【正文】 產(chǎn)生速率。 ? (三 ) 營養(yǎng)物質(zhì)的吸收和排泄 ? 用放射性同位素示蹤技術(shù)研究物質(zhì)在胃腸道的吸收情況，可活體內(nèi)進(jìn)行也可在離體條件下研究。在活體的情況下，可標(biāo)記物質(zhì)于動物空腹時引入胃腸道內(nèi)，經(jīng)不同時間采取血液、尿液、糞便等樣品進(jìn)行測定。計算物質(zhì)的吸收率，達(dá)到峰值的時間、生物的利用率等。 ? (一 ) 生殖研究 ? 畜禽的生殖活動受到激素的控制與調(diào)節(jié)，放射免疫分析及相關(guān)技術(shù)為生殖激素的精確測定提供了有效的方法，可評價和控制家禽的繁殖 ? 發(fā)情期鑒定： ? 測定家禽發(fā)情周期血漿和乳汁的孕酮水平可作為發(fā)情鑒定的理論依據(jù) ， 有的動物發(fā)情外表癥狀不明顯 ， 通過孕酮的放射免疫測定可以確定黃體的分泌活動狀態(tài)是否處于發(fā)情期 ， 從而確定人工授精的適宜時間 。 大量分析測定結(jié)果表明 ， 發(fā)情時孕酮水平最低 ， 受精前確定孕酮水平可以確定母畜是否真正發(fā)情 ， 如果孕酮水平高 ， 表明不處于發(fā)情期 。 ? 妊娠診斷： ? 根據(jù)血液和乳汁孕酮水平可進(jìn)行母畜妊娠的早期診斷 ， 可減少空懷孕 ， 增加產(chǎn)犢數(shù)量 。 診斷依據(jù)是正常為受孕奶牛乳汁及血清中的孕酮含量呈周期變化 ， 而一旦受孕 ， 其規(guī)律性即發(fā)生變動 。 ? (五 ) 疾病診斷 ? 生殖機(jī)能異常的診斷 ? 利用放射免疫分析法對血或乳中孕酮等激素進(jìn)行監(jiān)測，能對奶牛卵巢機(jī)能性疾病，如卵巢囊腫，子宮積膿，死胎干縮，不孕異常等異常疾病進(jìn)行診斷，并可在治療過程中了解療效進(jìn)展。 甲狀腺功能的檢查 ? 甲狀腺是動物機(jī)體重要分泌器官之一，它所分泌的激素參與蛋白質(zhì)，脂肪，糖等代謝。會引起整個機(jī)體發(fā)生一系列病理變化，如果功能異常，會導(dǎo)致生長，生殖，泌乳等過程障礙。 ? 1. 肝臟功能的測定 ? 通常用 131I標(biāo)記的玫瑰紅鈉測定肝臟的功能。當(dāng)這種物質(zhì)被注入血中后，即為肝臟的多角細(xì)胞所吸收后、分泌，通過膽道系統(tǒng)進(jìn)入十二指腸，隨糞便排出體外。用一準(zhǔn)直閃爍探頭測定頭部或腿部的放射性，可以獲得這種染料自血中定量清除的數(shù)據(jù)，從而可以對肝臟多角細(xì)胞的功能作出估計。 ? （ 1） 使動物空腹 ， 保定后 ， 將一個準(zhǔn)直閃爍探頭對準(zhǔn)頭側(cè)右耳 ， 另一個探頭對準(zhǔn)腹部臍下位置 。 ? （ 2） 測出每個探頭對準(zhǔn)部位的本底 。 ? （ 3） 經(jīng)靜脈一次注入 131I— 玫瑰紅生理溶液 ， 劑量約數(shù)10μ Ci（ 視動物大小 ） ， 溶液總量約數(shù) ml。 ? （ 4） 交替測量每個探頭位置的放射性約 30min。 ? （ 5） 在 30min之末，給動物灌喂標(biāo)準(zhǔn)脂肪食物（數(shù)百 ml全乳），用腹部探頭再測定 30~60 min。 如果擔(dān)心胃排空延遲，也可靜脈注射縮膽囊素（ 20ml生理鹽液中含 3mg），以代替灌喂脂肪食物。 ? （ 6） 將所測得的計數(shù)率畫在半對數(shù)圖紙上 。 ? （ 7）探頭對準(zhǔn)頭側(cè)右耳的計數(shù)能反映放射性示蹤物從血中清除的情況，此清除速率可用注射 131I— 玫瑰紅鈉 20 min所得計數(shù)率與注射后 5min的計數(shù)率的比值來表示。 ? （ 8）在半對數(shù)圖紙上所畫腹部的計數(shù)率可用肉眼直接觀察判斷。 ? 第五節(jié) 核素示蹤技術(shù)在生物技術(shù)中的應(yīng)用 ? 生物技術(shù) (biotechnology) 又稱生物工程是以生命科學(xué)為基礎(chǔ) ， 利用生物體系和工程原理生產(chǎn)生物制品和創(chuàng)造新物種的綜合性科學(xué)技術(shù) 。 主要包括基因工程 、 細(xì)胞工程 、 酶工程和發(fā)酵工程四個部分 ,其中以基因功能工程研究最為活躍 。 目前生物技術(shù)發(fā)展極為迅速 ， 并已廣泛的滲透到基礎(chǔ)研究 、 工農(nóng)業(yè)生產(chǎn) 、 醫(yī)藥衛(wèi)生等各個領(lǐng)域 ，成為當(dāng)今世界新技術(shù)革命的支柱之一 。 ? 核素示蹤技術(shù)（同位素技術(shù)）作為重要的研究手段其發(fā)展與分子生物學(xué)和生物技術(shù)的發(fā)展始終密切相關(guān)，并對生物技術(shù)的發(fā)展起著巨大的推動作用。 ? 一 . 核酸分子雜交 ? 核酸分子雜交 (nucleic acid mo1ecular hybridization)是基因工程中重要的研究方法，也是生物化學(xué)、分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)中應(yīng)用最廣泛的技術(shù)之一，還是現(xiàn)階段定性、定量和定位檢測 DNA與 RNA序列片段必須掌握的基本技術(shù)與方法。它是根據(jù)異源單鏈核酸分子間因結(jié)構(gòu)互補(bǔ)發(fā)生共價鍵結(jié)合形成互補(bǔ)雜合雙鏈而進(jìn)行分子遺傳學(xué)研究的一種技術(shù)。 ? (一 ) 斑點(diǎn)雜交 (dot— blot hybridization) ? 斑點(diǎn)雜交又叫打點(diǎn)雜交。其操作為先將待測核酸(變性 DNA或 RNA)樣品直接點(diǎn)在硝酸纖維素膜上．經(jīng)干烤固定后，與同位素或生物素標(biāo)記的探針進(jìn)行固相雜交，雜交后放射性雙鏈 DNA可使 x光膠片感光，形成自顯影斑點(diǎn)。斑點(diǎn)雜交的主要特點(diǎn)是事先不用限制性內(nèi)切酶消化或凝膠電泳分離核酸樣品，操作簡便，靈敏度高。但此法的不足是無法知道雜交片段的大?。磯A基的對數(shù)）。 ? (二 ) 原位雜交 (in site hybridization) ? 原位雜交可以廣泛的用于細(xì)菌、病毒和高等生物，細(xì)菌的原位雜交是將培養(yǎng)基上長出的菌落通過影印方法轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上，堿變性破壞細(xì)菌細(xì)胞壁使其釋放出 DNA， 并作變性處理，使雙鏈DNA解鏈，經(jīng)干烤固定后，用同位素標(biāo)記的探針進(jìn)行雜交，最后放射自顯影。如果底片上出現(xiàn)蝌蚪狀黑點(diǎn)，即證明相應(yīng)的菌落中具有與探針 DNA同源的核酸片段。應(yīng)用細(xì)菌原位雜交方法來篩選和鑒定重組 DNA克隆的菌落有很大的實(shí)際意義，在技術(shù)上與斑點(diǎn)雜交相似。 ? (五 ) 利用核素示蹤技術(shù)研究轉(zhuǎn)基因植物對重金屬和農(nóng)藥的超積累 ? 轉(zhuǎn)基因食品安全性的評價包括主要營養(yǎng)成分比較 、毒理試驗(yàn) 、 過敏性分析和標(biāo)記基因的安全性等幾個方面 ,對后三者的評價目前報道較多 。 轉(zhuǎn)基因食品是否存在營養(yǎng)結(jié)構(gòu)與化學(xué)成分的變化已成為其食品安全性評價的熱點(diǎn) 。 英國皇家學(xué)會報告稱 ,轉(zhuǎn)基因技術(shù)可能導(dǎo)致不可預(yù)測的食物營養(yǎng)結(jié)構(gòu)改變 ,從而給人類健康帶來危害 。 ? 國內(nèi)外數(shù)十年的研究表明 ,同位素示蹤技術(shù)在農(nóng)藥等農(nóng)用化學(xué)物質(zhì) (小分子 )的環(huán)境行為與歸趨以及Ｎ、Ｐ和Ｃ養(yǎng)分循環(huán)等研究中具有常規(guī)方法無法比擬的技術(shù)優(yōu)勢 ,尤其在農(nóng)用化學(xué)物質(zhì)結(jié)合殘留研究中不可或缺。通過對外源基因及其表達(dá)產(chǎn)物等生物大分子進(jìn)行同位素 (125Ｉ、 32Ｐ、 33Ｐ和14Ｃ等 )標(biāo)記 ,并綜合運(yùn)用同位素示蹤動力學(xué)、分子生物學(xué)和現(xiàn)代儀器分析技術(shù) ,有助于闡明常規(guī)方法在轉(zhuǎn)基因植物的生態(tài)風(fēng)險性評價研究中無法解決的科學(xué)難題。