【正文】 C C 15．在基因診斷技術(shù)中，所用的探針 DNA分子中必須存在一定量的放射性同位素，后者的作用是 （ ） A．為形成雜交的 DNA分子提供能量 B．引起探針 DNA產(chǎn)生不定向的基因突變 C. 作為探針 DNA的示蹤元素 D．增加探針 DNA的分子量 C ? 19．現(xiàn)有一長(zhǎng)度為 1000堿基對(duì) (by）的 DNA分子，用限制性核酸內(nèi)切酶 Eco R1酶切后得到的 DNA分子仍是 1000 by，用 Kpn1單獨(dú)酶切得到 400 by和 600 by兩種長(zhǎng)度的 DNA分子，用 EcoRI、 Kpnl同時(shí)酶切后得到 200 by和 600 by兩種長(zhǎng)度的 DNA分子。該 DNA分子的酶切圖譜正確的是 D （ 2022理綜全國(guó)卷 Ⅰ ） 4．已知某種限制性內(nèi)切酶在一線性 DNA分子上有 3個(gè)酶切位點(diǎn)，如圖中箭頭所指。如果在該線性 DNA分子在 3個(gè)酶切位點(diǎn)上都被該酶切斷，則會(huì)產(chǎn)生 a、 b、 c、 d四種不同長(zhǎng)度的 DNA片段?，F(xiàn)有多個(gè)上述線性 DNA分子，若在每個(gè) DNA分子上 至少有 1個(gè)酶切位點(diǎn)被該酶切斷 ，則從理論上講，經(jīng)該酶酶切后，這些線性 DNA分子最多能產(chǎn)生長(zhǎng)度不同的 DNA片段種類(lèi)數(shù)是 A． 3 B． 4 C． 9 D． 12 C 4+3+2=9種。 易混淆的幾種酶 如圖為 DNA分子的某一片段，其中 ①②③ 分別表示某種酶的作用部位，則相應(yīng)的酶依次是 ( ) A． DNA連接酶、限制酶、解旋酶 B．限制酶、解旋酶、 DNA連接酶 C．解旋酶、限制酶、 DNA連接酶 D．限制酶、 DNA連接酶、解旋酶 【 解析 】 限制酶、 DNA連接酶的作用部位為磷酸二酯鍵，解旋酶的作用部位在氫鍵。 【 答案 】 C 3．下表為 5種限制性核酸內(nèi)切酶（以下簡(jiǎn)稱“限制酶”）的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)（箭頭位置），某線性 DNA分子 含有 4個(gè) B amH I的識(shí)別序列、 4個(gè) Bst I的識(shí)別序列 ， 3個(gè) BgI II的識(shí)別序列；據(jù)此判斷下列敘述中，正確的是 A．該 DNA分子能被 Sau3A I切成 12個(gè)片段 B．一種特定序列只能被一種限制酶識(shí)別并在特定位點(diǎn)被切割 C．兩個(gè)能夠互補(bǔ)配對(duì)的 DNA片段所具有的粘性末端一定相同 D．用 BgI II、 BamH I兩種限制酶和 DNA連接酶對(duì)該 DNA分子進(jìn)行反復(fù)切割、連接操作，若干循環(huán)后， BamH I的識(shí)別序列將少于4個(gè) D 2 ? 請(qǐng)根據(jù)圖乙電泳圖譜分析各限制酶的酶切位點(diǎn)，并在答題紙的 質(zhì)粒上標(biāo)出各個(gè)限制酶的酶切位點(diǎn)和各位點(diǎn)間的大小 。 2．若要利用某目的基因 (圖甲 )和 P1噬菌體載體 (圖乙 )構(gòu)建重組 DNA(圖丙 )，限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)分別是 BglⅡ (A GATCT)、 EcoRⅠ (G AATTC)和 Sau3AⅠ ( GATC)。下列分析合理的是 ( ) A．用 EcoRⅠ 切割目的基因和 P1噬菌體載體 B．用 BglⅡ 和 EcoRⅠ 切割目的基因和 P1噬菌體載體 C．用 BglⅡ 和 Sau3AⅠ 切割目的基因和 P1噬菌體載體 D．用 EcoRⅠ 和 Sau3AⅠ 切割目的基因和 P1噬菌體載體 答案 D 5．如圖表示化學(xué)方法合成目的基因 Ⅰ 的過(guò)程。據(jù)圖分析下列敘述正確的是 ( ) A．過(guò)程①需要 DNA連接酶 B．過(guò)程②需要 DNA限制性核酸內(nèi)切酶 C．目的基因 Ⅰ 的堿基序列是已知的 D．若某質(zhì)粒能與目的基因 Ⅰ 重組，則該質(zhì)粒與 Ⅰ 的堿基序列相同 答案 C ? 解析 化學(xué)合成目的基因的前提是目的基因的堿基序列是已知的，且目的基因的相對(duì)分子質(zhì)量較小， C正確； 圖中①②過(guò)程是預(yù)先設(shè)計(jì)合成的 DNA分子片段之間的互補(bǔ)區(qū)域堿基互補(bǔ)配對(duì)，不需要酶 ， A， B錯(cuò)；若某質(zhì)粒能與目的基因 Ⅰ 重組，則該質(zhì)粒與 Ⅰ 的堿基序列不相同，它們的末端可互補(bǔ)配對(duì)， D錯(cuò)。 ? 解析 解答本題的關(guān)鍵是要 看準(zhǔn)切割后目的基因插入的方向，只有用 EcoRⅠ 和Sau3AⅠ 切割目的基因和 P1噬菌體載體，構(gòu)建的重組 DNA中 RNA聚合酶在插入的目的基因上的移動(dòng)方向才一定與圖丙相同 。 1．轉(zhuǎn)基因動(dòng)植物的區(qū)別 比較項(xiàng)目 轉(zhuǎn)基因植物 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物 受體細(xì)胞 受精卵或體細(xì)胞 一般為受精卵 目的基因常用的導(dǎo)入方法 土壤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 顯微注射法 獲得個(gè)體常用方式 植物組織培養(yǎng) 胚胎移植 目的 為了獲得具有抗逆性、抗病蟲(chóng)害的植物 為了獲得生長(zhǎng)速度快、有抗病能力的動(dòng)物 2．乳腺生物反應(yīng)器與工程菌生產(chǎn)藥物的比較 比較項(xiàng)目 乳腺生物反應(yīng)器 工程菌 基因結(jié)構(gòu) 動(dòng)物基因的結(jié)構(gòu)與人類(lèi)基因的結(jié)構(gòu)基本相同 細(xì)菌或酵母菌等生物基因的結(jié)構(gòu)與人類(lèi)基因的結(jié)構(gòu)有較大差異 基因表達(dá) 合成的藥物蛋白與天然蛋白質(zhì)相同 細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)沒(méi)有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等，產(chǎn)生的藥物蛋白可能沒(méi)有活性 受體細(xì)胞 哺乳動(dòng)物的受精卵 微生物細(xì)胞 生產(chǎn)條件 不需嚴(yán)格滅菌，溫度等條件對(duì)其影響不大 需嚴(yán)格滅菌，需嚴(yán)格控制工程菌所需的外界條件 藥物提取 從動(dòng)物乳汁中提取 從微生物細(xì)胞中提取 3．基因治療與基因診斷 原理 操作過(guò)程 進(jìn)展 基因治療 基因表達(dá) 把正?；?qū)胗谢蛉毕莸募?xì)胞中，以表達(dá)出正常性狀來(lái)治療 臨床實(shí)驗(yàn) 基因診斷 堿基互補(bǔ)配對(duì) 制作特定 DNA探針與病人樣品DNA混合，分析雜交帶情況 臨床應(yīng)用 1．若某種限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別序列是 CCTAGG，它在 A和G之間切斷 DNA。下圖表示用該酶處理某基因后產(chǎn)生的片段。下列有關(guān)敘述正確的是 ( ) A．該正?；蛑杏?4個(gè) CCTAGG序列 B．產(chǎn)生的 DNA片段可用核糖核酸連接酶連接起來(lái) C．用該酶處理得到圖示基因片段要水解 3個(gè)磷酸二酯鍵 D．若該基因某處有一個(gè) CCTAGC突變?yōu)?CCTAGG，用該酶處理后將產(chǎn)生 5個(gè)片段 解析：選 D。該正?；虮磺袨?4個(gè)片段，有 3個(gè)切點(diǎn)，應(yīng)有 3個(gè) CCTAGG序列；產(chǎn)生的 DNA片段不能用核糖核酸連接酶連接，只能用 DNA連接酶連接；用該酶處理得到圖示基因片段要水解 6個(gè)磷酸二酯鍵；若該基因某處有一個(gè) CCTAGC突變?yōu)?CCTAGG，則有 4個(gè)切點(diǎn)，用該酶處理后將產(chǎn)生 5個(gè)片段。 2．下面是四種不同質(zhì)粒的示意圖，其中 ori為復(fù)制必需的序列，amp為氨芐青霉素抗性基因， tet為四環(huán)素抗性基因，箭頭表示一種限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)。若要得到一個(gè)能在四環(huán)素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)而不能在氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的含重組 DNA的細(xì)胞，應(yīng)選用的質(zhì)粒是 ( ) ?解析：選 C。 A項(xiàng)破壞了復(fù)制必需的序列，不能復(fù)制。 B項(xiàng)氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因都完好，在四環(huán)素培養(yǎng)基上和氨芐青霉素培養(yǎng)基上都能生長(zhǎng)。 C項(xiàng)氨芐青霉素抗性基因被破壞，四環(huán)素抗性基因完好，能在四環(huán)素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)而不能在氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。 D項(xiàng)氨芐青霉素抗性基因完好，四環(huán)素抗性基因被破壞。 3．某研究小組為了研制預(yù)防禽流感病毒的疫苗，開(kāi)展了前期研究工作。其簡(jiǎn)要的操作流程如下圖。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是 ( ) A．步驟①所代表的過(guò)程是逆轉(zhuǎn)錄 B．步驟②需使用限制性核酸內(nèi)切酶和 DNA連接酶 C．步驟③可用 CaCl2處理大腸桿菌，使其從感受態(tài)恢復(fù)到常態(tài) D．檢驗(yàn) Q蛋白的免疫反應(yīng)特性，可用 Q蛋白與患禽流感康復(fù)的雞的血清進(jìn)行抗原 — 抗體特異性反應(yīng)實(shí)驗(yàn) 解析：選 C。由圖可知，步驟①所代表的過(guò)程是逆轉(zhuǎn)錄；步驟②需使用限制性核酸內(nèi)切酶和 DNA連接酶；步驟③可用 CaCl2處理大腸桿菌，使其從常態(tài)轉(zhuǎn)化為感受態(tài)細(xì)胞；檢驗(yàn) Q蛋白的免疫反應(yīng)特性，可用 Q蛋白與患禽流感康復(fù)的雞的血清進(jìn)行抗原 — 抗體特異性反應(yīng)實(shí)驗(yàn)。