持較高水平 第 43 頁 共 72 頁 的糖原含量，一年四季鮮美肥滿，深受消費者的喜愛。 ③ 抗逆性強：對一齡太平洋牡蠣進行比較，在適溫高限 (30度 )，三倍體的死亡率僅為正常牡蠣的一半左右。在繁殖季節(jié)，三倍體死亡率明顯降低，這種情況與三倍體育性差、體內一直保持較高含量的糖水平有直接的關系。 (2)三倍體牡蠣的誘導方法牡蠣卵子細胞成熟分裂的過程可以通過物理、化學或生 物的方法進行控制，使卵子保留第一或第二極體，卵子包含的兩套染色體組與精子的一套染色體組結合，得到含有三套染色體組的合子，進而發(fā)育成三倍體牡蠣。 通過抑制第一極體途徑獲得的三倍體，由于染色體在第二次成熟分裂過程中分離的復雜化，三倍體率、胚胎的孵化率和幼蟲的成活率都很低，不適合于大規(guī)模生產(chǎn)。因此，目前三倍體的誘導多采用抑制第二極體的方法。 ①常用的物理方法：有溫度休克和靜水壓等。溫度休克包括熱休克和冷休克，主要是引起細胞內酶構型的變化，不利于酶促反應，導致細胞分裂時形成紡錘絲所需 ATP 的供應途徑受阻，使細胞不能 隨染色體的加倍而分裂，從而形成三倍體。使用的溫度一般是在該物種生存溫度范圍的上下限附近，如利用 4～ 5℃低溫抑制大連灣牡蠣第二極體排出，幼貝的三倍體率為 64％，這種方法比較節(jié)省，效果也較好。 利用水靜壓設備對受精卵施加一定的壓力，主要是抑制紡錘第 44 頁 共 72 頁 體的微絲和微管的形成，中止染色體的移動，從而抑制細胞的分裂，阻止了極體的排出。對太平洋牡蠣采用 200~250 公斤／平方厘米的壓力，處理受精卵 10 分鐘左右，三倍體率為 57％。 ②化學方法：常用的化學藥品主要有：細胞松弛素 B(簡稱 CB)、6~二甲氨基嘌呤 (簡稱 6~DMAP)等。 CB 是真菌的一類代謝產(chǎn)物，具有抑制胞質分裂過程的效應。在細胞分裂過程中，胞質分裂溝的形成，是細胞質周邊一個由微絲構成的“收縮環(huán)”緊縮的結果，最終導致兩個子細胞分開。 CB具有特異性地破壞微絲的作用，使“收縮環(huán)”解體，通過阻止分裂溝的形成，抑制細胞質分裂，阻止極體的排出。但 CB 并不影響細胞核的分裂和染色體的分離。有效濃度為 0． 2~1． 0 毫克／升，一般溶解在等量的二甲亞砜中使用。 CB 是誘導貝類多倍體的有效藥物，在所有已開展的貝類多倍體研究中被廣泛使用。但 CB是一種劇毒化學藥物，經(jīng) CB 處理后的胚胎死亡率很高。 6~DMAP 是嘌呤霉素的一種類似物，主要作用是通過對磷酸化激酶的抑制，抑制一系列有磷酸激酶參與的生化反應和細胞功能，如抑制極體的形成和釋放等。太平洋牡蠣卵子受精后 15 分鐘，用 450 微米的 6~DMAP 持續(xù)處理 10 分鐘，三倍體率為 85％，D 型幼蟲率為 64％。由于 6~DMAP 低毒、高效、價廉，處理后不需洗卵去除藥液可直接人池孵化，孵化率達 70％左右，幼蟲發(fā)育及存活率與二倍體對照組無明顯差異，最近在貝類多倍體誘導中代替 CB 被廣泛應用。有效使用濃度為 200~600 微米。 第 45 頁 共 72 頁 ⑧生物方法：通過四倍體與二倍體雜交得到了 100％的三倍體太平洋牡蠣，無論是正反交，得到的后代均是三倍體。這項研究結果表明，在貝類中采用四倍體與二倍體雜交是生產(chǎn)三倍體的最佳途徑。 (3)影響牡蠣三倍體誘導結果的幾個重要因素 ① 適宜誘導參數(shù)的確定：在多倍體誘導過程中，選擇有效的技術途徑和誘導方法是誘導成功的關鍵。在此基礎上確定適宜的處理強度、起始處理時間和持續(xù)處理時間。 處理強度以能夠抑制極體釋放的最小劑量為好，最大限度地減少抑制處理帶來的負面影響。 起始處理時間的確定需要對處理種類的受精卵早期發(fā)育過程進行詳細了解，受精卵早 期發(fā)育過程包括胚泡破裂，極體形成及分裂等。這些過程的出現(xiàn)標志著受精卵發(fā)育過程的生物計時。一般說來，直接觀察受精卵的發(fā)育速度，以極體出現(xiàn)的百分率作為處理時機的生物時間指標是一個有效的方法，這種生物學指標比較客觀地反應了受精卵的發(fā)育進程。 持續(xù)處理時間尚無法找到一個可遵循的生物學指標，對藥物處理來說通常為 15~20 分鐘。 處理強度和持續(xù)處理時間之間有一定的聯(lián)系，在一定范圍內高強度短時間的處理及較低強度的長時間處理有時會得到相同的誘導結果。 第 46 頁 共 72 頁 ②受精卵發(fā)育的同步性：人工誘導多倍體是針對受精卵發(fā)育的特定階段進行的人為 干預，因此，受處理的卵彼此之間保持發(fā)育的同步性是提高誘導率的前提條件。受精卵發(fā)育的同步性主要與卵子的質量有關，充分成熟的親貝產(chǎn)出的卵子同步性較高。卵子的質量與卵子的脂