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生物安全實(shí)驗(yàn)室操作技術(shù)規(guī)范-資料下載頁

2025-01-18 02:14本頁面
  

【正文】 系統(tǒng)、淋巴系統(tǒng) ? 存在位置:細(xì)胞膜 ? 正常 PrPC: a螺旋為主, b片層 3%,可溶,易消化 ? 致病性 PrPSc: b片層 4555%,不可溶,抗消化 朊蛋白 (PrP) 的特點(diǎn) PrPC PrPSc factors? 朊病毒的特殊性質(zhì) ? 耐受蛋白酶的消化和常規(guī)消毒作用 , 只有強(qiáng)堿 (1~2N NaOH), 高壓消毒 (136℃ ,2小時(shí) )才能滅活; ? 不含核酸 , 用常規(guī) PCR無法檢測; ? 超長的潛伏期 ( 平均 20年 ) , 發(fā)病前無法檢測和診斷; ? 變異和跨種族感染 , 具有大量的潛在感染來源 , 主要為牛 、 羊 、 鹿等反芻動(dòng)物 , 未知的潛在儲(chǔ)存宿主可能很廣 ,傳播的潛在危險(xiǎn)不明 , 很難預(yù)測和控制; ? 受感染器官多 — 已知主要為腦髓 , 但潛伏期中除神經(jīng)系統(tǒng)以外 , 各種器官組織均有感染性; ? 感染途徑多 — 已知有消化道 ( 食入 ) 、 神經(jīng) 、 血液均可感染 。 由正常 PrPc轉(zhuǎn)化成惡性 PrPsc的機(jī)理和因素不清 ,難以預(yù)防; ? 100%病死率 , 缺乏治療藥物 , 無法研制預(yù)防疫苗 。 (一)操作要點(diǎn) ? 因?yàn)殡貌《镜牡挚沽軓?qiáng),因此一旦發(fā)生污染其清除是很困難的,故操作朊病毒的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)使用專用的設(shè)備,而不要和其它實(shí)驗(yàn)室共享設(shè)備。 ? 所有的操作都應(yīng)在生物安全柜里進(jìn)行。 ? 在操作過程中產(chǎn)生的危險(xiǎn)因素主要有氣溶膠、意外吸入及皮膚的割傷或刺傷。因此,在操作的過程中,必須穿一次性的實(shí)驗(yàn)室保護(hù)服(罩衫和圍裙)和戴手套(病理學(xué)操作者要在兩層橡膠手套之間戴鋼網(wǎng)手套)。 ? 使用一次性的塑料器皿取代玻璃器皿。 ? 由于可能導(dǎo)致污染,不應(yīng)使用組織處理機(jī),可代之以塑料的廣口瓶和大口杯。 (二)消毒處理(一) ? 福爾馬林固定的組織即使經(jīng)過長時(shí)間的浸泡仍認(rèn)為具有感染性 , 應(yīng)按感染性材料處理 。 含有朊病毒的組織學(xué)樣品可用 96%的甲酸處理 1小時(shí) 以充分滅活 。 ? 工作臺(tái)上的廢棄物以及一次性手套 、 罩衫 、 圍裙應(yīng)采用多孔負(fù)荷蒸汽滅菌器在 134~ 137℃ 高壓滅菌 18分鐘一個(gè)循環(huán) ,或高壓 3分鐘 6個(gè)循環(huán)后 焚燒處理 。 ? 污染了朊病毒的感染性廢液應(yīng)用含有效氯濃度為 20g/L( 2%)( 終濃度 ) 的次氯酸鈉處理 1小時(shí) 。 ? 多聚甲醛噴霧劑不能使朊病毒的滴度下降 , 朊病毒對(duì)紫外線照射也有抗性 。 但還必須用標(biāo)準(zhǔn)方法凈化安全柜 ( 如福爾馬林薰蒸 ) , 以滅活其它可能存在的病原因子 。 ? 朊病毒污染的生物安全柜和其它表面可用含有效氯濃度為20g/L( 2%) 的次氯酸鈉處理 1小時(shí) 。 ? 器械應(yīng)在含 有效氯濃度為 20g/L( 2%) 的次氯酸鈉 中浸泡1小時(shí) , 并且在高壓滅菌前用清水洗凈 。 ? 使用過的鋼網(wǎng)手套和 Kevlar手套在內(nèi)的非一次性器械必須滅菌后方可再次使用 。 ? 不能高壓滅菌的器具可以重復(fù)用含有效氯濃度為 20g/L( 2%) 的次氯酸鈉浸濕 1小時(shí)以上的方法來消毒 , 并且需適當(dāng)再清洗以除去殘留的次氯酸鈉 。 ? 高效空氣過濾器 ( HEPA) 在拆除后應(yīng)用最低達(dá) 1000℃ 的溫度焚燒 。 焚燒前要求如下處理: – 拆除前用油漆 ( lacquer hairspray) 噴灑過濾器的暴露面 。 – 拆除過程中 “ 包裝 ” 過濾器; – 從工作室直接移出高效空氣過濾器 , 這樣房間內(nèi)難以高壓的部分不會(huì)被污染 。 (二)消毒處理(二) 謝 謝! 實(shí)驗(yàn)室管理制度 ? 1 實(shí)驗(yàn)室安全標(biāo)識(shí) ? 2 實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)入制度 : ? 人員要求 :體檢、本低血清 ? 實(shí)驗(yàn)室工作人員的資格:工作三個(gè)月以 上 ? 人員準(zhǔn)入程序:批準(zhǔn)、人員進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室登記表、體溫、觀察 ? 3 實(shí)驗(yàn)室監(jiān)督管理制度:實(shí)驗(yàn)室監(jiān)控日志 ? 4 文件控制和維護(hù)程序:生物安全有關(guān)文件和資料 ? 5 進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室更衣程序:進(jìn)出 ? 6 高壓和消毒規(guī)程:化學(xué)消毒和高壓滅菌 ? 7 物品進(jìn)入和離開實(shí)驗(yàn)室:傳入、物品、設(shè)備離開 ? 8 廢物、廢水的處理原則:消毒液和高壓滅菌 ? 9 房間清潔與消毒:工作結(jié)束和定期終末消毒 ? 10 滅菌、消毒設(shè)備管理:表格 實(shí)驗(yàn)操作管理制度 ? 1 啟動(dòng)實(shí)驗(yàn)室 ? 2 更衣 ? 3 進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室 ? 4 啟用菌種 ? 5 病原微生物操作 ? 6 觀察實(shí)驗(yàn)室結(jié)果 ? 7 準(zhǔn)予攜出實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)材料 ? 8 實(shí)驗(yàn)室記錄的記載與傳送 ? 9 實(shí)驗(yàn)室清潔 ? 10 污染物品處理 ? 11 更換服裝 ? 12 關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室 ? 13 實(shí)驗(yàn)室消毒 ? 14 實(shí)驗(yàn)室記錄管理 感染動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室的生物安全 ? 1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物來源 ? 2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室 ? 3 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作 ? 4 感染動(dòng)物的觀察、飼養(yǎng)與清潔 ? 5 死亡動(dòng)物 ? 6 廢棄動(dòng)物、動(dòng)物尸骸與廢氣物品處理 傳染性樣品管理制度 ? 1 傳染性樣品包括送檢樣品和實(shí)驗(yàn)室內(nèi)產(chǎn)生的,可能含有目標(biāo)細(xì)菌的中間樣品 ? 2 樣品進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室 ? 3 打開包裝 ? 4 樣品的檢驗(yàn) ? 5 出具檢驗(yàn)報(bào)告 ? 6 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)樣品傳遞 ? 7 樣品的儲(chǔ)存 ? 8 廢棄樣品與其它廢棄物處理原則相同 ? 9 無傳染性樣品離開實(shí)驗(yàn)室 實(shí)驗(yàn)室菌種管理制度 ? 1 指導(dǎo)思想 ? 2 依據(jù) ? 3 人員 ? 4 菌種接收(菌種進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室、菌種的備份與保管、常用菌種保管、實(shí)驗(yàn)過程中的細(xì)菌培養(yǎng)物、菌種的鑒定、菌種檔案、衍生菌種保管) ? 5 菌種支領(lǐng) ? 7 菌種安全管理 ? 8 菌種運(yùn)輸 ? 9 菌種銷毀 ? 10 菌種損失事故 ? 11 菌種監(jiān)督管理 ? 12 注意事項(xiàng) 緊急情況處理預(yù)案 ? 1 實(shí)驗(yàn)室意外事件的處理 ? 2 實(shí)驗(yàn)室人員的隔離觀察 ? 3 實(shí)驗(yàn)室發(fā)生火災(zāi) ? 4 發(fā)生停電 ? 5 緊急服務(wù)聯(lián)系方式 健康醫(yī)療監(jiān)督制度 ? 1 醫(yī)療顧問 ? 2 實(shí)驗(yàn)室工作人員上崗前健康審查規(guī)定 ? 3 實(shí)驗(yàn)室工作人員上崗前健康培訓(xùn) ? 4 工作人員健康狀況監(jiān)督 ? 5 工作人員在實(shí)驗(yàn)室操作發(fā)生意外 ? 6 實(shí)驗(yàn)室的工作人員每天進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室前后檢測體溫 實(shí)驗(yàn)室工作人員培訓(xùn) ? 1 原則 ? 2 生物安全實(shí)驗(yàn)室環(huán)境 ? 3 生物安全組織 ? 4 實(shí)驗(yàn)室操作 ? 5 微生物操作技能 ? 6 輔助人員實(shí)驗(yàn)室操作 ? 7 實(shí)驗(yàn)室維護(hù)檢查程序 ? 8 應(yīng)急措施
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