生物選修復(fù)習(xí)ppt課件-資料下載頁(yè)
2025-01-15 03:59本頁(yè)面
【正文】 CR技術(shù)的過(guò)程考查解旋、Taq酶等策略：復(fù)習(xí) DNA復(fù)制的有關(guān)特點(diǎn)，掌握PCR技術(shù)與 DNA復(fù)制的異同點(diǎn)血紅蛋白的提取與分離血紅蛋白的提取與分離基礎(chǔ)知識(shí)（一）基礎(chǔ)知識(shí)（一） 凝膠色譜法（凝膠色譜法（ 分配色譜法分配色譜法 ））：凝膠： 大多數(shù)凝膠是由 多糖類(lèi)化合物 （如 葡聚糖或瓊脂糖 ）構(gòu)成的 多孔 小球體， 內(nèi)部有許多貫穿的 通道 。 根據(jù)被分離的蛋白質(zhì) 相對(duì)分子質(zhì)量 的大小，利用具有 網(wǎng)狀結(jié)構(gòu) 的凝膠的 分子篩 作用，來(lái)進(jìn)行分離。：概念： ① 當(dāng)相對(duì)分子量不同的蛋白質(zhì)通過(guò)凝膠時(shí)，相對(duì)分子量較小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程較長(zhǎng)，移動(dòng)速度較慢 。② 而相對(duì) 分子量較大 的蛋白質(zhì)無(wú)法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能在 凝膠外部 移動(dòng)，路程 較短 ，移動(dòng)速度 較快 。 相對(duì)分子質(zhì)量不同 的蛋白質(zhì)分子因此得以分離。 ③ 依據(jù)的特性是：依據(jù)的特性是： 蛋白質(zhì)分子量的大小。蛋白質(zhì)分子量的大小。 分離蛋白質(zhì) 的原理和的原理和 具體過(guò)程具體過(guò)程 （三）（三） 電泳：電泳：：概念： 帶電粒子在電場(chǎng)作用下發(fā)生遷移的過(guò)程。：原理： ① 許多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解離的基團(tuán)，在一定的 PH下，這些基團(tuán)會(huì)帶上正電或負(fù)電。 ② 在電場(chǎng)的作用下，這些帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷相反的電極移動(dòng)。 ③ 電泳利用了待分離樣品中各種分子 帶電性質(zhì) 的差異以及 分子本身的大小，形狀 的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的 遷移速度 ，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離 。 :瓊脂糖 凝膠電泳、 聚丙稀酰胺 凝膠電泳。用 SDS測(cè)定蛋白質(zhì)分子量的方法 使用使用 SDS— 聚丙烯酰胺凝膠電泳聚丙烯酰胺凝膠電泳 測(cè)定蛋測(cè)定蛋白質(zhì)的分子量時(shí)，可選用一組白質(zhì)的分子量時(shí)，可選用一組 已知分子量已知分子量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白的標(biāo)準(zhǔn)蛋白 同時(shí)進(jìn)行電泳，根據(jù)已知分子同時(shí)進(jìn)行電泳，根據(jù)已知分子量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白的量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白的 電泳區(qū)帶位置電泳區(qū)帶位置 ，用，用 電泳遷電泳遷移率和分子量的對(duì)數(shù)作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)移率和分子量的對(duì)數(shù)作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn) ，可以測(cè)，可以測(cè)定定 未知蛋白質(zhì)未知蛋白質(zhì) 的分子量。的分子量。 市場(chǎng)上有高分子市場(chǎng)上有高分子量、次高分子量及低分子量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白試量、次高分子量及低分子量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白試劑出售。劑出售。?以血紅蛋白的提取和分離為例：（ 5）蛋白質(zhì)提取分離與必修一的聯(lián)系特點(diǎn)：結(jié)合蛋白質(zhì)提取分離的原理考查蛋白質(zhì)的特點(diǎn)、滲透作用原理等策略：復(fù)習(xí)滲透裝置，滲透作用（細(xì)胞的吸水和失水），材料的選擇（如哺乳動(dòng)物的紅細(xì)胞與鳥(niǎo)類(lèi)紅細(xì)胞區(qū)別）
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