【正文】 制瘤細胞無限生長 B. 在培養(yǎng)基中加入氨基喋呤可選出雜交細胞 C. 氨基喋呤可抑制瘤細胞的蛋白質合成 D. 氨基喋呤能導致 B 淋巴細胞無限分裂 6. 光鏡同電鏡比較 , 下列各項中 , D 是不正確的 。 A. 電鏡用的是電子束 , 而不是可見光 B. 電鏡樣品要在真空中觀察 , 而不是暴露在空氣中 C. 電鏡和光鏡的樣品都需要用化學染料染色 D. 用于電鏡的標本要徹底脫水 , 光鏡則不必 C 來進行觀察。 A. 相差顯微鏡 B. 熒光顯微鏡 C. 倒置顯微鏡 D. 普通光學顯微鏡 8. 在遞增細胞勻漿液的離心轉速過程中最先沉淀下來的是 D 。 A. 核糖體 B. 線粒體 C. 未破碎的 D. 微粒體細胞核 9. 單個植物細胞在體外經過誘導并培養(yǎng)成為完整的植物小植株的實驗最好地證明了 D 。 10. 顯微鏡的分辨率與下列哪一項無關 ? D A. 光源的波長λ B. 物鏡的鏡口角α C. 介質的折射率 n D. 放大倍數 四 、問答題 1．動物體細胞克隆有什么意義 ? 答：動物體細胞克隆技術的成功對生命科學的發(fā)展具有重要的推動作用，不僅證明了動物的體細胞具有全能性， 而且有巨大的應用前景。例如結合轉基因技術生產藥物?，F在很多藥物如胰島素、生長激素、表皮生長因子等都是動物細胞體內正常的代謝物，某些病人由于產生這些物質的功能發(fā)生缺陷，導致了相應疾病的發(fā)生，目前的治療方法就是給這些病人注射這類藥物。由于這類藥物本身是來自動物的某些臟器，制備這種藥物就需要大量的動物提供臟器，因此成本就很高，如果通過轉基因技術把相應的基因轉入到哺乳動物，讓動物的乳汁生產具有療效的蛋白質就會降低成本，再結合動物體細胞克隆技術，將這種轉基因動物大量無性繁殖克隆，就可以大大提高產量，大幅度降低成本，同 時也保證了所轉基因的穩(wěn)定。該項技術也可以生產供動物本身和人類器官移植的動物， 解決器官捐贈長期缺乏的問題。另外，動物體細胞克隆技術在基因結構和功能、基因治療、遺傳病及人類衰老等的研究方面都具有巨大的潛力。 2． 什么是細胞培養(yǎng)， 應注意哪些問題 ? 答：在體外模擬體內的生理環(huán)境，培養(yǎng)從機體中取出的細胞，并使之生存和生長的技術為細胞培養(yǎng)技術。細胞培養(yǎng)技術是細胞生物學研究方法中最有價值的技術，通過細胞培養(yǎng)可以獲得大量的細胞，也可通過細胞培養(yǎng)研究細胞的運動、細胞的信號傳導、細胞的合成代謝等。細胞培養(yǎng)的突出特點是 在離體條件下觀察和研究細胞生命活動的規(guī)律。培養(yǎng)中的細胞不受體內復雜環(huán)境的影響，人為改變培養(yǎng)條件 (如物理、化學、生物等外界因素的變化 )即可進一步觀察細胞在單因素或多因素的影響下的生理功能變化。然而，細胞在體外環(huán)境的局限性，又使細胞的形態(tài)與功能不能與體內的同類細胞完全等同。 體外培養(yǎng)細胞必需注意三個環(huán)節(jié)∶物質營養(yǎng)、生存環(huán)境和廢物的排除。 體外培養(yǎng)細胞所需的營養(yǎng)是由培養(yǎng)基提供的。培養(yǎng)基通常含有細胞生長所需的氨基酸、維生素和微量元素。一般培養(yǎng)細胞所用的培養(yǎng)基是合成培養(yǎng)基，它含有細胞生長必需的營養(yǎng)成分，但是在使用合成 培養(yǎng)基時需要添加一些天然成分，其中最重要的是血清，以牛血清為主。這是因為血清中含有多種促細胞生長因子和一些生物活性物質。 由于血清中含有一些不明成分，對于特殊目的細胞培養(yǎng)是不利的。為此，研究人員正在 探索無血清培養(yǎng)細胞的條件，并已經取得一些進展。由于機體內的細胞生長通常需要不同的細胞因子進行調節(jié)，所以在無血清培養(yǎng)時仍然需要添加必要的因子，包括：促細胞生長因子(如 EGF)、促貼附物 (如層粘連蛋白 )和其它活性物質 (如轉鐵蛋白 )。無血清培養(yǎng)排除了有血清培養(yǎng)時血清中不明因素的干擾，使實驗結果更加可靠。 體外細胞培養(yǎng)必 需模擬體內細胞生長的環(huán)境。環(huán)境因素主要是指∶無菌環(huán)境、合適的溫度、一定的滲透壓和氣體環(huán)境。氣體主要有兩種∶ O2 和 CO2。后者對于維持細胞培養(yǎng)液的酸堿度十分重要。 活體內生長的細胞所產生的代謝物和廢物通過一定的系統進行利用和排除。體外培養(yǎng)細胞產生的代謝物和廢物積累在培養(yǎng)液中，所以定期更換培養(yǎng)液，對于體外細胞培養(yǎng)也是至關重要的。 3．什么是細胞系和細胞株 ? 答：原代培養(yǎng)物經首次傳代成功后即為細胞系 (cell line)， 由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代，或傳代次數有限， 可稱為有限 細胞系 (finite cell line)， 如可以連續(xù)培養(yǎng)， 則稱為連續(xù)細胞系 (continuous cell line)， 培養(yǎng) 50 代以上并無限培養(yǎng)下去。 從一個經過生物學鑒定的細胞系由單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法由單細胞增殖形成的細胞群稱細胞株 (cell strain)。所以細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得的具有特殊性質或標志的培養(yǎng)細胞。從培養(yǎng)代數來講，可培養(yǎng)到 4050 代。 4．何謂乳腺生物反應器， 它的出現有什么意義 ? 答：乳腺生物反應器是根據細胞生物學中蛋白質合成與 分選的機理，結合基因工程技術、動物轉基因技術等，利用動物的乳腺分泌某些具有重要價值的基因產物。 乳腺生物反應器是一項綜合技術，發(fā)展乳腺生物反應器不僅需要基因工程技術，也需要動物胚胎技術，轉基因技術，蛋白質提純技術和常規(guī)畜牧技術。乳腺生物反應器有特殊優(yōu)點。乳腺生物反應器生產藥品，基本上是一個畜牧業(yè)過程。 （見表 31） 表 31 電鏡與光鏡的比較 利用樣品對光的吸收形成明暗反差和顏色變化 利用樣品對電子的散射和要求真空 不要求真空 要求真空 玻璃透鏡 玻璃透鏡 電磁透鏡 可 見光（ 400700） 紫外光 （約 200nm) 電子束 200nm 100nm LM FM EM 成像原理 真空 透鏡 光源 分辨本領 顯微鏡 外植體的培養(yǎng)； 植物細胞懸浮培養(yǎng)； 單倍體細胞培養(yǎng)； 原生質體培養(yǎng) 群體培養(yǎng) 克隆培養(yǎng) 培養(yǎng)方式 難 易 培養(yǎng)難易 育種；獲得脫毒苗 獲得次生 代謝產物 獲得有價值的產品或細胞本身 培養(yǎng)目的 植物細胞培養(yǎng) 動物細胞培養(yǎng) 問答： （ 1）、電鏡為何要求一定的真空度？ 答：如果含有很多的其它分子，會與電子發(fā)生 碰撞 ，使電子散射，引起眩 光，影響成像質量；碰撞也會使電子束 不穩(wěn)定 ，產生閃爍現象；灼熱的燈絲遇氣體也 易腐蝕和斷裂 。 （ 2）、電鏡為何要有記錄系統？ 電子成像。肉眼無法觀察帶有“樣品信息”的電子束。 表 33 動、植物細胞的培養(yǎng)