定點(diǎn)誘變技術(shù)ppt課件-資料下載頁
2025-01-14 14:40本頁面
【正文】 同時(shí)利用重疊延伸 PCR技術(shù)可以對(duì)基因中心區(qū)段進(jìn)行取代、 插入 、 缺失 的突變。 大引物 PCR介導(dǎo)的定點(diǎn)突變 各種點(diǎn)突變方法的比較 方法 寡聚核苷酸 介導(dǎo)的突變 盒式突變 PCR介導(dǎo)的突變 優(yōu)點(diǎn) 保真度高 簡(jiǎn)單易行 突變效率高 操作簡(jiǎn)單 突變成功率高 缺點(diǎn) 操作復(fù)雜 周期長(zhǎng) 合成多條引物成本高 受到酶切位點(diǎn)的限制 后續(xù)工作復(fù)雜 TaqDNA聚合酶保真性偏低 應(yīng)用產(chǎn)品 一步反向 PCR法 Stratagen公司的 QuikChange174。系列試劑盒 SBS Geech公司的 Mutadirect? Site Directed Mutagenesis Kit Stratagen公司的 QuikChange174。 Multi SiteDirected Mutagenesis Kit TaKaRa公司的 Multipoints Mutagenesis Kit 一種簡(jiǎn)便快速的定點(diǎn)突變的方法 Stratagen公司研制的 Quickchange試劑盒 ,可以雙鏈DNA質(zhì)粒為模板，只需一對(duì)引物，進(jìn)行一次 PCR，在1～ 2d內(nèi)即可完成點(diǎn)突變過程。 DpnI識(shí)別序列為甲基化的 GATC， GATC在幾乎各種質(zhì)粒中都會(huì)出現(xiàn)，而且不止一次。 Overview of the QuikChange174。 XL sitedirected mutagenesis method. Steps of Mutadirect? SiteDirected Mutagenesis Kit Overview of the QuikChange Multi SiteDirected Mutagenesis method 資料表明，引入 3個(gè)定點(diǎn)突變的效率為 60%， 5個(gè)定點(diǎn)突變的效率為 30%。 Steps of Multipoints Mutagenesis Kit (TaKaRa) 適用于插入片段長(zhǎng)度在。
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