發(fā)育生物學課件1introdu-資料下載頁
2025-01-18 01:10本頁面
【正文】 相互作用克隆新的基因 ? 鑒定可與蛋白質(zhì)結(jié)合的 DNA序列 ? 分離靶蛋白質(zhì)，（可采用 gelshift assay) ? 克隆靶蛋白的表達基因。 利用 DNA與蛋白質(zhì)間的相互作用 Developmental Biology 分離時空特異性表達基因的方法 利用蛋白質(zhì)之間的相互作用 酵母雙雜交法 Developmental Biology (二 )、基因表達的檢測 ? mRNA的檢測 ? 蛋白質(zhì)的檢測 ? 啟動子活性檢測 Developmental Biology (二 )、基因表達的檢測 ? mRNA的檢測 ? 蛋白質(zhì)的檢測 ? 啟動子活性檢測 Developmental Biology mRNA的檢測 ? Northern blot ? Dot blot ? RTPCR ? DNA Microarray ? in situ hybridization Developmental Biology Northern雜交的作用： 檢測基因的轉(zhuǎn)錄物的存在及是否發(fā)生了選擇性拼接。 Developmental Biology mRNA的檢測 原位雜交 (in situ hybridization) Developmental Biology 利用原位雜交技術(shù)研究基因表達的時空譜 mRNA的檢測 Developmental Biology (二 )、基因表達的檢測 ? mRNA的檢測 ? 蛋白質(zhì)的檢測 ? 啟動子活性檢測 Developmental Biology 蛋白質(zhì) 的檢測 ? 電泳法 ? Western blot ? 抗體染色法 Developmental Biology (二 )、基因表達的檢測 ? mRNA的檢測 ? 蛋白質(zhì)的檢測 ? 啟動子活性檢測 Developmental Biology 啟動子活性檢測法 P r om ot e r /e nh a nc e r s G F P pA表達載體的構(gòu)建： Developmental Biology (三 )、基因?qū)Πl(fā)育的影響的功能性研究 ? 基因敲除法 (gene knockout) ? 異位表達法 (ectopic expression) ? Rescue ? Antisense RNA ? Antisense oligos ? DsRNA interference (RNAi) ? Antibody blocking ? Dominant negative receptor mutations ? Dominant interferring allele Developmental Biology 用基因敲除法研究基因的功能 Developmental Biology 三、基因?qū)Πl(fā)育的影響的功能性研究 ? 基因敲除法 (gene knockout) ? 異位表達法 (ectopic expression) ? Rescue ? Antisense RNA ? Antisense oligos ? DsRNA interference (RNAi) ? Antibody blocking ? Dominant negative receptor mutations ? Dominant interferring allele Developmental Biology 轉(zhuǎn)基因動物與基因的異位表達 ?DNA注射； ?RNA注射； ?病毒感染。 Developmental Biology 用組織特異性啟動子控制外源基因的表達 綠色血液 綠色神經(jīng)細胞 Developmental Biology (三 )、基因?qū)Πl(fā)育的影響的功能性研究 ? 基因敲除法 (gene knockout) ? 異位表達法 (ectopic expression) ? Rescue ? Antisense RNA ? Antisense oligos ? DsRNA interference (RNAi) ? Antibody blocking ? Dominant negative receptor mutations ? Dominant interferring allele Developmental Biology (三 )、基因?qū)Πl(fā)育的影響的功能性研究 ? 基因敲除法 (gene knockout) ? 異位表達法 (ectopic expression) ? Rescue ? Antisense RNA ? Antisense oligos ? DsRNA interference (RNAi) ? Antibody blocking ? Dominant negative receptor mutations ? Dominant interferring allele Developmental Biology Dominant Negative Receptor Mutations 細胞膜 受體胞外區(qū) 受體跨膜區(qū) 突變 受體胞內(nèi)區(qū)缺失導致信號傳導的中斷 受體胞內(nèi)區(qū) 配體 配體 下游信號分子 Developmental Biology Dominant Interferring allele Engrai l e d RD X ’ DB pA
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