緒論醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)-資料下載頁
2025-01-18 02:19本頁面
【正文】 DNA中有無該基因或該基因是否發(fā)生了變化 ， 從而作出診斷 。 （ 基因探針 ） 是一段與目的基因相互補(bǔ)的核酸序列 （ DNA或 RNA） ， 其長度不一 ， 可為完整基因亦可為其一部分 。 ：單鏈 ， 帶有容易被追蹤和檢測出來的標(biāo)記 。 ：單堿基改變的檢測 。 57 ?目前可孕前診斷的單基因病 PraderWilli綜合征 (PWS)、 性畸形 (SRY基因診斷 )、 X染色體連鎖魚鱗病 、 Duchenne肌營養(yǎng)不良（ DMD） 、 脆性 X染色體綜合癥 、 α 地中海貧血 、 β地中海貧血 、 脊髓性肌萎縮 、 肯尼迪氏綜合征及雄激素受體基因異常所致疾病 、 Ⅱ 型粘多糖貯積癥 、Marfan綜合征 、 血友病 、 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤 、 無精子癥相關(guān)基因缺失診斷 、 成骨發(fā)育不全 、 Huntington舞蹈癥 、 Kallmann綜合征 、 遺傳性視神經(jīng)萎縮 、 軟骨發(fā)育不全 、 苯丙酮尿癥 、 Wilson氏病 、 結(jié)節(jié)性硬化癥等 。 58 聚合酶鏈反應(yīng)（ PCR）： 利用耐熱的 DNA聚合酶 ,以一對與模板 DNA互補(bǔ)的寡核苷酸為引物，在體外模擬體內(nèi)的 DNA復(fù)制過程，即進(jìn)行變性、退火和延伸三個階段（循環(huán) 30次），使目的DNA擴(kuò)增到約 106個拷貝，既 100百萬倍。 優(yōu)點： 快速、簡便、準(zhǔn)確、可靠、經(jīng)濟(jì)、特異性強(qiáng)等。 擴(kuò)增倍數(shù) =2n（ n：擴(kuò)增周期） PCR模板 DNA取材： 細(xì)胞、發(fā)根、精斑、血斑、已制備成的標(biāo)本、木乃伊 （二）聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù) 59 引物：能與模板 DNA兩條鏈上的各一段序列互補(bǔ)的寡核苷酸（ 15～ 20bp） 上游序列： 5′ TTTGGAGGCAAGCAAGCA G 3′ PGC1基因引物序列： 擴(kuò)增的 DNA片段長度： 508bp 5′ TATTTAGGGTTTTGCCAAGG 3′ 下游序列： 60 500bp Marker PCR產(chǎn)物 508bp 2%瓊脂糖電泳檢測 PGC1基因 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物 Marker：標(biāo)準(zhǔn)分子量 61 （三）反義技術(shù)與 RNA干涉技術(shù) 反義核酸： 與有功能的 RNA（主要是 mRNA）互補(bǔ)結(jié)合，并干擾其功能的 RNA或 DNA。 反義技術(shù)： 利用反義核酸影響相對應(yīng)的 mRNA的轉(zhuǎn)錄、翻譯，改變細(xì)胞的生物學(xué)功能的技術(shù)。 反義技術(shù)的應(yīng)用： 基因功能研究；病毒基因組功能的研究；作為藥物；反義核酸抑制癌基因 62 RNA干涉（ RNA interference， RNAi） : 由雙鏈 RNA（ dsRNA）介導(dǎo)的、序列特異 的轉(zhuǎn)錄后基因沉默機(jī)制，又稱 RNA干擾。 RNA干涉技術(shù)： 用 RNA干涉的原理，研究基因功能與特異 地使基因沉默方法。 RNA干涉技術(shù)的應(yīng)用： 基因功能的研究；基因敲除；基因治療的 新策略；藥物篩選 63 第 1章 小 結(jié) ，舉例說明其研究成 果為臨床醫(yī)學(xué)解決哪些實際問題？ 。 。 。 ：醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)說 ： RFLP 、 FCM 、 HGP、 PCR 、RNAi、 dsRNA、 siRNA
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