細(xì)胞生物學(xué)題庫(kù)第3章含答案(已改無(wú)錯(cuò)字)
2023-02-09 20:06:38 本頁(yè)面
【正文】 hromatography)： 凝膠過(guò)濾層析法又稱排阻層析或分子篩方法，主要是根據(jù)蛋白質(zhì)的大小和形狀，即蛋白質(zhì)的質(zhì)量進(jìn)行分離和純化。層析柱中的填料是某些惰性的多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)物質(zhì)，多是交聯(lián)的聚糖 (如葡聚糖或瓊脂糖 )類物質(zhì)，使蛋白質(zhì)混合物中的物質(zhì)按分子大小的不同進(jìn)行分離。 29. 親和層析 (affinity chromatography)： 將具有特殊結(jié)構(gòu)的親和分子制成固相吸附劑放置在層析柱中，當(dāng)要被分離的蛋白混合液通過(guò)層析柱時(shí)，與吸附劑具有親和能力的蛋白質(zhì)就會(huì)被吸附而滯留在層析柱中。那些沒(méi)有親和力的蛋白質(zhì)由于不被吸附，直接流出，從而與被分離的蛋白質(zhì)分開(kāi)，然后選用適當(dāng)?shù)南疵撘海? 改變結(jié)合條件將被結(jié)合的蛋白質(zhì)洗脫下來(lái)，這種分離純化蛋白質(zhì)的方法稱為親和層析。 在生物分子中有些分子的特定結(jié)構(gòu)部位能夠同其他分子相互識(shí)別并結(jié)合，如酶與底物的識(shí)別結(jié)合、受體與配體的識(shí)別結(jié)合、抗體與抗原的識(shí)別結(jié)合，這種結(jié)合既是特異的，又是可逆的， 改變條件可以使這種結(jié)合解除。生物分子間的這種結(jié)合能力稱為親和力。親和層析就是根據(jù)這樣的原理設(shè)計(jì)的蛋白質(zhì)分離純化方法。 (gene engineering)： 基因工程是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)， 以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段， 將不同來(lái)源的基因 (DNA 分子 )，按預(yù)先設(shè)計(jì)的藍(lán)圖， 在體外構(gòu)建雜種 DNA 分子， 然后導(dǎo)入活細(xì)胞， 以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、 生產(chǎn)新產(chǎn)品。基因工程技術(shù)為基因的結(jié)構(gòu)和功能的研究提供了有力的手段。 31. 基因克隆 (gene cloning)： 是 70 年代發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)具有革命性的研究技術(shù)，可概括 為 ： 分、切、連、轉(zhuǎn)、選。 “ 分 ” 是指分離制備合格的待操作的 DNA，包括作為運(yùn)載體的 DNA和欲克隆的目的 DNA； “ 切 ” 是指用序列特異的限制性內(nèi)切酶切開(kāi)載體 DNA，或者切出目的基因； “ 連 ” 是指用 DNA 連接酶將目的 DNA 同載體 DNA 連接起來(lái)，形成重組的 DNA 分子； “ 轉(zhuǎn) ”是指通過(guò)特殊的方法將重組的 DNA 分子送入宿主 細(xì)胞中進(jìn)行復(fù)制和擴(kuò)增； “ 選 ” 則是從宿主群體中挑選出攜帶有重組 DNA 分子的個(gè)體?；蚬こ碳夹g(shù)的兩個(gè)最基本的特點(diǎn)是分子水平上的操作和細(xì)胞水平上的表達(dá)，而分子水平上的操作即是體外重組的過(guò)程，實(shí)際上是利用工具酶對(duì) DNA 分子進(jìn)行 外科手術(shù) 。 32. 基因敲除 (gene knockout)： 是指一個(gè)有功能的基因通過(guò)基因工程方法完全被剔除的人工突變技術(shù)。人為的將小鼠的某一種有功能的基因完全缺失的技術(shù)就稱為基因敲除技術(shù)。這項(xiàng)技術(shù)是 Marrio Capecchi 于八十年代末在 Utah 大學(xué)發(fā)展起來(lái)的。實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物通常是小鼠，被敲除了功能基因的小鼠就稱為敲除小鼠 (knockout mice)。基因敲除技術(shù)已成功地應(yīng)用于幾種遺傳病的研究，還可用于研究特定基因的細(xì)胞生物學(xué)活性以及研究發(fā)育調(diào)控的基因作用等， 因此是研究基因功能的一項(xiàng)非常有用的技術(shù)。基因敲除是一套組合技術(shù)，包括基因重組、細(xì)胞分離培養(yǎng)、轉(zhuǎn)基因等 （ karyoplast） ： 細(xì)胞經(jīng)細(xì)胞松弛素處理后，排出帶有少量細(xì)胞質(zhì)，并包有一層細(xì)胞膜的細(xì)胞核。 （ cytoplast） :細(xì)胞經(jīng)處理排核后剩下的包有細(xì)胞膜的細(xì)胞質(zhì)部分。 (cell culture)： 在體外模擬體內(nèi)的生理環(huán)境，培養(yǎng)從機(jī)體取下的細(xì)胞，并使之生存和生長(zhǎng)的技術(shù)。 ：分散的細(xì)胞懸液在培養(yǎng)瓶中很快（幾十分鐘至數(shù)小時(shí)內(nèi)）就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。 （ contact inhibition）：正常細(xì)胞生長(zhǎng)到彼此相互接觸，其運(yùn)動(dòng)和分裂活動(dòng)都將停止的現(xiàn)象。 (mass culture) ：將含有一定數(shù)量的細(xì)胞懸液置于培養(yǎng)瓶中，讓細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)，匯合后生成單層細(xì)胞。 (clonal culture) ：將高度稀釋的細(xì)胞懸液置于游離的培養(yǎng)瓶 中，細(xì)胞貼壁后彼此距離較遠(yuǎn)，經(jīng)過(guò)生長(zhǎng)增殖，每個(gè)細(xì)胞形成一個(gè)生長(zhǎng)集落。 (primary culture) ：直接從機(jī)體取下細(xì)胞、組織和器官后立即進(jìn)行的培養(yǎng)。有人將 110 代的細(xì)胞培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。 (subculture) ：在體外培養(yǎng)的條件下對(duì)細(xì)胞進(jìn)行的持續(xù)傳代培養(yǎng) ： 分散成原球形的細(xì)胞一經(jīng)貼壁就迅速鋪展并開(kāi)始有絲分裂，逐漸形成致密的細(xì)胞單層，這種培養(yǎng)方式稱單層細(xì)胞培養(yǎng)。 ： 為制取細(xì)胞產(chǎn)品而設(shè)計(jì)的方法，使用大容量的圓培養(yǎng)瓶，在培養(yǎng)過(guò)程中不斷的 轉(zhuǎn)動(dòng)，使培養(yǎng)細(xì)胞始終處于懸浮狀態(tài)之中而不貼壁。 （ primary cell）：從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞。 （ subculture cell） :適應(yīng)在體外培養(yǎng)的條件下持續(xù)傳代培養(yǎng)的細(xì)胞。 （ cell strain):通過(guò)選擇法或克隆的方法從原代培養(yǎng)的細(xì)胞群中篩選出的具有特定性質(zhì)或標(biāo)志的細(xì)胞群，在培養(yǎng)過(guò)程中其特征始終保持不變。 （ cell line） :在培養(yǎng)條件下可進(jìn)行無(wú)限分裂的細(xì)胞群。 ： 正常細(xì)胞在某種因子的作用下發(fā)生突變而具有癌性的細(xì)胞。 培養(yǎng) 的細(xì)胞類型：原代細(xì)胞和繼代細(xì)胞；細(xì)胞株和細(xì)胞系； 細(xì)胞培養(yǎng)物的名稱：克隆、外植體和愈傷組織 (clone) ：由單一祖先經(jīng)過(guò)無(wú)性繁殖產(chǎn)生的遺傳性一致的后代群體。 （ explant） :取自成體或胚胎，用于體外培養(yǎng)的組織和細(xì)胞群 二、填空題 ，第一種是 自發(fā)熒光 ，如葉綠素、血紅素等經(jīng)紫外線照射后，能發(fā)出紅色的熒光 。第二種是 誘發(fā)熒光 ，即物體經(jīng)熒光染料染色后再通過(guò)紫外線照射發(fā)出熒光。 電融合技術(shù) ，舉出化學(xué)融合 所需的兩種化學(xué)物質(zhì) 滅活的仙臺(tái)病毒 和 聚乙二醇， PEG。 DNA 的三種功能元件為 著絲粒 ， 端粒 ， 復(fù)制起點(diǎn) 。異染色質(zhì)可分為 組成型異染色質(zhì) ， 兼型異染色質(zhì) 4 定量的細(xì)胞化學(xué)分析技術(shù)有 顯微分光光度分析 ， 流式細(xì)胞儀 等。寫出兩種特殊顯微鏡的名稱，如熒光顯微鏡， 掃描隧道顯微鏡 ， 相差顯微鏡 。 5. 自發(fā)熒光是指 生物體內(nèi)有些物質(zhì)受激發(fā)光照射后可直接發(fā)出的熒光。寫出五種 自身熒光物質(zhì)： FAD、 FMN、 NADH、 木質(zhì)素 、 卟啉 。 三、選擇題 1. 通過(guò)選擇性或克隆形式從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志的細(xì)胞群體稱作 B 。 A. Cell Line B. Cell Strain C. Cell Library D. Others 2. 研究 DNA 在細(xì)胞中的代謝 , 常用的同位素標(biāo)記物有 D 。 A． 14 C戊糖 B． 32 P磷酸 C． 15 N鳥嘌呤 D. 3 H胸腺嘧啶 A 。 A. PEG(聚乙二醇 ) B. TMV(煙草花葉病 )病毒 C. 亞硝酸 誘變劑 D. PHV(植物凝集素 )外圍培養(yǎng) 4. 細(xì)胞培養(yǎng)技 術(shù) B 。 A. 可用來(lái)研究細(xì)胞生理和細(xì)胞各種功能 B. 首先用胰蛋白酶將動(dòng)物或植物組織進(jìn)行酶解 , 游離出單細(xì)胞再進(jìn)行培養(yǎng) C. 用小牛血清配制的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng) D. 培養(yǎng)過(guò)程可用普通光學(xué)顯微鏡進(jìn)行觀察 5. 在雜交瘤技術(shù)中 , B 。 A. B 淋巴細(xì)胞與 B 淋巴瘤細(xì)胞融合 , 目的是抑
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