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定點誘變技術(shù)ppt課件-資料下載頁

2025-01-14 14:40本頁面
  

【正文】 同時利用重疊延伸 PCR技術(shù)可以對基因中心區(qū)段進行取代、 插入 、 缺失 的突變。 大引物 PCR介導的定點突變 各種點突變方法的比較 方法 寡聚核苷酸 介導的突變 盒式突變 PCR介導的突變 優(yōu)點 保真度高 簡單易行 突變效率高 操作簡單 突變成功率高 缺點 操作復雜 周期長 合成多條引物成本高 受到酶切位點的限制 后續(xù)工作復雜 TaqDNA聚合酶保真性偏低 應(yīng)用產(chǎn)品 一步反向 PCR法 Stratagen公司的 QuikChange174。系列試劑盒 SBS Geech公司的 Mutadirect? Site Directed Mutagenesis Kit Stratagen公司的 QuikChange174。 Multi SiteDirected Mutagenesis Kit TaKaRa公司的 Multipoints Mutagenesis Kit 一種簡便快速的定點突變的方法 Stratagen公司研制的 Quickchange試劑盒 ,可以雙鏈DNA質(zhì)粒為模板,只需一對引物,進行一次 PCR,在1~ 2d內(nèi)即可完成點突變過程。 DpnI識別序列為甲基化的 GATC, GATC在幾乎各種質(zhì)粒中都會出現(xiàn),而且不止一次。 Overview of the QuikChange174。 XL sitedirected mutagenesis method. Steps of Mutadirect? SiteDirected Mutagenesis Kit Overview of the QuikChange Multi SiteDirected Mutagenesis method 資料表明,引入 3個定點突變的效率為 60%, 5個定點突變的效率為 30%。 Steps of Multipoints Mutagenesis Kit (TaKaRa) 適用于插入片段長度在。
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