【正文】 性廣、色譜柱可反復(fù)使用、流出組分易收集，因而應(yīng)用日益廣泛。 第三節(jié) 中藥的鑒定 第三章 天然藥物的質(zhì)量保證 分光光度法 分光光度法是通過測定被測物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)的光吸收度，對該物質(zhì)進行定性和定量分析的方法。分光光度分析的方法很多，主要有紫外分光光度法、比色法、紅外分光光度法、原子吸收分光光度法、核磁共振光譜法、質(zhì)譜法、 X射線衍射分析法等。這些方法，過去多用于純化合物的結(jié)構(gòu)鑒定和定量分析上，近年來已逐漸應(yīng)用于藥材的鑒定，其中以紫外分光光度法應(yīng)用最多。 中藥中含有過量的水分，不僅易蟲蛀、霉爛變質(zhì)，使有效成分分解，且相對地減少了實際用量而達不到治療目的。因此控制天然藥物中水分的含量對保證天然藥物質(zhì)量有密切關(guān)系。 第三節(jié) 中藥的鑒定 第三章 天然藥物的質(zhì)量保證 中藥中的灰分，包括中藥本身經(jīng)過灰化后遺留的不揮發(fā)性無機鹽，以及中藥表面附著的不揮發(fā)性無機鹽類，即總灰分。各種中藥在無外來攙摻雜物時，總灰分應(yīng)在一定范圍以內(nèi)，如果所測灰分值高于正常范圍，表明摻有泥土、砂石等無機雜質(zhì)。現(xiàn)行版 《 中國藥典 》 規(guī)定了中藥總灰分的最高限量，如阿膠不得過 %，西紅花不得過 %，肉桂不得過 %，它對保證中藥的純度具有重要意義。 第三節(jié) 中藥的鑒定 第三章 天然藥物的質(zhì)量保證 有些中藥的總灰分本身差異較大，特別是組織中含草酸鈣結(jié)晶較多的品種，如大黃，測定總灰分有時不足以說明外來無機物的存在，還需要測定酸不溶性灰分，即不溶于 10%鹽酸中的灰分。因天然藥物所含的無機鹽類（包括鈣鹽）大多可溶于稀鹽酸中而除去，而來自泥砂等的硅酸鹽類則不溶解而殘留，所以測定酸不溶性灰分能較準確的表明中藥中是否有泥砂等摻雜及其含量。測定方法詳見現(xiàn)行版 《 中國藥典 》 版一部附錄 Ⅸ K。 第三節(jié) 中藥的鑒定 第三章 天然藥物的質(zhì)量保證 對于有效成分或主成分尚不明確，或其成分明確尚無精確定量方法的中藥，一般可根據(jù)已知成分的溶解性質(zhì)，進行浸出物的測定。中藥中的成分在水或其他適當溶劑中，在一定的條件下其浸出物的含量大致有一定的范圍。因此以浸出物的含量控制中藥的質(zhì)量，目前具有實際意義。浸出物測定通常包括水溶性浸出物、醇溶性浸出物和醚溶性浸出物的測定。測定方法詳見現(xiàn)行版 《 中國藥典 》 一部附錄 Ⅹ A 。 利用中藥中所含揮發(fā)性成分能與水蒸氣同時餾出來的性質(zhì)，在揮發(fā)油測定器中進行測定。適用于含較多量揮發(fā)油的中藥。具體儀器裝置及方法詳見現(xiàn)行版 《 中國藥典 》 一部附錄Ⅹ D 。 第三節(jié) 中藥的鑒定 第三章 天然藥物的質(zhì)量保證 是指對中藥的有效成分，或主要成分，或指示性成分，以及有毒成分的含量測定，是中藥品質(zhì)評價的重要量化指標之一，現(xiàn)行版 《 中國藥典 》 一部對 281個藥材及飲片品種規(guī)定了含量測定指標，如馬錢子、大黃、天麻、甘草、厚樸、薄荷等。含量測定方法有化學(xué)定量法和儀器分析法等。 中藥中的有害物質(zhì)包括農(nóng)藥殘留物質(zhì)、霉菌和霉菌毒素、重金屬及有害元素等。中藥如果污染了有害物質(zhì)就會危害人民健康。近年來，中藥的安全性評價越來越受到世人的關(guān)注。藥物的安全性和有效性是同樣重要的，因此，對中藥中的有害物質(zhì)作限量檢查是十分重要的。 第三節(jié) 中藥的鑒定 第三章 天然藥物的質(zhì)量保證 (1)農(nóng)藥殘留量的檢查： 農(nóng)藥的種類很多，主要為有機氯、有機磷和擬除蟲菊酯類，其中有機氯類農(nóng)藥中六六六 (BHC)和滴滴涕 (DDT)是使用最久、數(shù)量最大的農(nóng)藥，雖然我國已于 1983年開始禁用有機氯農(nóng)藥，但由于它們用后在土壤和生物體中長期殘留和蓄積，對人類危害極大。故世界各國都非常重視食品和藥物中農(nóng)藥殘留量的檢測和限量問題?，F(xiàn)行版 《 中國藥典 》 規(guī)定，甘草、黃芪含有機氯農(nóng)藥殘留量六六六 (總 BHC)不得超過千萬分之二；滴滴涕（總 DDT）不得超過千萬分之二；五氯硝基苯（ PCNB）不得超過千萬分之一。藥典選用氣相色譜法測定中藥中有機氯、有機磷和擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量，測定方法詳見現(xiàn)行版 《 中國藥典 》 一部附錄 IX Q。 第三節(jié) 中藥的鑒定 第三章 天然藥物的質(zhì)量保證 (2)黃曲霉毒素檢查：許多中藥如儲存不當易霉變而產(chǎn)生黃曲霉毒素。黃曲霉毒素是強烈的致癌物質(zhì)，因此世界各國對食品和藥品中黃曲霉毒素的限量都作了嚴格的規(guī)定。有關(guān)檢測的方法主要是根據(jù)黃曲霉毒素中毒性最大的成分黃曲霉毒素 Bl、 B2和 GG2能溶于氯仿、甲醇而不溶于己烷、乙醚和石油醚的性質(zhì)，在紫外光下 (365nm)觀察，分別呈藍色和黃綠色熒光，或通過薄層色譜，用已知濃度的黃曲霉毒素標準品作對照，根據(jù)斑點大小定量。 第三節(jié) 中藥的鑒定 第三章 天然藥物的質(zhì)量保證 (3)重金屬檢查：重金屬是指在實驗條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用顯色的金屬雜質(zhì)，如鉛、汞、鉻、銅、鎘等。 《 中國藥典 》 收載重金屬檢查的中藥主要是礦物藥類，如石膏含重金屬不得過百萬分之十；少數(shù)揮發(fā)油，如丁香羅勒油含重金屬不得過百萬分之十；八角茴香油含重金屬不得過百萬分之五；個別加工品，如阿膠含重金屬不得過百萬分之三十。操作方法詳見現(xiàn)行版《 中國藥典 》 一部附錄 IX E。 第三節(jié) 中藥的鑒定 第三章 天然藥物的質(zhì)量保證 (4)砷鹽檢查：砷是公認的對人體極其有害的元素，現(xiàn)行版《 中國藥典 》 規(guī)定用古蔡氏法或二乙基硫代氨基甲酸銀法兩種方法檢查砷鹽 ,具體方法詳見現(xiàn)行版 《 中國藥典 》 一部附錄 IX F。現(xiàn)行版 《 中國藥典 》 規(guī)定，石膏含砷鹽不得過百萬分之二；阿膠含砷鹽不得過百萬分之三；芒硝含砷鹽不得過百萬分之十。 (5)其他有害物質(zhì)檢查：有的中藥因寄生于有毒植物而產(chǎn)生有害物質(zhì)，也須加以檢查。例如桑寄生若寄生在夾竹桃樹上，會含有夾竹桃中的強心苷而具毒性，故現(xiàn)行版 《 中國藥典 》 規(guī)定，桑寄生須作強心苷檢查，以保證用藥的安全。 第三節(jié) 中藥的鑒定 第三章 天然藥物的質(zhì)量保證 隨著分子生物技術(shù)的飛速發(fā)展， DNA分子遺傳標記技術(shù)已在中藥的品種整理和鑒定中應(yīng)用。 DNA分子作為遺傳信息的直接載體，不受外界因素和生物體發(fā)育階段及器官組織差異的影響，每一個體的任一體細胞均含有相同的遺傳信息。不同的物種由于組成 DNA分子的 4種堿基排列順序不同，表現(xiàn)為遺傳多樣性，可以選擇合適的 DNA分子遺傳標記技術(shù)，進行準確的物種鑒定。 （一） DNA分子遺傳標記技術(shù) 隨著現(xiàn)代科技的發(fā)展，新設(shè)備、新技術(shù)的應(yīng)用，中藥的鑒定手段和方法發(fā)展也很快。目前中藥鑒定的新技術(shù)和新方法主要有： 四、中藥鑒定的新技術(shù)和新方法簡介 第三節(jié) 中藥的鑒定 第三章 天然藥物的質(zhì)量保證 在中藥鑒定中應(yīng)用的主要 DNA分子遺傳標記技術(shù)有：限制性內(nèi)切酶酶切片段長度多態(tài)性（ RELP）、聚合酶鏈式反應(yīng)（ PCR）、隨機擴增多態(tài)性 DNA（ RAPD）和任意引物 PCR（ APPCR）、 PCR擴增的特定片段的限制性位點分析（ PCRRELP）、擴增酶切片段多態(tài)性（ AFLP）、 DNA測序方法等。 第三節(jié) 中藥的鑒定 第三章 天然藥物的質(zhì)量保證 中藥化學(xué)指紋圖譜是指某種（或某產(chǎn)地）中藥材或中成藥中所共有的、具有特征性的某類或幾類化學(xué)成分的色譜或光譜的圖譜。因為這些圖譜很象人的指紋具有特征性，故而得名。中藥化學(xué)指紋圖譜對控制中藥質(zhì)量有重要意義。其特點是：①通過指紋圖譜的特征性，能有效鑒別樣品的真?zhèn)位虍a(chǎn)地。②通過指紋圖譜主要特征峰的面積和比例的測定，能有效控制樣品質(zhì)量，保證樣品質(zhì)量的相對穩(wěn)定。中藥化學(xué)指紋圖譜首推色譜方法和聯(lián)用技術(shù)，目前使用最多的中藥化學(xué)指紋圖譜是采用高效液相色譜法構(gòu)建的。 （二）中藥化學(xué)指紋圖譜鑒定技術(shù) 第三節(jié) 中藥的鑒定 第三章 天然藥物的質(zhì)量保證 應(yīng)用顯微操作器取出細胞中的結(jié)晶、油滴，再用高效液相色譜、氣相色譜及氣 質(zhì)聯(lián)儀分析，鑒定出化學(xué)成分，這種方法稱為“組織化學(xué)色譜法”。利用這一技術(shù)查明了丁香中主成分丁香酚在花蕾中主為乙酰丁香酚，以后逐步轉(zhuǎn)化為丁香酚。這項技術(shù)現(xiàn)已發(fā)展到能將電視、顯微操作器和示波器連接在一起進行工作，這對細胞內(nèi)各組分移植后，細胞和組分的活動變化研究，具有重要意義 。 （三）組織化學(xué)色譜法 第三節(jié) 中藥的鑒定 第三章 天然藥物的質(zhì)量保證 在形態(tài)組織學(xué)方面，現(xiàn)已突破傳統(tǒng)的二維平面局限，借助計算機圖形學(xué)、計算機三維重建、體視學(xué)和圖象分析系統(tǒng)等手段，將中藥組織形態(tài)學(xué)研究推向三維化、可視化、定量化。其研究結(jié)果有助于形象生動的把握中藥整體和局部的概貌、特征以及特征細胞的空間相互位置關(guān)系極其定量化參數(shù)，使中藥鑒定更科學(xué)、更全面、更客觀。應(yīng)用此技術(shù)的研究有仙矛屬植物花粉的鑒別、麥冬類中藥組織形態(tài)計算機三維重建模型圖鑒、郁金類顯微定量圖象模式識別等。 （四）計算機技術(shù) 第三節(jié) 中藥的鑒定 第三章 天然藥物的質(zhì)量保證 中藥鑒定學(xué)