菌種操作規(guī)程ppt課件-資料下載頁
2025-01-10 10:18本頁面
【正文】 ： 95%酒精 79mL加蒸餾水至 100mL。 ? 甲醛熏煙： 40%甲醛 50mL，高錳酸鉀 20克盛于牛皮紙中包好，帶入無菌室混合，緊閉無菌室經 1～ 2天后，借送風設備將甲醛 — 高錳酸鉀氣體排出。 ? 丙二醇 50mL加熱熏煙滅菌。 ? %新潔爾滅菌溶液： 1mL新潔爾溶液加蒸餾水至 1000mL。 ? 1%～ 2%來蘇爾溶液：將 10%的來蘇爾溶液稀釋 5～ 10倍。 ? 重鉻酸鉀 — 濃硫酸（ 100g/mL）（洗液）配制：稱取化學純重鉻酸鉀 100g于燒杯中，加入 100mL蒸餾水，微加熱，使其溶解。把燒杯放于水盆中冷卻后，慢慢加入化學純硫酸，邊加邊用玻璃棒攪拌，防止硫酸濺出，開始有沉淀析出，硫酸加到一定量沉淀可溶解，加硫酸至溶液總體積為 1000mL 細菌培養(yǎng)基 ? 肉湯培養(yǎng)基 ? 固體培養(yǎng)基 肉湯培養(yǎng)基配制 ? 配方 成分 葡萄糖 牛肉膏 氯化鈉 蛋白胨 酚紅 配 比 % 1% % % % 規(guī) 格 分析純 生物試劑 分析純 生物試劑 分析純 ? 配制 為了稱量方便，一般稱牛肉膏時放玻璃棒，其它成分分別加適量的蒸餾水溶解之，混合后加足水量，再加酚紅溶液，攪拌均勻，用 10N的氫氧化鈉調 PH到 ～ 。 ? 分裝 將配制好的肉湯培養(yǎng)基分裝于 18 180mL試管中，裝量每支約為 8mL，塞棉塞，裝入有牛皮紙的不銹鋼筐中。 ? 消毒 在 ， 119℃ ～ 121℃ 下滅菌 30分鐘，滅菌后置 36～ 38℃ 恒溫室培養(yǎng) 24小時后檢查無雜菌生長，溶液清亮無沉淀，消后 PH為 ，每批使用期不超過 7天， 《 肉湯培養(yǎng)基配制記錄 》 和《 培養(yǎng)基接種用具消毒記錄 》 。 固體培養(yǎng)基配制 ? 配方 成分 蛋白胨 牛肉膏 酵母膏 氯化鈉 葡萄糖 瓊脂 配 比 1% 1% % % % 2% 規(guī) 格 生物試劑 生物試劑 生化試劑 分析純 分析純 生物試劑 ? 配制：按實際用量計算后，按配方稱取多種藥品放入燒杯中，瓊脂需單獨稱量，稱牛肉和酵母膏時一般放玻璃棒，蛋白胨極易吸潮，稱量時要迅速，然后用加熱的蒸餾水溶解之。 ? PH： 待藥品完全溶解后再補充水定容至所需量，調整 PH，若 PH偏酸，可滴 10N的 NaOH,邊加邊攪拌 ,調節(jié) PH至 ～ ；若 PH偏堿 ,則用 10N HCl調節(jié) PH至 ～ ,應注意 PH值不要調過 ,以免回調影響培養(yǎng)基內各離子的濃度。 ? 溶解及分裝：將上述的培養(yǎng)基放在有石棉網的電爐上加熱，把稱好的瓊脂放入其中，其間用玻璃棒不停攪拌，以防瓊脂糊底或溢出。瓊脂完全溶化后，趁熱裝入試管（ 18 180mm）或 500mL三角瓶中，小試管裝量每支約 10mL，三角瓶每瓶 300mL裝量，分裝必要時可用三角漏斗，以免使培養(yǎng)基溢在管口或瓶口上而造成污染。裝好后塞上棉塞，三角瓶一般包紗布和牛皮紙。 ? 消毒：在 ， 119～ 121℃ 滅菌 30分鐘，并填寫 《 細菌培養(yǎng)基配制記錄 》 和 《 培養(yǎng)基接種用具消毒記錄 》 ? 擺細菌斜面：滅菌后培養(yǎng)基冷至 40至 50℃ ，小試管要擺斜面，凝固后放置 36～ 38℃ 恒溫室培養(yǎng) 48小時后無雜菌生長方可備用。使用期不超過 7天。 ? 倒碟： 三角瓶中的培養(yǎng)基一般冷至 40～ 50℃ ，在無菌室倒碟，每碟倒 20mL左右，凝固后倒置于 36～38℃ 恒溫室培養(yǎng) 48小時后無雜菌生長方可備用。使用期不超過 7天，倒碟前應將洗凈之平碟在 ，119～ 121℃ 蒸汽壓力下滅菌 1小時，取出放烘箱105℃ 左右烘干。若三角瓶中的培養(yǎng)基暫時不用，可放置冰箱內保存。
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