發(fā)育生物學課件1introdu(參考版)
2025-01-21 01:10本頁面
【正文】 Developmental Biology mRNA的檢測 原位雜交 (in situ hybridization) Developmental Biology 利用原位雜交技術(shù)研究基因表達的時空譜 mRNA的檢測 Developmental Biology (二 )、基因表達的檢測 ? mRNA的檢測 ? 蛋白質(zhì)的檢測 ? 啟動子活性檢測 Developmental Biology 蛋白質(zhì) 的檢測 ? 電泳法 ? Western blot ? 抗體染色法 Developmental Biology (二 )、基因表達的檢測 ? mRNA的檢測 ? 蛋白質(zhì)的檢測 ? 啟動子活性檢測 Developmental Biology 啟動子活性檢測法 P r om ot e r /e nh a nc e r s G F P pA表達載體的構(gòu)建： Developmental Biology (三 )、基因?qū)Πl(fā)育的影響的功能性研究 ? 基因敲除法 (gene knockout) ? 異位表達法 (ectopic expression) ? Rescue ? Antisense RNA ? Antisense oligos ? DsRNA interference (RNAi) ? Antibody blocking ? Dominant negative receptor mutations ? Dominant interferring allele Developmental Biology 用基因敲除法研究基因的功能 Developmental Biology 三、基因?qū)Πl(fā)育的影響的功能性研究 ? 基因敲除法 (gene knockout) ? 異位表達法 (ectopic expression) ? Rescue ? Antisense RNA ? Antisense oligos ? DsRNA interference (RNAi) ? Antibody blocking ? Dominant negative receptor mutations ? Dominant interferring allele Developmental Biology 轉(zhuǎn)基因動物與基因的異位表達 ?DNA注射； ?RNA注射； ?病毒感染。 Developmental Biology 分離時空特異性表達基因的方法 ? 獲取特定組織：直接取材或轉(zhuǎn)基因法取材； ? 構(gòu)建 cDNA文庫 ； ? 從蛋白質(zhì)到基因 ； ? Differentiatial hybridization/differential display/subtractive cloning Developmental Biology 分離時空特異性表達基因的方法 基因芯片 /核酸雜交法 Developmental Biology Subtractive cloning 分離時空特異性表達基因的方法 Developmental Biology 利用基因序列同源性的克隆法 ? 用一個物種的基因直接做探針分離另一個物種的同源基因； ? 根據(jù)多個物種的蛋白序列分離另一個物種的同源基因 ； ? 根據(jù)同一基因家族的不同成員間的保守序列分離新的家族成員 ； Developmental Biology 利用大分子間的相互作用克隆新的基因 ? 鑒定可與蛋白質(zhì)結(jié)合的 DNA序列 ? 分離靶蛋白質(zhì)，（可采用 gelshift assay) ? 克隆靶蛋白的表達基因。 Developmental Biology (一 )、鑒定發(fā)育相關(guān)新基因的主要方法 ? 從自然或人工突變體中分離鑒定控制發(fā)育的基因； ? 分離時空特異性表達基因的方法； ? 利用基因序列同源性的克隆法； ? 利用生物大分子間的相互作用克隆新的基因。 ?不同類型細胞可對同一信號發(fā)生不同反應(yīng) ,., 乙酰膽堿使心肌收縮頻率下降，但促使唾液腺分泌唾液。 將神經(jīng)胚中眼區(qū)細胞移植到神經(jīng)胚的軀干區(qū)，它們?nèi)詫l(fā)育為類似于眼的結(jié)構(gòu)。 Developmental Biology 兩棲動物眼區(qū)細胞的潛能隨發(fā)育時期的不同而改變 原腸胚中眼區(qū)將發(fā)育為眼睛。 ? Determination:指細胞特性發(fā)生了不可逆的改變，發(fā)育潛力已經(jīng)單一化。 細胞可從多個方面來控制蛋白質(zhì)的合成。如血細胞中的血紅蛋白－輸氧、肌肉細胞合成 myosin、 actin、tropomyosin為收縮提供能量。 Developmental Biology (三 )、基因控制細胞行為 是通過控制細胞中的蛋 白質(zhì)的產(chǎn)生而實現(xiàn)的 ? Housekeeping proteins:幾乎存在于所有類型細胞中，通常用于產(chǎn)生能量、在代謝途徑中生成或降解產(chǎn)物，如組蛋白及轉(zhuǎn)錄或翻譯中所必需的蛋白因子。 Cell proliferation: 軀體不同部位的細胞增生速度不一，可導(dǎo)致 整體結(jié)構(gòu)的改變。 Celltocell signaling: 細胞間信號的傳送、接受、反應(yīng)。 不同組織器官的生長速度也各異。 Developmental Biology 4. Cell differentiation:
環(huán)評公示相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1