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生物化學(xué)蛋白質(zhì)之三-資料下載頁

2025-01-18 02:01本頁面
  

【正文】 SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳: 常用于蛋白質(zhì)分子量的測定。 *等電聚焦電泳: 通過蛋白質(zhì)等電點的差異而分離蛋白質(zhì)的電泳方法。 *雙向凝膠電泳: 是蛋白質(zhì)組學(xué)研究的重要技術(shù)。 層析 (chromatography)分離蛋白質(zhì)的原理 待分離蛋白質(zhì)溶液由(流動相)經(jīng)過一個固態(tài)物質(zhì)(固定相)時,根據(jù)溶液中待分離的蛋白質(zhì) 顆粒大小 、 電荷多少 及 親和力 等,使待分離的蛋白質(zhì)組分在兩相中反復(fù)分配,并以不同速度流經(jīng)固定相而達到分離蛋白質(zhì)的目的。 (四)層析 蛋白質(zhì)分離常用的層析方法 * 離子交換層析: 利用各蛋白質(zhì)的電荷量及性質(zhì)不同進行分離。 * 凝膠過濾 (gel filtration)又稱分子篩層析: 利用各蛋白質(zhì)分子大小不同分離。 小 結(jié) : A:按分子形狀分; B:按生物學(xué)功能分; 4個層次: 一級結(jié)構(gòu)是指多肽鏈通過肽鍵共價連接的氨基酸序列。蛋白質(zhì)主鏈的折疊形成由氫鍵維系的重復(fù)性結(jié)構(gòu)稱為二級結(jié)構(gòu),最常見的二級結(jié)構(gòu)有 α 螺旋、 β 折疊片、 β 轉(zhuǎn)角和無規(guī)則卷曲。三級結(jié)構(gòu)是指由二級結(jié)構(gòu)元件構(gòu)成的整個多肽鏈的三維構(gòu)象,包括相距甚遠的肽段間和側(cè)鏈基團間的相互關(guān)系。蛋白質(zhì)的四級結(jié)構(gòu)是指聚集兩條或更多具有三級結(jié)構(gòu)的多肽鏈(亞基)空間配置形成的構(gòu)象。 ,物理化學(xué)性質(zhì)改變,生物活性喪失的現(xiàn)象稱為蛋白質(zhì)變性,變性的實質(zhì)是分子中的次級鍵被破壞,引起天然構(gòu)象解體,而蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)保持不變。 ,構(gòu)象是由氨基酸序列決定的。 謂分子病。 SDS— 聚丙烯酰胺凝膠電泳、凝膠過濾法等進行測定。 ,如 雙縮脲反應(yīng) 和 酚試劑反應(yīng) ,可用于定性或定量檢測。根據(jù)蛋白質(zhì) 溶解度 不同可以分離蛋白質(zhì),如 鹽析 、 等電點沉淀法 和 低溫有機溶劑沉淀 等;根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小進行分離的方法有透析、超濾和凝膠過濾法;根據(jù)蛋白質(zhì)帶電性質(zhì)進行分離的方法有 電泳法 和 離子交換層析法 。 小 結(jié) : isoelectric point; domain。 subunit; allosteric effect。 protein denaturation。 molecular disease ?元素組成: C、 H、 O、 N( 16%)、 S ?結(jié)構(gòu)單位: 20種 Lα氨基酸(芳香族、含硫、酸性、堿性氨基酸等) ?一級結(jié)構(gòu) : 肽鍵;多肽鏈; N端 ?C端 ?二級結(jié)構(gòu):穩(wěn)定力(氫鍵);類型( ?螺旋, ?折疊, ?轉(zhuǎn)角,無規(guī)卷曲) ?三級結(jié)構(gòu)特點 ?四級結(jié)構(gòu)特點 : 兩性解離及帶電狀態(tài)判定;紫外吸收;沉淀;變性 : 超濾;鹽析;電泳;親和層析;離子交換層析;分子篩 (舉例) 生物化學(xué) 主講教師:張麗霞 大慶師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院
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