elisa灰區(qū)的設(shè)置與質(zhì)控方法-資料下載頁
2025-04-07 05:35本頁面
【正文】 6750150—3553860045—264607154155—4557866350—184787434160—6563875655—134917636165—3566880260—64977729170—7573891165—55027807175—4577897470—85107932180—11588914575—35137978185—10598930080—25158009190—7605940985—45198072195—6611950290—25218103200—5616958095—25238134205—96259720100—25258165210—106359876105—45298227215—36389992110—35328274220—56431000 表4 抗HCV陽性樣本稀釋Cov值 稀釋倍數(shù) 樣本編號12345678910111213均值1：107068195778638895486954353286364967808556641：206634733386605704564414251743932385387244721：405112791586094902793845840941912254787043841：603862221366043811413784840540901394225393061：803141330983462191113463380310920922084292121：1002191080763111540692472990210450371612391531：1201860880732011090691892270250360270711291121：1401260690612060940560941660110330210361110831：1601010640541850960550541560090210110310550691：1801040680331060650480391490080170170270490561：2000790490250850450300301120090110150250380431：2200680480270690500320231040080130090220240381：240056034021055045040024087009010012017030034 由表4結(jié)果，分別對各樣本不同稀釋倍數(shù)的檢測結(jié)果繪制抗HCV陽性樣本稀釋Cov曲線圖，并對相同稀釋倍數(shù)的不同樣本計算平均值繪制抗HCV陽性樣本稀釋Cov平均值曲線圖，結(jié)果見圖3。由結(jié)果可知，陽性樣本，經(jīng)過稀釋，最終使篩查實驗無法檢出。但是，陽性樣本稀釋到一定程度，雖然Cov值持續(xù)下降，結(jié)果呈陰性反應(yīng)，在陽性和陰性結(jié)果轉(zhuǎn)換期間，曲線總體趨勢逐漸由陡峭到平坦，進入1個相對穩(wěn)定的平臺期。統(tǒng)計表4中Cov均值＜20的數(shù)據(jù)，Cov平均值=073s=04平均值+2s=1552。 圖3 抗HCV陽性樣本稀釋Cov平均值圖3 討論 綜合陰性、陽性樣本和陽性稀釋樣本統(tǒng)計數(shù)據(jù)，兩者灰區(qū)范圍結(jié)果吻合，均在070左右，該值遠高于多數(shù)陰性樣本Cov值（表2結(jié)果中9448%的陰性樣本Cov值＜070），足以區(qū)識陰陽性，可以作為分界線，彌補ELISA試劑盒單純以cut off值判斷陰陽性的缺陷，因此把篩查結(jié)果Cov值下浮30%范圍視為“灰區(qū)”較為合適。對該區(qū)樣本需要增補試驗聯(lián)合檢測，以防漏檢。 把“灰區(qū)范圍”設(shè)置為30%，處于該區(qū)域內(nèi)的樣本占本項研究全部樣本的049%，“灰區(qū)范圍”內(nèi)的這些樣本經(jīng)文中方法鑒定后的真陽性率為100%。由此表明確實存在灰區(qū)樣本漏檢情況發(fā)生，故而有必要對這些樣本進行確認。而處于“灰區(qū)范圍”內(nèi)的樣本僅占全部樣本的049%，即便增加試驗聯(lián)合檢測，也不會過多增加工作量，在實際工作中是現(xiàn)實可行的。另外，結(jié)果不一致的樣本，Cov平均值、s和Cov平均值+2s分別為2107367，從而表明結(jié)果不一致的樣本多為弱陽性樣本，一般情況下Cov值＜40。在常規(guī)檢測過程中，可能會有一些陽性樣本，由于抗體濃度較低而出現(xiàn)假陰性結(jié)果的現(xiàn)象。所以，設(shè)置1個適當?shù)摹盎覅^(qū)范圍”，對處于該范圍的樣本做進一步的檢測，采用多種試劑聯(lián)合檢測，只有當結(jié)果均為陰性時方可發(fā)出檢驗報告，必要時需再次取樣隨訪調(diào)查，以避免漏檢現(xiàn)象的發(fā)生。 一般而言，HCV能夠誘導(dǎo)機體產(chǎn)生幾乎針對所有結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白的抗體應(yīng)答反應(yīng)，在出現(xiàn)臨床癥狀的HCV感染者中，約有50%—70%的患者可檢出抗HCV，且隨著感染的持續(xù)而逐步增強，慢性感染者抗HCV IgG的親和力通常較強并能持續(xù)存在［1］。在臨床上也會發(fā)現(xiàn)抗HCV陽性，但HCV RNA為陰性的背離現(xiàn)象。在初篩抗HCV為反應(yīng)性的情況下，HCV RNA的PCR檢測結(jié)果如果為陰性，并不能證明該樣本為陰性，故無法排除文中抗HCV復(fù)檢為陰性是由于試劑或其他原因所致的漏檢。另外，初、復(fù)檢同時為反應(yīng)性的樣本也不一定為真陽性，文中由于方法的局限性，無法對這些樣本進行確證，只能暫時依據(jù)HCV RNA檢測結(jié)果來區(qū)分這些樣本。 國產(chǎn)抗HCV檢測試劑存在一定的漏檢和誤檢現(xiàn)象，直接影響結(jié)果的準確判斷。用于HCV感染診斷的試驗結(jié)果必須盡可能準確，因為這牽涉到伴隨HCV感染而產(chǎn)生的醫(yī)學(xué)倫理、法律以及社會學(xué)等方面的問題，特別對于血站系統(tǒng)，該檢測結(jié)果直接決定該份血液是否能夠安全用于臨床。雖然第三代抗HCV檢測試劑是高靈敏，特異和可重現(xiàn)的，但是仍然沒有能夠排除假反應(yīng)結(jié)果。一方面在低流行區(qū)或低危人群中，建立增補試驗或聯(lián)合檢測方法，對初篩試驗中呈反應(yīng)性的樣本進行確證，以控制假陽性率；另一方面，在目前情況下，設(shè)置合適的“灰區(qū)范圍”，將處于“灰區(qū)范圍”的樣本作為可疑樣本（被技術(shù)認為陰性卻含有較高OD值讀數(shù)的樣本）進行復(fù)檢，能減少假陰性結(jié)果的產(chǎn)生。建議有條件的血站以核酸檢測方法作為增補試驗，再次進行聯(lián)合檢測，能增強發(fā)現(xiàn)早期感染（血清陽轉(zhuǎn)）的機會，把這些獻血者盡早識別出來，以便于通知其本人或?qū)ζ溲遛D(zhuǎn)化進程加以監(jiān)測，對控制和預(yù)防HCV 的傳播具有重要的意義。歡迎您的光臨，！希望您提出您寶貴的意見，你的意見是我進步的動力。贈語； 如果我們做與不做都會有人笑，如果做不好與做得好還會有人笑，那么我們索性就做得更好，來給人笑吧！ 現(xiàn)在你不玩命的學(xué)，以后命玩你。我不知道年少輕狂，我只知道勝者為王。不要做金錢、權(quán)利的奴隸；應(yīng)學(xué)會做“金錢、權(quán)利”的主人。什么時候離光明最近？那就是你覺得黑暗太黑的時候。最值得欣賞的風(fēng)景，是自己奮斗的足跡。壓力不是有人比你努力，而是那些比你牛幾倍的人依然比你努力。學(xué)習(xí)資
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