【正文】 制瘤細(xì)胞無限生長 B. 在培養(yǎng)基中加入氨基喋呤可選出雜交細(xì)胞 C. 氨基喋呤可抑制瘤細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成 D. 氨基喋呤能導(dǎo)致 B 淋巴細(xì)胞無限分裂 6. 光鏡同電鏡比較 , 下列各項(xiàng)中 , D 是不正確的 。 A. 電鏡用的是電子束 , 而不是可見光 B. 電鏡樣品要在真空中觀察 , 而不是暴露在空氣中 C. 電鏡和光鏡的樣品都需要用化學(xué)染料染色 D. 用于電鏡的標(biāo)本要徹底脫水 , 光鏡則不必 C 來進(jìn)行觀察。 A. 相差顯微鏡 B. 熒光顯微鏡 C. 倒置顯微鏡 D. 普通光學(xué)顯微鏡 8. 在遞增細(xì)胞勻漿液的離心轉(zhuǎn)速過程中最先沉淀下來的是 D 。 A. 核糖體 B. 線粒體 C. 未破碎的 D. 微粒體細(xì)胞核 9. 單個植物細(xì)胞在體外經(jīng)過誘導(dǎo)并培養(yǎng)成為完整的植物小植株的實(shí)驗(yàn)最好地證明了 D 。 10. 顯微鏡的分辨率與下列哪一項(xiàng)無關(guān) ? D A. 光源的波長λ B. 物鏡的鏡口角α C. 介質(zhì)的折射率 n D. 放大倍數(shù) 四 、問答題 1．動物體細(xì)胞克隆有什么意義 ? 答：動物體細(xì)胞克隆技術(shù)的成功對生命科學(xué)的發(fā)展具有重要的推動作用，不僅證明了動物的體細(xì)胞具有全能性， 而且有巨大的應(yīng)用前景。例如結(jié)合轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)藥物?，F(xiàn)在很多藥物如胰島素、生長激素、表皮生長因子等都是動物細(xì)胞體內(nèi)正常的代謝物，某些病人由于產(chǎn)生這些物質(zhì)的功能發(fā)生缺陷，導(dǎo)致了相應(yīng)疾病的發(fā)生，目前的治療方法就是給這些病人注射這類藥物。由于這類藥物本身是來自動物的某些臟器，制備這種藥物就需要大量的動物提供臟器，因此成本就很高，如果通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)把相應(yīng)的基因轉(zhuǎn)入到哺乳動物，讓動物的乳汁生產(chǎn)具有療效的蛋白質(zhì)就會降低成本，再結(jié)合動物體細(xì)胞克隆技術(shù)，將這種轉(zhuǎn)基因動物大量無性繁殖克隆，就可以大大提高產(chǎn)量，大幅度降低成本，同 時也保證了所轉(zhuǎn)基因的穩(wěn)定。該項(xiàng)技術(shù)也可以生產(chǎn)供動物本身和人類器官移植的動物， 解決器官捐贈長期缺乏的問題。另外，動物體細(xì)胞克隆技術(shù)在基因結(jié)構(gòu)和功能、基因治療、遺傳病及人類衰老等的研究方面都具有巨大的潛力。 2． 什么是細(xì)胞培養(yǎng)， 應(yīng)注意哪些問題 ? 答：在體外模擬體內(nèi)的生理環(huán)境，培養(yǎng)從機(jī)體中取出的細(xì)胞，并使之生存和生長的技術(shù)為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)研究方法中最有價值的技術(shù)，通過細(xì)胞培養(yǎng)可以獲得大量的細(xì)胞，也可通過細(xì)胞培養(yǎng)研究細(xì)胞的運(yùn)動、細(xì)胞的信號傳導(dǎo)、細(xì)胞的合成代謝等。細(xì)胞培養(yǎng)的突出特點(diǎn)是 在離體條件下觀察和研究細(xì)胞生命活動的規(guī)律。培養(yǎng)中的細(xì)胞不受體內(nèi)復(fù)雜環(huán)境的影響，人為改變培養(yǎng)條件 (如物理、化學(xué)、生物等外界因素的變化 )即可進(jìn)一步觀察細(xì)胞在單因素或多因素的影響下的生理功能變化。然而，細(xì)胞在體外環(huán)境的局限性，又使細(xì)胞的形態(tài)與功能不能與體內(nèi)的同類細(xì)胞完全等同。 體外培養(yǎng)細(xì)胞必需注意三個環(huán)節(jié)∶物質(zhì)營養(yǎng)、生存環(huán)境和廢物的排除。 體外培養(yǎng)細(xì)胞所需的營養(yǎng)是由培養(yǎng)基提供的。培養(yǎng)基通常含有細(xì)胞生長所需的氨基酸、維生素和微量元素。一般培養(yǎng)細(xì)胞所用的培養(yǎng)基是合成培養(yǎng)基，它含有細(xì)胞生長必需的營養(yǎng)成分，但是在使用合成 培養(yǎng)基時需要添加一些天然成分，其中最重要的是血清，以牛血清為主。這是因?yàn)檠逯泻卸喾N促細(xì)胞生長因子和一些生物活性物質(zhì)。 由于血清中含有一些不明成分，對于特殊目的細(xì)胞培養(yǎng)是不利的。為此，研究人員正在 探索無血清培養(yǎng)細(xì)胞的條件，并已經(jīng)取得一些進(jìn)展。由于機(jī)體內(nèi)的細(xì)胞生長通常需要不同的細(xì)胞因子進(jìn)行調(diào)節(jié)，所以在無血清培養(yǎng)時仍然需要添加必要的因子，包括：促細(xì)胞生長因子(如 EGF)、促貼附物 (如層粘連蛋白 )和其它活性物質(zhì) (如轉(zhuǎn)鐵蛋白 )。無血清培養(yǎng)排除了有血清培養(yǎng)時血清中不明因素的干擾，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加可靠。 體外細(xì)胞培養(yǎng)必 需模擬體內(nèi)細(xì)胞生長的環(huán)境。環(huán)境因素主要是指∶無菌環(huán)境、合適的溫度、一定的滲透壓和氣體環(huán)境。氣體主要有兩種∶ O2 和 CO2。后者對于維持細(xì)胞培養(yǎng)液的酸堿度十分重要。 活體內(nèi)生長的細(xì)胞所產(chǎn)生的代謝物和廢物通過一定的系統(tǒng)進(jìn)行利用和排除。體外培養(yǎng)細(xì)胞產(chǎn)生的代謝物和廢物積累在培養(yǎng)液中，所以定期更換培養(yǎng)液，對于體外細(xì)胞培養(yǎng)也是至關(guān)重要的。 3．什么是細(xì)胞系和細(xì)胞株 ? 答：原代培養(yǎng)物經(jīng)首次傳代成功后即為細(xì)胞系 (cell line)， 由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細(xì)胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代，或傳代次數(shù)有限， 可稱為有限 細(xì)胞系 (finite cell line)， 如可以連續(xù)培養(yǎng)， 則稱為連續(xù)細(xì)胞系 (continuous cell line)， 培養(yǎng) 50 代以上并無限培養(yǎng)下去。 從一個經(jīng)過生物學(xué)鑒定的細(xì)胞系由單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群稱細(xì)胞株 (cell strain)。所以細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志的培養(yǎng)細(xì)胞。從培養(yǎng)代數(shù)來講，可培養(yǎng)到 4050 代。 4．何謂乳腺生物反應(yīng)器， 它的出現(xiàn)有什么意義 ? 答：乳腺生物反應(yīng)器是根據(jù)細(xì)胞生物學(xué)中蛋白質(zhì)合成與 分選的機(jī)理，結(jié)合基因工程技術(shù)、動物轉(zhuǎn)基因技術(shù)等，利用動物的乳腺分泌某些具有重要價值的基因產(chǎn)物。 乳腺生物反應(yīng)器是一項(xiàng)綜合技術(shù)，發(fā)展乳腺生物反應(yīng)器不僅需要基因工程技術(shù)，也需要動物胚胎技術(shù)，轉(zhuǎn)基因技術(shù)，蛋白質(zhì)提純技術(shù)和常規(guī)畜牧技術(shù)。乳腺生物反應(yīng)器有特殊優(yōu)點(diǎn)。乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)藥品，基本上是一個畜牧業(yè)過程。 （見表 31） 表 31 電鏡與光鏡的比較 利用樣品對光的吸收形成明暗反差和顏色變化 利用樣品對電子的散射和要求真空 不要求真空 要求真空 玻璃透鏡 玻璃透鏡 電磁透鏡 可 見光（ 400700） 紫外光 （約 200nm) 電子束 200nm 100nm LM FM EM 成像原理 真空 透鏡 光源 分辨本領(lǐng) 顯微鏡 外植體的培養(yǎng)； 植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)； 單倍體細(xì)胞培養(yǎng)； 原生質(zhì)體培養(yǎng) 群體培養(yǎng) 克隆培養(yǎng) 培養(yǎng)方式 難 易 培養(yǎng)難易 育種；獲得脫毒苗 獲得次生 代謝產(chǎn)物 獲得有價值的產(chǎn)品或細(xì)胞本身 培養(yǎng)目的 植物細(xì)胞培養(yǎng) 動物細(xì)胞培養(yǎng) 問答： （ 1）、電鏡為何要求一定的真空度？ 答：如果含有很多的其它分子，會與電子發(fā)生 碰撞 ，使電子散射，引起眩 光，影響成像質(zhì)量；碰撞也會使電子束 不穩(wěn)定 ，產(chǎn)生閃爍現(xiàn)象；灼熱的燈絲遇氣體也 易腐蝕和斷裂 。 （ 2）、電鏡為何要有記錄系統(tǒng)？ 電子成像。肉眼無法觀察帶有“樣品信息”的電子束。 表 33 動、植物細(xì)胞的培養(yǎng)